目的1鑒定并解析編碼ACBPs中另一活性組分gMYL6的遺傳信息,獲取gMYL6全序列信息。2構(gòu)建以大腸桿菌為宿主的gMYL6生物合成體系,通過(guò)添加聚陽(yáng)離子氨基酸標(biāo)簽的方式對(duì)gMYL6進(jìn)行可溶性表達(dá),以期產(chǎn)生具有更高溶解性的gMYL6重組蛋白。3對(duì)gMYL6及其重組蛋白進(jìn)行NK細(xì)胞殺傷活性的評(píng)價(jià),檢測(cè)其對(duì)NK細(xì)胞殺傷活性的影響。方法1采用液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（EASYnLCII-Nano-HPLC）、以Xcalibur 2.0.7軟件輔助獲取多肽數(shù)據(jù),通過(guò)對(duì)多肽數(shù)據(jù)進(jìn)行NCBInr數(shù)據(jù)庫(kù)搜索結(jié)合BLAST分析,獲取gMYL6的生物合成信息。2以E.coli BL21（DE3）為表達(dá)宿主、pET21a（+）為表達(dá)載體,在gMYL6多肽序列末端添加不同長(zhǎng)度的聚陽(yáng)離子氨基酸標(biāo)簽（1¹0個(gè)賴氨酸、1¹0個(gè)精氨酸）,構(gòu)建gMYL6的異源生物合成體系,對(duì)重組蛋白進(jìn)行SDS-PAGE及定量分析。同時(shí)設(shè)置不同誘導(dǎo)溫度,觀察溫度對(duì)gMYL6及gMYL6-6K表達(dá)的影響。3通過(guò)CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)gMYL6及gMYL6-6K對(duì)NK細(xì)胞殺傷活性及細(xì)胞表型的影響。結(jié)果... 

【文章來(lái)源】：華北理工大學(xué)河北省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ACBPs片段的質(zhì)譜圖

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 3 以 pET21a (+)為載體的重組 gMYL6 的表達(dá)組件的結(jié)構(gòu)圖Fig.3 Schematic diagram for the structures of recombinant gMYL6 expression cassettes inplasmid pET21a (+) derivatives

第 2 章 gMYL6 的可溶性表達(dá)表 4 添加不同長(zhǎng)度標(biāo)簽的重組 gMYL6 的定量分析4 Quantitative analysis of recombinant gMYL6s with different lengthsYield of target protein (mg/L)Arginine Lysine 2.641* 1.54651.454 1.8255- -1.504 1.432- -1.9615 23.7425***1.6865 1.46951.483 1.44352.6425* 9.152*- 8.502*

【參考文獻(xiàn)】：
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