發(fā)布時間：2021-10-29 12:50

　　近年來,Adcetris（?）和 Kadcyla（?）等抗體偶聯(lián)藥物（antibody-drug conjugates,ADCs）在臨床上取得了顯著的成功,再一次證實ADCs是一種對抗癌癥的強大武器。但傳統(tǒng)的偶聯(lián)方法通過抗體上賴氨酸殘基或鏈間二硫鍵還原產(chǎn)生的半胱氨酸殘基共價連接細(xì)胞毒性藥物,所獲得的ADCs的藥物抗體偶聯(lián)比（drug to antibody ratio,DAR）和偶聯(lián)位點的變動性較大,導(dǎo)致較大的異質(zhì)性。因此,定點偶聯(lián)技術(shù)亟待開發(fā)。1直接酶法制備抗體偶聯(lián)藥物Sortase A酶（SrtA）介導(dǎo)的偶聯(lián)反應(yīng)能特異性識別LPXTG并連接一系列含寡甘氨酸的底物,但由于野生型SrtA的動力學(xué)性質(zhì)比較差,為保證有效的偶聯(lián),需要加大酶的用量,延長反應(yīng)時間,限制了其廣泛應(yīng)用。前期研究中我們利用野生型SrtA（AN59）催化抗CD20抗體ofatumumab（OFA）定點偶聯(lián)海兔毒素衍生物（Monomethyl auristatin E,MMAE）制備抗 CD20 抗體偶聯(lián)藥物 OFA-vcMMAE。最近報道篩選出了活性更強的突變型SrtA（7M）,我們表達(dá)了野生型SrtA（AN59）和突... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１抗體偶聯(lián)藥物結(jié)構(gòu)示意圖

早在一個世紀(jì)前，德國免疫學(xué)者Ｐａｕｌ?Ｅｈｒｌｉｃｈ就提出了“魔術(shù)子彈”的概念［１］。??抗體偶聯(lián)藥物（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，?ＡＤＣｓ）由抗體、細(xì)胞毒性藥物、以及??連接物（ｌｉｎｋｅｒ）三部分組成（圖１．１），以抗體為載體，選擇性將“彈頭”藥物送至??靶細(xì)胞，與腫瘤細(xì)胞表面特異性抗原結(jié)合，并通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入溶酶體，在??溶酶體內(nèi)被組織蛋白酶等水解酶水解，釋放出細(xì)胞毒性藥物，特異性殺死腫瘤細(xì)??胞（圖１．２）。與化療和聯(lián)合治療相比，ＡＤＣｓ選擇性好，能顯著減少脫靶毒性，??招寬治療窗。近年來，Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ?ｖｅｄｏｔｉｎ?（Ａｄｃｅｔｒｉｓ？，ＳＧＮ－３５）和Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ??ｅｍｔａｎｓｉｎｅ?（Ｋａｄｃｙｌａ？，Ｔ－ＤＭ１）等ＡＤＣｓ在臨床上取得了顯著的成功，再一次證實??ＡＤＣｓ是一種對抗癌癥的強大武器［２－５］。??Ｈｉ?下??圖１．１抗體偶聯(lián)藥物結(jié)構(gòu)示意圖。ＡＤＣｓ由抗體、細(xì)胞毒性藥物、以及連接物三部??分組成。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．?ＡＤＣｓ?ｃｏｎｓｉｓｔ?ｏｆ?ａ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ??ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ?ｔｏ?ａ?ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｂｙ?ｍｅａｎｓ?ｏｆ?ａ?ｓｅｌｅｃｔ?ｌ

（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ，Ｒｉｔｕｘａｎ？）、奧法木單抗（Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ，Ａｒｚｅｒｒａ？）、托西莫單抗??（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ，ＢｅｘｘａｒＢ）和阿托珠單抗（Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ，ＧａｚｙｖａＫ）等。??抗ＣＤ２０抗體通過數(shù)種機(jī)制導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡［１０］（圖１．３）。首先，抗體和ＣＤ２０??的結(jié)合可通過Ｃｌｑ激活補體級聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞死亡或補體蛋白在細(xì)胞膜上??沉積，這種現(xiàn)象被稱為補體依賴的細(xì)胞毒作用（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，??ＣＤＣ）。另外，抗體結(jié)合的靶細(xì)胞也可通過抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用??（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，?ＡＤＣＣ）而被表迗Ｆｅｙ受體的免疫??細(xì)胞殺死。此外，和ＣＤ２０結(jié)合的抗體也有可能發(fā)揮直接抗增殖效應(yīng)或主動誘導(dǎo)細(xì)??胞凋亡。??典法木ｍ抗??結(jié)合位說??補體介導(dǎo)的溶怍用?利妥執(zhí)??托西興電ｍ??蚺臺ｃｈ?ｗ托珠？ｍ??？Ｘ?＼?坫—？??？隱４丨Ｈ??？合抗體?人類伉休??Ｉ利妥情》沆）?法木明??和妞相生長抑制??圖１．３抗ＣＤ２０抗體的作用機(jī)制［１（）］�？贵w結(jié)合ＣＤ２０通過補體依賴的細(xì)胞毒作用、??抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用以及直接抗增殖效應(yīng)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｒｅｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ?ｏｆ?ａｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｎｔｉ－ＣＤ２０?ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ１１０］．?Ｉｎ??ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?（ＣＤＣ）


本文編號：3464692