目的1鑒定并解析編碼ACBPs中另一活性組分gMYL6的遺傳信息,獲取gMYL6全序列信息。2構(gòu)建以大腸桿菌為宿主的gMYL6生物合成體系,通過添加聚陽離子氨基酸標(biāo)簽的方式對gMYL6進(jìn)行可溶性表達(dá),以期產(chǎn)生具有更高溶解性的gMYL6重組蛋白。3對gMYL6及其重組蛋白進(jìn)行NK細(xì)胞殺傷活性的評價,檢測其對NK細(xì)胞殺傷活性的影響。方法1采用液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（EASYnLCII-Nano-HPLC）、以Xcalibur 2.0.7軟件輔助獲取多肽數(shù)據(jù),通過對多肽數(shù)據(jù)進(jìn)行NCBInr數(shù)據(jù)庫搜索結(jié)合BLAST分析,獲取gMYL6的生物合成信息。2以E.coli BL21（DE3）為表達(dá)宿主、pET21a（+）為表達(dá)載體,在gMYL6多肽序列末端添加不同長度的聚陽離子氨基酸標(biāo)簽（1¹0個賴氨酸、1¹0個精氨酸）,構(gòu)建gMYL6的異源生物合成體系,對重組蛋白進(jìn)行SDS-PAGE及定量分析。同時設(shè)置不同誘導(dǎo)溫度,觀察溫度對gMYL6及gMYL6-6K表達(dá)的影響。3通過CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測gMYL6及gMYL6-6K對NK細(xì)胞殺傷活性及細(xì)胞表型的影響。結(jié)果... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ACBPs片段的質(zhì)譜圖

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 3 以 pET21a (+)為載體的重組 gMYL6 的表達(dá)組件的結(jié)構(gòu)圖Fig.3 Schematic diagram for the structures of recombinant gMYL6 expression cassettes inplasmid pET21a (+) derivatives

第 2 章 gMYL6 的可溶性表達(dá)表 4 添加不同長度標(biāo)簽的重組 gMYL6 的定量分析4 Quantitative analysis of recombinant gMYL6s with different lengthsYield of target protein (mg/L)Arginine Lysine 2.641* 1.54651.454 1.8255- -1.504 1.432- -1.9615 23.7425***1.6865 1.46951.483 1.44352.6425* 9.152*- 8.502*

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2012年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,左婷婷,賈漫漫,夏昌發(fā),鄒小農(nóng),赫捷.  中國腫瘤. 2016(01)
[2]抗腫瘤小分子多肽的研究進(jìn)展[J]. 張冉,勞興珍,鄭珩.  氨基酸和生物資源. 2012(04)
[3]海洋生物抗腫瘤多肽海兔毒素10及其衍生物的研究進(jìn)展[J]. 曹王麗,宋佳希,李芳秋.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2011(11)
[4]MTT法和CCK-8法檢測細(xì)胞活性之測試條件比較[J]. 熊建文,肖化,張鎮(zhèn)西.  激光生物學(xué)報. 2007(05)
[5]抗癌活性肽對鼻咽癌細(xì)胞周期的影響[J]. 趙媛媛,彭詩東,蘇秀蘭.  中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2006(08)
[6]抗癌活性肽對荷白血病鼠的作用[J]. 侯金鳳,閆美蓉,閆曉紅,榮雅寧,焦團(tuán)梅,蘇秀蘭.  內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2004(01)
[7]抗胃癌生物活性肽對荷胃癌裸鼠LDH同工酶譜的影響[J]. 閆美榮,蘇秀蘭,劉慶平.  腫瘤防治雜志. 2002(04)
[8]細(xì)胞因子模擬肽/非肽刺激造血的研究進(jìn)展[J]. 袁志宏,奚永志,孔繁華.  中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2002(01)



本文編號：3390597