研究目的:前期研究證實,基于人α防御素5（humanα-defensin5,HD5）改造的新型納米抗生素HD5-myr可以在水溶液中自組裝形成納米膠束結構,能耐受酶的降解、穩(wěn)定性增加,抗菌譜擴大,體外、體內殺菌效果均顯著增強,能明顯改善膿毒癥小鼠預后,無明顯毒性、安全性好。本研究在前期研究的基礎上,證實HD5-myr對內毒素的中和作用并探究可能的機制,為其臨床轉化提供理論證據。研究方法:通過固相合成的方法合成新型納米抗生素HD5-myr,高效液相色譜分離并驗證其純度,質譜分析多肽分子合成成功;通過透射電子顯微鏡（transmission electron microscope,TEM）觀察納米膠束結構形成,應用動態(tài)光散射檢測納米顆粒直徑。構建熒光標記的HD5、HD5-myr以及Ecoli,激光共聚焦技術證實HD5-myr對E.coli的結合能力;通過掃描電子顯微鏡（scanning electron microscope,SEM）觀察HD5、HD5-myr對E.coli形態(tài)學的改變。體外、體內實驗驗證HD5-myr是否能改善LPS介導的炎癥反應和急性肺損傷。利用TEM驗證HD5-myr... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１人體六種ａ防御素的氨基酸序列（Ａ）及晶體結構比對（Ｂ）??

經過篩選，在ＨＤ５的Ｃ端偶聯一條肉豆蔑酸鏈（ｍｙｒｉｓｔｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｈａｉｎ，?ｍｙｒ）??得到的改造體穩(wěn)定性最優(yōu)、殺菌效果最佳，我們稱之為肉豆蔻酸Ｃ端修飾的ＨＤ５??（ＨＤ５－ｍｙｒ）（圖１．２）。本團隊前期研究顯示丨２７】，兩親性分子ＨＤ５－ｍｙｒ在水溶液??中自組裝形成納米膠束結構，這種納米結構較ＨＤ５更能耐受血清中酶的降解，理??化穩(wěn)定性增加；正電荷更加集中，對細菌細胞壁和細胞膜的穿透作用更強（圖１．３）；??體外、體內實驗證實其殺菌效果更好，顯著改善膿毒癥小鼠的預后；安全性好，??無明顯毒性。??３??

－＾＾＿ａｗ＞Ａｘ?＿＿；??圖１．２?ＨＤ５納米改造原理??［摘自本團隊前期研究成果ＡＣＳ?Ｎａｎｏ，?２０１８，?１２：５２８４－５２９６．］??根據納米藥物的設計理念，本研究團隊運用超分子化學的藥物設計策略，在??天然ＨＤ５的Ｎ端或Ｃ端增加不同類別的脂肪酸鏈（如ＤＨＡ、ＡＬＡ、肉豆蔻酸、??月桂酸）。經過篩選，在ＨＤ５的Ｃ端偶聯一條肉豆蔑酸鏈（ｍｙｒｉｓｔｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｈａｉｎ，?ｍｙｒ）??得到的改造體穩(wěn)定性最優(yōu)、殺菌效果最佳，我們稱之為肉豆蔻酸Ｃ端修飾的ＨＤ５??（ＨＤ５－ｍｙｒ）（圖１．２）。本團隊前期研究顯示丨２７】，兩親性分子ＨＤ５－ｍｙｒ在水溶液??中自組裝形成納米膠束結構，這種納米結構較ＨＤ５更能耐受血清中酶的降解，理??化穩(wěn)定性增加；正電荷更加集中，對細菌細胞壁和細胞膜的穿透作用更強（圖１．３）；??體外、體內實驗證實其殺菌效果更好

【參考文獻】：
期刊論文
[1]內毒素吸附治療汶川大地震中的膿毒癥患者[J]. 周琰,梁鵬,黃琨,吳小東,康焰.  中國呼吸與危重監(jiān)護雜志. 2008(04)



本文編號：3368690