目的考察骨肽原液對胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（fetal marrow mesenchymal stem cells, F-BMSCs）成骨分化的影響,并對其相關(guān)作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。方法選取4個(gè)不同廠家生產(chǎn)的骨肽原液,對F-BMSCs干預(yù)的同時(shí)進(jìn)行成骨誘導(dǎo)。誘導(dǎo)后在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行ALP活性及茜素紅染色檢測,使用定量PCR進(jìn)行骨分化標(biāo)志物基因OPN、OCN、Runx2、ALP表達(dá)的檢測,使用Western blot進(jìn)行特異性標(biāo)記蛋白Runx2和OCN表達(dá)的檢測。結(jié)果經(jīng)成骨誘導(dǎo)后,與誘導(dǎo)組相比,骨肽供試品組廠家C骨肽原液處理的F-BMSCs ALP活性明顯增加（P<0.05）;廠家B、L骨肽原液處理的F-BMSCs ALP活性高于誘導(dǎo)組,但差異無顯著性（P>0.05）。F-BMSCs經(jīng)茜素紅染色,肉眼觀察廠家B、C、L骨肽原液處理的F-BMSCs紅色明顯增強(qiáng);顯微鏡下廠家B、C、L骨肽原液處理的F-BMSCs茜素紅染色陽性結(jié)節(jié)狀覆蓋面積明顯多于誘導(dǎo)組。廠家B骨肽原液處理的F-BMSCs成骨分化標(biāo)志物基因OPN、OCN、Runx2、ALP的mRNA表達(dá)量增加,明顯高于誘導(dǎo)組; Run... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 藥物與試劑
    1.2 細(xì)胞株
    1.3 儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 促UMR106細(xì)胞增殖作用[6]
    2.2 F-BMSCs免疫表型檢測
    2.3 CCK-8法檢測骨肽原液對F-BMSCs的影響
    2.4 骨肽原液對F-BMSCs誘導(dǎo)成骨ALP活性檢測
    2.5 茜素紅S礦化結(jié)節(jié)染色
    2.6 Real time RT-PCR檢測
        2.6.1 RNA抽提
        2.6.2 cDNA鏈的合成
        2.6.3 Real time RT-PCR
    2.7 Western blot檢測
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 促UMR106細(xì)胞增殖作用
    3.2 F-BMSCs免疫表型檢測
    3.3 CCK-8法檢測骨肽原液對F-BMSCs的影響
    3.4 骨肽原液對F-BMSCs誘導(dǎo)成骨ALP活性檢測
    3.5 茜素紅S礦化結(jié)節(jié)染色
    3.6 Real time RT-PCR測定結(jié)果
    3.7 Western blot檢測結(jié)果
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]局部注射富血小板血漿結(jié)合超聲導(dǎo)入復(fù)方骨肽促進(jìn)骨折愈合的療效研究[J]. 吳進(jìn),羊俊亦,王云華,何斌,張昊元,范磊.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2019(20)
[2]基于生物活性測定的骨肽類制劑質(zhì)量評價(jià)方法[J]. 楊澤岸,張媛,吳彥霖,高華.  中國藥事. 2019(04)
[3]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的研究與進(jìn)展[J]. 董晨露,劉笑涵,吳琳.  中國骨傷. 2019(03)
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[6]淫羊藿苷對MC3T3-E1成骨前體細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)作用及意義[J]. 王建茹,張育敏,韓波.  山東醫(yī)藥. 2018(16)
[7]刺頭復(fù)葉耳蕨總黃酮促進(jìn)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化[J]. 嚴(yán)晨,殷嫦嫦,王子瑤,殷明.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2017(04)
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[10]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在骨組織工程中的應(yīng)用(英文)[J]. 涂強(qiáng),徐國洲,鐘潤泉,王少華.  中國臨床康復(fù). 2006(37)



本文編號：3436171