發(fā)布時(shí)間：2021-08-15 11:33

　　微生物轉(zhuǎn)化甾體化合物的反應(yīng)具有污染小、高效、專一性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),其中羥化反應(yīng)是最重要的反應(yīng)。雄甾-4-烯-3,17-二酮（1,簡(jiǎn)稱雄烯二酮或4-AD）是合成利尿劑、避孕藥、雄激素等甾體藥物的重要中間體,其中通過微生物轉(zhuǎn)化法生成的11α-羥基雄烯二酮（11α-OH-4-AD）是合成治療心血管疾病的藥物依普利酮的關(guān)鍵中間體。微生物轉(zhuǎn)化法獲得11α-OH-4-AD不僅是半化學(xué)合成相應(yīng)甾體藥物的首要攻克目標(biāo),而且也是半合成過程中的最關(guān)鍵步驟之一。本論文以4-AD為底物進(jìn)行了菌種的篩選和轉(zhuǎn)化工藝的優(yōu)化,以期得到具有一定工業(yè)應(yīng)用價(jià)值的菌種。另外,本論文還研究了泡盛曲霉對(duì)雄二烯二酮（ADD）的轉(zhuǎn)化過程。詳細(xì)的研究?jī)?nèi)容如下:1.從全國(guó)不同地方采集的15種土樣中獲得3株對(duì)4-AD有較強(qiáng)轉(zhuǎn)化能力的菌株,分別編號(hào)為MH-14、MH-18、MH-19。其中MH-18能夠轉(zhuǎn)化4-AD得到11α-OH-4-AD,其基礎(chǔ)收率為48.50%,通過形態(tài)學(xué)觀察和菌株分子生物學(xué)方面的基因序列比對(duì),最終確定該菌株為泡盛曲霉（Aspergillus awamori）。2.研究了泡盛曲霉（Aspergillus awamori）對(duì)甾... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

甾體化合物的基本結(jié)構(gòu)

第一章 前言為僅次于抗生素的第二大類藥物[7]。體化合物的簡(jiǎn)介物的生理活性很強(qiáng)且治療適應(yīng)癥在現(xiàn)有甾體藥物的改造以及發(fā)現(xiàn)新的內(nèi)或胞外酶作為生物催化劑將底物見下圖：

2.2.2 復(fù)篩據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，底物 4-AD 的 Rf 值為 0.68 左右，11α-OH-4-AD 的 Rf 值為 0.42左右。將初篩得到的一系列菌株進(jìn)行復(fù)篩，TLC 檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)有 3 株菌對(duì) 4-AD有較好的轉(zhuǎn)化能力，分別為 MH-14、MH-18 和 MH-19，其余菌株對(duì) 4-AD 的轉(zhuǎn)化率均不及 30%，且 MH-18 菌株很可能將 4-AD 轉(zhuǎn)化為依普利酮合成過程中所需要的重要中間體 11α-OH-4-AD，同時(shí)其對(duì)底物 4-AD 的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)化率也比較高，由此確定 MH-18 有進(jìn)一步進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化工藝研究的價(jià)值。2.2.3 菌種鑒定由于 11α-OH-4-AD 是合成選擇性醛固酮受體拮抗劑依普利酮的重要中間體，所以本實(shí)驗(yàn)從菌株的形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)兩方面進(jìn)行 MH-18 種屬的鑒定。其中，菌種 MH-14、MH-18、MH-19 在固體平板培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)形態(tài)分別如下圖所示：

【參考文獻(xiàn)】：
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