目的探討大氣細(xì)顆粒物（PM2.5）暴露后人肺（支氣管）上皮Beas-2B細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）表達(dá)水平升高的調(diào)控機(jī)制。方法利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)人vegf啟動(dòng)子區(qū)的潛在轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。采用不同濃度PM2.5（0,12.5,25,50,100μg/ml）刺激Beas-2B細(xì)胞,Western印跡法檢測(cè)VEGF表達(dá)調(diào)控相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子及其上游蛋白激酶的表達(dá)或活化水平。利用相關(guān)的siRNA和化學(xué)抑制劑分別抑制各信號(hào)蛋白的表達(dá)和活化后,利用ELISA、Western印跡、RT-PCR和雙熒光素報(bào)告基因分析法檢測(cè)PM2.5誘導(dǎo)VEGF表達(dá)水平改變情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)人vegf啟動(dòng)子區(qū)存在轉(zhuǎn)錄因子早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1（Egr-1）結(jié)合位點(diǎn)。經(jīng)不同濃度PM2.5刺激Beas-2B細(xì)胞后,可檢測(cè)到Egr-1的顯著誘導(dǎo)表達(dá)。采用特異性siRNA抑制Egr-1表達(dá)后,VEGF的轉(zhuǎn)錄和蛋白合成反應(yīng)顯著降低,分泌表達(dá)水平顯著抑制。Egr-1上游蛋白激酶絲裂原活化蛋白激酶p38（p38K）活化水平隨PM2.5劑量升高而增強(qiáng)。其特異性抑制劑SB203580預(yù)處理Beas-2B細(xì)胞后,p38K活化被抑制,Egr-... 

【文章來(lái)源】：軍事醫(yī)學(xué). 2020,44(01)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

PMPM2.5對(duì)Beas‐2B細(xì)胞中Egr‐1表達(dá)水平的影響

Egr‐1對(duì)PM2.5誘導(dǎo)VEGF表達(dá)的影響

PMPM2.5通過(guò)活化p38K誘發(fā)Egr‐1和vegf表達(dá)


本文編號(hào)：3422973