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大洋來源真菌鏈格孢菌114-1G發(fā)酵條件考察與抗腫瘤產(chǎn)物初探

發(fā)布時間:2021-10-21 17:03
  目的考察大洋來源真菌鏈格孢菌114-1G發(fā)酵條件,大量發(fā)酵并分離鑒定代謝產(chǎn)物,初步測評代謝產(chǎn)物活性,為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。方法采用CCK-8法測試樣品對HeLa細(xì)胞的抑制活性;以生物量和提取物活性為指標(biāo),考察發(fā)酵條件并進(jìn)行初步優(yōu)化;采用硅膠和LH-20柱色譜及半制備高效液相色譜法(COSMOSIL C18色譜柱)分離純化代謝產(chǎn)物;根據(jù)MS、1H NMR、13C NMR數(shù)據(jù)鑒定化合物。結(jié)果考察確定大量發(fā)酵用較優(yōu)發(fā)酵條件為:培養(yǎng)基組成為甘露醇25 g/L、麥芽糖15 g/L、葡萄糖10 g/L、味精10 g/L、大豆蛋白胨5 g/L、酵母提取粉3 g/L、海水添加量60%、初始pH 7.5,發(fā)酵溫度10℃、時間15 d,搖床轉(zhuǎn)速150 r/min。從發(fā)酵產(chǎn)物中分離鑒定了cyclo(Gla-Tyr)(1)、cyclo(Ala-Ile)(2)、thymidine DNA nucleotide(3)和pachybasin(4),其中4的活性相對較強(qiáng),100 mg/L濃度下抑制率為57.8%。同時,還分離得到了另外幾個化合物,其中一個酚酸類根據(jù)已闡明平面結(jié)構(gòu)的文獻(xiàn)調(diào)研表明為一新化合物,所得化合物結(jié)構(gòu)... 

【文章來源】:國際藥學(xué)研究雜志. 2020,47(03)北大核心

【文章頁數(shù)】:9 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 體外抗腫瘤活性測試
    1.3 鏈格孢菌114-1G種子液制備
    1.4 基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基選擇
    1.5 發(fā)酵培養(yǎng)基組成考察
        1.5.1 碳源考察
        1.5.2 氮源考察
    1.6 發(fā)酵培養(yǎng)條件考察
        1.6.1 培養(yǎng)時間考察
        1.6.2 培養(yǎng)溫度考察
        1.6.3 初始pH考察
        1.6.4 海水添加比例考察
        1.6.5 搖床轉(zhuǎn)速考察
    1.7 大量發(fā)酵與化合物分離
2 結(jié)果
    2.1 發(fā)酵培養(yǎng)基考察
        2.1.1 碳源對目標(biāo)菌發(fā)酵的影響
        2.1.2 氮源對目標(biāo)菌發(fā)酵的影響
    2.2 發(fā)酵條件考察
        2.2.1 培養(yǎng)時間對鏈格孢菌114-1G生長的影響
        2.2.2 培養(yǎng)溫度對鏈格孢菌114-1G發(fā)酵的影響
        2.2.3 海水添加比例對鏈格孢屬114-1G發(fā)酵的影響
        2.2.4 培養(yǎng)基初始pH對鏈格孢菌114-1G發(fā)酵的影響
        2.2.5 搖床轉(zhuǎn)速對鏈格孢菌114-1G發(fā)酵的影響
    2.3 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定與體外HeLa細(xì)胞抑制活性
        2.3.1 化合物結(jié)構(gòu)鑒定
        2.3.2 化合物對HeLa細(xì)胞的體外抑制活性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[10]產(chǎn)低溫淀粉酶的海洋真菌篩選及研究[J]. 張剛,汪天虹,張臻峰,汪浩,肖天.  海洋科學(xué). 2002(02)



本文編號:3449387

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