目的研究硝苯地平（Nif）對(duì)心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞（CMECs）缺氧/復(fù)氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）損傷的作用與機(jī)制。方法通過(guò)建立心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞H/R模型;在H/R模型基礎(chǔ)上,分別用不同濃度的硝苯地平（Nif）處理內(nèi)皮細(xì)胞,采用比色法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶（LDH）的漏出情況;采用Annexin V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的早期凋亡;TUNEL法觀察細(xì)胞晚期凋亡水平;酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定白介素1β（IL-1β）的含量、內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子（ICAM-1）的含量和COX-2產(chǎn)物（PGE₂）的含量;Western blot檢測(cè)COX-2蛋白的表達(dá);結(jié)果與Control組相比,COX-2蛋白表達(dá)上調(diào)、乳酸脫氫酶LDH的漏出增加,產(chǎn)物PGE₂的量上升。Nif(10.0、1.0、0.1μmol·L^-1)3個(gè)劑量組可呈現(xiàn)量效依賴性地降低炎癥因子IL-1β的含量,減輕凋亡,降低H/R損傷COX-2蛋白的高表達(dá)、減少產(chǎn)物PGE₂的產(chǎn)生。結(jié)論 Nif能保護(hù)CM... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料、試劑及主要儀器
    1.2 CMECs的分離與培養(yǎng)
    1.3 內(nèi)皮細(xì)胞H/R模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組
    1.4 ELISA試劑盒、LDH試劑盒分別檢測(cè)細(xì)胞上清液中IL-1β、PGE2的蛋白水平以及乳酸脫氫酶(LDH)的漏出水平
    1.5 Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡
    1.6 TUNEL檢測(cè)細(xì)胞晚期凋亡
    1.7 Western blot檢測(cè)細(xì)胞蛋白的表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 CMECs H/R模型時(shí)間點(diǎn)的確立
        2.1.1 CMECs H/R后COX-2蛋白表達(dá)變化
        2.1.2 CMECs在H/R狀態(tài)下LDH的時(shí)效關(guān)系
    2.2 Nif對(duì)H/R IL-1β、ICAM-1表達(dá)的影響
        2.2.1 Nif對(duì)H/R后炎癥因子IL-1β的表達(dá)情況
        2.2.2 Nif對(duì)H/R后黏附分子ICAM-1的表達(dá)情況
    2.3 Nif對(duì)CMECs H/R后細(xì)胞凋亡的影響
        2.3.1 Annexin V FITC/PI法檢測(cè)早期凋亡
        2.3.2 TUNEL法檢測(cè)晚期凋亡
    2.4 Nif對(duì)H/R后COX-2蛋白表達(dá)的影響
    2.5 Nif對(duì)H/R后產(chǎn)物PGE2的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]硝苯地平和地爾硫?調(diào)控環(huán)氧合酶-2的表達(dá)和活性拮抗L型鈣通道敲除H9c2細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷[J]. 柳滿,陳潤(rùn)濟(jì),蔡文鋒,汪彬,石剛剛,鄭付春.  汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(02)
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