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糖皮質(zhì)激素對脂多糖誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞表面TLR4/CD14/MD-2 受體復(fù)合物的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-08-16 10:58
  正文:目的觀察地塞米松對脂多糖誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞表面TLR4/CD14/MD-2受體復(fù)合物及其介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,從受體識別水平探討糖皮質(zhì)激素對固有免疫中巨噬細(xì)胞識別病原微生物環(huán)節(jié)的影響。方法劑量為10、50、100、150、200ng/μl地塞米松和(或)1 μg/ml脂多糖作用RAW264.7細(xì)胞1、4、8、14、18、24h,應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞表面TLR4、CD14和MD-2mRNA水平的變化,western blot技術(shù)檢測NF-κB蛋白表達(dá),ELISA檢測細(xì)胞上清中炎癥因子TNF-α、IL-1、IL-6和趨化因子IL-8、MIP-1含量的變化。采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果①1μg/ml LPS刺激RAW264.7細(xì)胞24h內(nèi),細(xì)胞表面TLR4、CD14和MD-2 mRNA明顯上調(diào):②不同劑量地塞米松(10、50、100、150、 200ng/μl)作用24h后,TLR4、CD14和MD-2 mRNA水平隨DEX劑量增加而下降,呈濃度依賴性,并且CD14和MD-2 mRNA下調(diào)程度大于TLR4 mRNA下調(diào)程度;③預(yù)先應(yīng)用10... 

【文章來源】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

糖皮質(zhì)激素對脂多糖誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞表面TLR4/CD14/MD-2 受體復(fù)合物的影響


圖1?地塞米松對小鼠巨幢細(xì)胞RAW264.7生長增殖的影響??

細(xì)胞表面,轉(zhuǎn)錄水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,時(shí)間點(diǎn)


mRNA于4h升至最高后逐漸下降,14h降至最低,24h稍有回升。各時(shí)間點(diǎn)TLR4、??CD14、MD-2mRNA均島于空白對照姐。LPS上調(diào)TL民4、CD14和MD-2mRNA??轉(zhuǎn)錄水平,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<〇.〇5)。(見表4,圖2)??表?4LPS?對?TLR4、CD14?和?MD-2mRNA?表運(yùn)的影響(x±s,n=4,?JAAU)??組別?TLR4?CD14?MD-2??空白對照組?1.00+A?1.00+A?1.00+&??LPS-化?2.02±0.11’?2.60?+?0.11*"'?3.09+0.15*^??LPS-4h?1.71?±0.15?心?2.81+0.13?心?3.38±0.12‘+。??LPS-8h?1.67±0.07心?2.16±0.04*?心?2.53±0.10‘+&??LPS-14h?1.53?±0.08?心?2.03?±0.06'+?1.48?+?0.03'心??LPS-1?化?1.61±0.05’+么?1.84±0.03‘+?1.68±0.07'+^??I?LPS-24h?1.88?+?0.02*?1.92±0胞’+?1.89+0.06'+

地塞米松,細(xì)胞表面,幅度,轉(zhuǎn)錄水平


DEX下調(diào)TLR4、CD14和MDJmRNA轉(zhuǎn)錄水平,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義??(P<0.05)。并且隨DEX劑量增加,CD14和MD-2?mRNA下調(diào)幅度(約37-41%)??比TLR4mRNA下調(diào)幅度(約17%)更大,程度更深。(見表5,圖3)??表5?不同劑呈DEX對TLR4、CD14和MD-2?mRNA表達(dá)的影巧(X?+S,?n=4,?-2么么口)??組別?TLR4?CD14?MD-2??空白對照組?1.00+?1.00+?1.00’A??DEX?10?ng/fil?0.96?+?0.07'^?0.94?+?0.05*^^?0.91?±0.15一??DEX50?ng/fil?0.92?+?0.04*^?0.85±0.07*+么?0.84?+?0.11^??DEX?100?ng/jil?0.90?+?0.05*?0.77+0.01*'^?0.72+0.11*??DEX150ng/pl?0.87?±0.02*?0.72±0.05‘。?0.67+0.06*??DEX200?ng/fil?0.83+0.01*?0.63±0.03心?0.5化0.02*??注!??:?p<0.05vs?巧白對照;+;?P<〇.〇5vsD巧?lOOng/沖?A:P<0.05vsDEX21)0

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本文編號:3345548

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