順鉑聯(lián)合小檗堿通過誘導DNA損傷和ROS依賴性凋亡抑制肺癌細胞A549的生長
發(fā)布時間:2021-07-10 14:13
目的探究順鉑聯(lián)合小檗堿(berberine,BBR)對人肺癌A549細胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌機制。方法 MTT法分別檢測不同濃度的BBR、BBR聯(lián)合不同濃度的順鉑對A549細胞增殖的作用;設(shè)置溶劑組、順鉑組、小檗堿組和順鉑+小檗堿組,細胞集落實驗檢測細胞集落形成;流式細胞術(shù)實驗檢測細胞凋亡;Western blot檢測Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表達;免疫熒光實驗檢測DNA損傷;活性氧(reactive oxygen species, ROS)清除劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)預處理后,流式細胞術(shù)實驗和Western blot分別檢測ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表達。結(jié)果 BBR及BBR聯(lián)合順鉑濃度依賴性抑制A549細胞生長(P<0.05);相對對照組和單藥組,聯(lián)合組抑制細胞集落形成,促進細胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表達,誘導DNA損傷及提高ROS水平(P<0.05)。聯(lián)用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-cas...
【文章來源】:中國藥理學通報. 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1細胞株
1.1.2藥物與試劑
1.1.3儀器
1.2 方法
1.2.1 細胞培養(yǎng)
1.2.2 MTT檢測A549細胞活力情況
1.2.3 細胞集落實驗檢測A549集落形成情況
1.2.4 流式細胞儀檢測A549細胞凋亡情況
1.2.5 免疫熒光檢測A549細胞DNA損傷情況
1.2.6 流式細胞儀檢測A549細胞內(nèi)ROS情況
1.2.7 Western blot法檢測A549細胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達
1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
2.1 順鉑聯(lián)合BBR增強抑制A549細胞增殖
2.2 順鉑聯(lián)合BBR增強抑制A549細胞集落形成
2.3 順鉑聯(lián)合BBR增強誘導A549細胞凋亡
2.4 順鉑聯(lián)合BBR增強誘導A549細胞的DNA損傷
2.5 順鉑聯(lián)合BBR增強A549細胞內(nèi)ROS水平
2.6 順鉑聯(lián)合BBR升高ROS促進A549細胞凋亡
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]積雪草酸對人舌癌TCA-8113細胞增殖、凋亡的影響[J]. 董易,褚冬青,馬春宇,黃建華,王一. 中國藥理學通報. 2019(11)
本文編號:3276067
【文章來源】:中國藥理學通報. 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1細胞株
1.1.2藥物與試劑
1.1.3儀器
1.2 方法
1.2.1 細胞培養(yǎng)
1.2.2 MTT檢測A549細胞活力情況
1.2.3 細胞集落實驗檢測A549集落形成情況
1.2.4 流式細胞儀檢測A549細胞凋亡情況
1.2.5 免疫熒光檢測A549細胞DNA損傷情況
1.2.6 流式細胞儀檢測A549細胞內(nèi)ROS情況
1.2.7 Western blot法檢測A549細胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達
1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
2.1 順鉑聯(lián)合BBR增強抑制A549細胞增殖
2.2 順鉑聯(lián)合BBR增強抑制A549細胞集落形成
2.3 順鉑聯(lián)合BBR增強誘導A549細胞凋亡
2.4 順鉑聯(lián)合BBR增強誘導A549細胞的DNA損傷
2.5 順鉑聯(lián)合BBR增強A549細胞內(nèi)ROS水平
2.6 順鉑聯(lián)合BBR升高ROS促進A549細胞凋亡
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]積雪草酸對人舌癌TCA-8113細胞增殖、凋亡的影響[J]. 董易,褚冬青,馬春宇,黃建華,王一. 中國藥理學通報. 2019(11)
本文編號:3276067
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