IGFBP-2對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞生命活動(dòng)的作用及機(jī)制的初步探索
發(fā)布時(shí)間:2021-10-15 18:03
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2,IGFBP-2)來(lái)自于胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(Insulin-like Growth Factor Binding Proteins,IGFBPs)家族,該蛋白家族高度保守,涉及多種復(fù)雜的生命過(guò)程。IGFBP-2可以與胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulin-like Growth Factor,IGF)結(jié)合,在局部調(diào)節(jié)IGF的濃度,也可以單獨(dú)發(fā)揮生物學(xué)功能。有研究發(fā)現(xiàn)在廣西巴馬長(zhǎng)壽人群后代中,IGFBP-2的含量較非長(zhǎng)壽人群后代顯著增高,并且在長(zhǎng)壽小鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)新生的現(xiàn)象。另有研究發(fā)現(xiàn),阿爾茲海默癥患者與正常老年個(gè)體相比,血漿中和腦脊液中的IGFBP-2水平上升,這些現(xiàn)象之間可能存在聯(lián)系。作為一種多能的干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞具有分化成為神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞的潛力,他們釋放營(yíng)養(yǎng)因子,替換受損的神經(jīng)元,維持突觸數(shù)量的穩(wěn)定。神經(jīng)干細(xì)胞移植作為一種新興的阿爾茲海默癥治療手段,被寄予厚望。探明IGFBP-2對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的生命活動(dòng)的作用及機(jī)制可能有助于更好地理解神經(jīng)干細(xì)胞移植療法在阿爾茲海...
【文章來(lái)源】:電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:181 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 IGF與 IGFBP蛋白家族
1.2.1 胰島素樣生長(zhǎng)因子
1.2.2 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白
1.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2
1.3.1 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2的基本結(jié)構(gòu)
1.3.2 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2在細(xì)胞層面的功能調(diào)控機(jī)制
1.3.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2在腦發(fā)育及大腦功能方面的研究
1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 IGFBP-2 對(duì)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2 增殖分化的影響
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
2.1.2 試劑
2.1.3 材料
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)液與凍存液配制
2.2.2 細(xì)胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代與凍存
2.2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
2.2.4 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記法檢測(cè)IGFBP-2對(duì)C17.2 增殖的影響
2.2.5 CCK8 法檢測(cè)細(xì)胞活力
2.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記法檢測(cè)IGFBP-2對(duì)C17.2 增殖的影響
2.3.2 IGFBP-2對(duì)C17.2 細(xì)胞活力的影響
2.3.3 IGFBP-2對(duì)C17.2 細(xì)胞遷移的影響
2.4 本章小結(jié)
第三章 ITRAQ蛋白質(zhì)組學(xué)分析IGFBP-2 對(duì)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2 的影響
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
3.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
3.1.2 試劑
3.1.3 材料
3.1.4 儀器設(shè)備
3.2 方法
3.2.1 溶液配制
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.3 蛋白質(zhì)提取
3.2.4 總蛋白定量和SDS-PAGE質(zhì)檢
3.2.5 ITRAQ標(biāo)記
3.2.6 餾分分離
3.2.7 液質(zhì)檢測(cè)
3.2.8 信息分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 總蛋白定量結(jié)果
3.3.2 SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果
3.3.3 IGFBP-2 處理的C17.2 細(xì)胞和未處理的C17.2 細(xì)胞的差異表達(dá)蛋白
3.3.3.1 蛋白差異分析結(jié)果
3.3.3.2 差異蛋白火山圖
3.3.3.3 差異蛋白聚類熱圖
3.3.4 差異蛋白的富集分析
3.3.5 差異蛋白通路注釋分析
3.3.6 差異蛋白的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析
3.4 討論
3.5 本章小結(jié)
第四章 全文總結(jié)與展望
4.1 全文總結(jié)
4.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Brain injury and neural stem cells[J]. Parker E.Ludwig,Finosh G.Thankam,Arun A.Patil,Andrea J.Chamczuk,Devendra K.Agrawal. Neural Regeneration Research. 2018(01)
本文編號(hào):3438388
【文章來(lái)源】:電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:181 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 IGF與 IGFBP蛋白家族
1.2.1 胰島素樣生長(zhǎng)因子
1.2.2 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白
1.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2
1.3.1 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2的基本結(jié)構(gòu)
1.3.2 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2在細(xì)胞層面的功能調(diào)控機(jī)制
1.3.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2在腦發(fā)育及大腦功能方面的研究
1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 IGFBP-2 對(duì)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2 增殖分化的影響
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
2.1.2 試劑
2.1.3 材料
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)液與凍存液配制
2.2.2 細(xì)胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代與凍存
2.2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
2.2.4 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記法檢測(cè)IGFBP-2對(duì)C17.2 增殖的影響
2.2.5 CCK8 法檢測(cè)細(xì)胞活力
2.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記法檢測(cè)IGFBP-2對(duì)C17.2 增殖的影響
2.3.2 IGFBP-2對(duì)C17.2 細(xì)胞活力的影響
2.3.3 IGFBP-2對(duì)C17.2 細(xì)胞遷移的影響
2.4 本章小結(jié)
第三章 ITRAQ蛋白質(zhì)組學(xué)分析IGFBP-2 對(duì)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2 的影響
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
3.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
3.1.2 試劑
3.1.3 材料
3.1.4 儀器設(shè)備
3.2 方法
3.2.1 溶液配制
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.3 蛋白質(zhì)提取
3.2.4 總蛋白定量和SDS-PAGE質(zhì)檢
3.2.5 ITRAQ標(biāo)記
3.2.6 餾分分離
3.2.7 液質(zhì)檢測(cè)
3.2.8 信息分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 總蛋白定量結(jié)果
3.3.2 SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果
3.3.3 IGFBP-2 處理的C17.2 細(xì)胞和未處理的C17.2 細(xì)胞的差異表達(dá)蛋白
3.3.3.1 蛋白差異分析結(jié)果
3.3.3.2 差異蛋白火山圖
3.3.3.3 差異蛋白聚類熱圖
3.3.4 差異蛋白的富集分析
3.3.5 差異蛋白通路注釋分析
3.3.6 差異蛋白的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析
3.4 討論
3.5 本章小結(jié)
第四章 全文總結(jié)與展望
4.1 全文總結(jié)
4.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Brain injury and neural stem cells[J]. Parker E.Ludwig,Finosh G.Thankam,Arun A.Patil,Andrea J.Chamczuk,Devendra K.Agrawal. Neural Regeneration Research. 2018(01)
本文編號(hào):3438388
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