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Lactobacillus buchneri TCP016胞外多糖的提取純化及其對LPS/D-GalN肝損傷保護作用的研

發(fā)布時間:2021-09-03 23:40
  乳酸菌胞外多糖是乳酸菌重要的代謝產(chǎn)物,具有多種生物學(xué)功能。本研究從實驗室分離鑒定的益生性乳酸菌L.buchneri TCP016中分離純化胞外多糖。利用LPS/D-GalN誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型,研究EPS016對急性肝損傷的保護性能,探討其對炎性細胞因子,抗氧化因子,凋亡因子及腸道菌群的影響。結(jié)果如下:1.通過醇提法從L.buchneri TCP016中提取多糖,經(jīng)過去菌體、除蛋白、醇沉、冷凍干燥后得到粗多糖。粗多糖經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B色譜柱純化后得到均一組分-EPS016。通過紅外和紫外光譜掃描分析,EPS016中不含有核酸和蛋白質(zhì),且具有多糖的特殊吸收峰,存在α-吡喃糖環(huán)構(gòu)型。多角度激光光散射儀測定其分子量為8.509×104 Da,離子色譜檢測單糖組成發(fā)現(xiàn),EPS016主要由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、氨基葡萄糖(GlcN)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、半乳糖醛酸(GalA)和葡萄糖醛酸(GlcA)等9種單糖組成,主要組分摩爾比鼠李糖:葡萄糖... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

Lactobacillus buchneri TCP016胞外多糖的提取純化及其對LPS/D-GalN肝損傷保護作用的研


乳酸菌胞外多糖促進人體健康的途徑[23]

洗脫曲線,離子交換柱,洗脫曲線,多糖


rose Fast Flow 離子柱純化乙醇分級沉淀后得到的粗多糖用Tris-HCl溶解,過濾后采化進行進一步分離純化。上樣的多糖濃度為 10 mg/ml,上 M NaCl 的 Tris-HCl 洗脫液進行線性梯度洗脫,最后用管號為橫坐標(biāo),以洗脫液中的多糖含量為縱坐標(biāo)作圖,得后得到三個組分,分別為 EPS1、EPS2 和 EPS3。由于這后洗脫下來的,表明 EPS1、EPS2 和 EPS3 這三種多糖均PS2 含量較少,故只收集 EPS3 的主峰即 35-56 管的樣品析袋透析 2 d,并經(jīng)真空冷凍干燥后得到初步純化的多糖

洗脫曲線,紫外掃描


圖 2.2 EPS 經(jīng) Sepharose CL-6B 色譜柱洗脫曲線Fig. 2.2 Elution curve of the EPS on Sepharose CL-6B外光譜掃描了進一步證明經(jīng)分子篩純化的多糖組分是否含有核酸和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)0 nm 范圍內(nèi)對其進行紫外光譜掃描,掃描結(jié)果如圖 2.3。橫坐標(biāo)代表紫外波長代表響應(yīng)強度(μAu)。結(jié)果顯示,EPS016 只在 206 nm 處出現(xiàn)了多糖特有響應(yīng)nm 和 280 nm 處均無特殊吸收峰出現(xiàn),表明 EPS016 不含蛋白質(zhì)和核酸這兩


本文編號:3382102

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