目的:早期研究表明甲基苯丙胺通過(guò)損傷內(nèi)皮細(xì)胞造成血腦屏障破壞,然而周細(xì)胞在此過(guò)程中的作用尚不明確。甲基苯丙胺能夠引起周細(xì)胞遷移,從基底膜脫離,進(jìn)而損傷血腦屏障,但是涉及這一過(guò)程的具體分子機(jī)制仍然不清楚。因此,本課題研究旨在闡明甲基苯丙胺引起周細(xì)胞遷移的相關(guān)分子機(jī)制。方法:應(yīng)用Western blot和免疫熒光染色技術(shù)檢測(cè)PUMA蛋白表達(dá);應(yīng)用Western blot檢測(cè)integrinβ1和β3蛋白表達(dá)、信號(hào)通路相關(guān)蛋白以及其磷酸化形式;利用重組慢病毒建立穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的周細(xì)胞細(xì)胞系C3H/10T1/2和原代人腦微血管周細(xì)胞（HBVPs）,應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和小室遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其遷移能力;應(yīng)用si RNA轉(zhuǎn)染技術(shù)驗(yàn)證PUMA蛋白對(duì)周細(xì)胞遷移能力的影響;利用PUMA KO小鼠,結(jié)合免疫熒光染色和電鏡的方法,從整體水平進(jìn)一步驗(yàn)證PUMA在甲基苯丙胺介導(dǎo)周細(xì)胞遷移中的作用。結(jié)果:1)甲基苯丙胺上調(diào)周細(xì)胞中PUMA蛋白表達(dá);2)PUMA蛋白表達(dá)上調(diào)介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細(xì)胞遷移,沉默PUMA蛋白可以顯著抑制甲基苯丙胺導(dǎo)致的周細(xì)胞遷移;3)信號(hào)通路MAPKs和PI3K/Akt磷酸化參與甲基苯丙... 

【文章來(lái)源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 甲基苯丙胺上調(diào)周細(xì)胞中PUMA蛋白表達(dá)
    3.2 PUMA介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細(xì)胞遷移
    3.3 MAPKs和PI3K/Akt信號(hào)通路介導(dǎo)周細(xì)胞PUMA蛋白表達(dá)
    3.4 integrin β1 和 β3 介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細(xì)胞遷移
    3.5 酪氨酸激酶Src和Pyk2參與甲基苯丙胺引起的周細(xì)胞遷移
    3.6 整體水平驗(yàn)證PUMA介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細(xì)胞遷移
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3345662