本項目選用生物可降解的多聚賴氨酸樹枝狀大分子（DGL）作為納米顆粒的內(nèi)核骨架,通過酰胺化反應將靶向配體甘草次酸（GA）和正電荷阻斷劑四氫苯酐（DCA）與DGL共價鍵合,利用靜電吸附作用上載抗癌藥物阿霉素（DOX）,最后包裹透明質(zhì)酸外殼（HA）,制得具有理想粒徑的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒。以期在EPR效應的基礎上,HA外殼經(jīng)過腫瘤微環(huán)境中過表達的透明質(zhì)酸酶水解,定向?qū)崿F(xiàn)納米顆粒粒徑的縮小,使納米顆粒順利滲透進入腫瘤內(nèi)部,并進一步在GA介導的細胞內(nèi)在化和DCA觸發(fā)的溶酶體逃逸雙重作用下,將DOX精準運送至肝癌細胞中并釋放于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)揮藥效。這種將多種功能整合在同一載藥納米體系中的構(gòu)思,極大地發(fā)揮了納米顆粒優(yōu)良的抗腫瘤效果。然后,對DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒進行理化性質(zhì)表征和體內(nèi)外抗腫瘤功效研究。通過形貌觀察和粒徑檢測發(fā)現(xiàn),合成的DGL-GA-DCA-DOX-HA為粒徑182.5 nm的球形顆粒,并且經(jīng)過腫瘤微環(huán)境中高表達的透明質(zhì)酸酶降解后,該納米體系可以釋放出粒徑較小的DGL-GA-DCA-DOX納米顆粒（47.7 nm）。通過對DGL-GA-DCA-DOX... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

載藥納米粒的合成路線和體內(nèi)抗腫瘤機制的示意圖

。然后，利用DOX的正電性與帶有負電荷的DGL-GA-DCA混合，通過靜電吸引上載藥物DOX。最后，利用DGL-GA-DCA-DOX與負電荷的HA之間的靜電作用，進一步以DGL-GA-DCA-DOX為內(nèi)核，用HA包裹形成更大粒徑的核殼結(jié)構(gòu)。經(jīng)計算，藥物的上載率為69.64%，最終產(chǎn)物DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒的藥物負載量達到148.3mg/g。2.3.2納米顆粒的形貌觀察與粒徑檢測利用動態(tài)光散射儀和透射電子顯微鏡表征了DGL-GA-DCA-DOX、DGL-GA-DCA-DOX-HA和經(jīng)過透明質(zhì)酸酶提前孵育的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒（簡寫為DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase）的形貌和粒徑。圖2-1為DGL-GA-DCA-DOX（圖2-1A）、DGL-GA-DCA-DOX-HA（圖2-1B）和DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase納米顆粒（圖2-1C）的透射電鏡圖。由圖像可以看出，DGL-GA-DCA-DOX納米顆粒呈均勻的球狀，粒徑大約在40nm左右；經(jīng)過HA包裹后的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒粒徑有了明顯的增大，納米顆粒的外層能清楚地觀察到一層光滑的薄膜，這在一定程度上表明了HA的成功包覆；經(jīng)過透明質(zhì)酸酶提前孵育的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒重新恢復小顆粒的狀態(tài)且分散均勻，說明了透明質(zhì)酸酶可以降解納米顆粒的HA外殼，釋放出較小粒徑的DGL-GA-DCA-DOX內(nèi)核。圖2-1納米顆粒的透射電鏡圖A:DGL-GA-DCA-DOX;B:DGL-GA-DCA-DOX-HA;C:DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase圖2-2顯示的是通過動態(tài)光散射儀檢測到的DGL-GA-DCA-DOX（圖2-2A）、DGL-GA-DCA-DOX-HA（圖2-2B）和DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase納米顆粒（圖2-2C）粒徑的精確結(jié)果。DGL-GA-DCA-DOX的平均粒徑為44.2nm，經(jīng)過HA包裹后的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒粒徑增至182.5nm左右，而與透明質(zhì)酸酶一起孵育過的DGL-GA-DCA-DOX-HA納米顆粒粒徑重新減小到47.7nm，這些粒徑結(jié)果與上文中透射電鏡結(jié)果相互輔證。以上結(jié)果充分證明

納米顆粒的粒徑分布圖A:DGL-GA-DCA-DOX;B:DGL-GA-DCA-DOX-HA;C:DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase


本文編號：3298381