目的:早期研究表明甲基苯丙胺通過損傷內(nèi)皮細胞造成血腦屏障破壞,然而周細胞在此過程中的作用尚不明確。甲基苯丙胺能夠引起周細胞遷移,從基底膜脫離,進而損傷血腦屏障,但是涉及這一過程的具體分子機制仍然不清楚。因此,本課題研究旨在闡明甲基苯丙胺引起周細胞遷移的相關(guān)分子機制。方法:應(yīng)用Western blot和免疫熒光染色技術(shù)檢測PUMA蛋白表達;應(yīng)用Western blot檢測integrinβ1和β3蛋白表達、信號通路相關(guān)蛋白以及其磷酸化形式;利用重組慢病毒建立穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的周細胞細胞系C3H/10T1/2和原代人腦微血管周細胞（HBVPs）,應(yīng)用細胞劃痕實驗和小室遷移實驗檢測其遷移能力;應(yīng)用si RNA轉(zhuǎn)染技術(shù)驗證PUMA蛋白對周細胞遷移能力的影響;利用PUMA KO小鼠,結(jié)合免疫熒光染色和電鏡的方法,從整體水平進一步驗證PUMA在甲基苯丙胺介導(dǎo)周細胞遷移中的作用。結(jié)果:1)甲基苯丙胺上調(diào)周細胞中PUMA蛋白表達;2)PUMA蛋白表達上調(diào)介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細胞遷移,沉默PUMA蛋白可以顯著抑制甲基苯丙胺導(dǎo)致的周細胞遷移;3)信號通路MAPKs和PI3K/Akt磷酸化參與甲基苯丙... 

【文章來源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
前言
第一章 文獻綜述
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 甲基苯丙胺上調(diào)周細胞中PUMA蛋白表達
    3.2 PUMA介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細胞遷移
    3.3 MAPKs和PI3K/Akt信號通路介導(dǎo)周細胞PUMA蛋白表達
    3.4 integrin β1 和 β3 介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細胞遷移
    3.5 酪氨酸激酶Src和Pyk2參與甲基苯丙胺引起的周細胞遷移
    3.6 整體水平驗證PUMA介導(dǎo)甲基苯丙胺引起的周細胞遷移
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝



本文編號：3345662