目的:建立一種測(cè)定Caco-2細(xì)胞中斯皮諾素的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測(cè)方法,研究斯皮諾素在Caco-2細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)方式。方法:采用BEH C₁₈色譜柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流動(dòng)相為水—甲醇溶液,梯度洗脫,流速0.30 mL·min^-1;質(zhì)譜測(cè)定采用電噴霧離子源,負(fù)離子模式,多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）定量離子對(duì)m/z 607→427,以Caco-2細(xì)胞模型研究斯皮諾素的雙向轉(zhuǎn)運(yùn),考察斯皮諾素濃度及P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）抑制劑對(duì)斯皮諾素轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。運(yùn)用UPLC-MS/MS檢測(cè)藥物濃度,計(jì)算其表觀滲透系數(shù)。結(jié)果:UPLC-MS/MS檢測(cè)斯皮諾素具有良好的線性（r²>0.999 0）、精密度的RSD≤15%,準(zhǔn)確度在88%¹15%之間,絕對(duì)回收率均在80%以上,斯皮諾素最低檢測(cè)限為2 ng·mL^-1。斯皮諾素在Caco-2細(xì)胞中,其轉(zhuǎn)運(yùn)方向主要是從絨毛面（AP）→基底面（BL）,且與濃度相關(guān)。斯皮諾素質(zhì)量濃度... 

【文章來源】：藥物分析雜志. 2016,36(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 儀器和試藥
2 方法
    2.1 色譜和質(zhì)譜條件
        2.1.1 色譜條件
        2.1.2 質(zhì)譜條件
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)條件及方法
    2.3 測(cè)定單層細(xì)胞的跨膜電阻值
    2.4 樣品處理
    2.5 數(shù)據(jù)處理方法及數(shù)據(jù)分析
    2.6 方法學(xué)研究
        2.6.1 分析方法的選擇
        2.6.2 專屬性
        2.6.3 線性關(guān)系考察和檢測(cè)限測(cè)定
        2.6.4 精密度、準(zhǔn)確度、回收率和穩(wěn)定性測(cè)定
        2.6.5 基質(zhì)效應(yīng)
    2.7 斯皮諾素在Caco-2細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)
        2.7.1 轉(zhuǎn)運(yùn)前后細(xì)胞單層膜電阻值的變化
        2.7.2 不同濃度斯皮諾素的表觀滲透系數(shù)及外排率
        2.7.3 80μg·m L-1斯皮諾素單用及與100μg·m L-1維拉帕米聯(lián)用時(shí)的表觀滲透系數(shù)及外排率
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]斯皮諾素在體胃腸吸收動(dòng)力學(xué)研究[J]. 張婷,解軍波,劉子艷,張彥青,陳大為.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2012(13)
[2]中藥化學(xué)成分腸吸收研究中Caco-2細(xì)胞模型和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的建立[J]. 楊秀偉,楊曉達(dá),王瑩,馬蓮,張悅,楊曉改,王夔.  中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào). 2007(06)
[3]酸棗仁不同炮制品及炒酸棗仁中總黃酮與總皂苷的鎮(zhèn)靜催眠作用比較[J]. 吳玉蘭,許惠琴,陳詵.  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2005(09)
[4]Caco-2細(xì)胞模型——藥物吸收研究的有效“工具”[J]. 關(guān)溯,陳孝,黃民.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2004(06)



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