順鉑聯(lián)合小檗堿通過誘導(dǎo)DNA損傷和ROS依賴性凋亡抑制肺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)
發(fā)布時(shí)間:2021-07-10 14:13
目的探究順鉑聯(lián)合小檗堿(berberine,BBR)對(duì)人肺癌A549細(xì)胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌機(jī)制。方法 MTT法分別檢測(cè)不同濃度的BBR、BBR聯(lián)合不同濃度的順鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖的作用;設(shè)置溶劑組、順鉑組、小檗堿組和順鉑+小檗堿組,細(xì)胞集落實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落形成;流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;Western blot檢測(cè)Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表達(dá);免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DNA損傷;活性氧(reactive oxygen species, ROS)清除劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)預(yù)處理后,流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)和Western blot分別檢測(cè)ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表達(dá)。結(jié)果 BBR及BBR聯(lián)合順鉑濃度依賴性抑制A549細(xì)胞生長(zhǎng)(P<0.05);相對(duì)對(duì)照組和單藥組,聯(lián)合組抑制細(xì)胞集落形成,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表達(dá),誘導(dǎo)DNA損傷及提高ROS水平(P<0.05)。聯(lián)用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-cas...
【文章來源】:中國藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1細(xì)胞株
1.1.2藥物與試劑
1.1.3儀器
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.2.2 MTT檢測(cè)A549細(xì)胞活力情況
1.2.3 細(xì)胞集落實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549集落形成情況
1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549細(xì)胞凋亡情況
1.2.5 免疫熒光檢測(cè)A549細(xì)胞DNA損傷情況
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)ROS情況
1.2.7 Western blot法檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)抑制A549細(xì)胞增殖
2.2 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)抑制A549細(xì)胞集落形成
2.3 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡
2.4 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)誘導(dǎo)A549細(xì)胞的DNA損傷
2.5 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)A549細(xì)胞內(nèi)ROS水平
2.6 順鉑聯(lián)合BBR升高ROS促進(jìn)A549細(xì)胞凋亡
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]積雪草酸對(duì)人舌癌TCA-8113細(xì)胞增殖、凋亡的影響[J]. 董易,褚冬青,馬春宇,黃建華,王一. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2019(11)
本文編號(hào):3276067
【文章來源】:中國藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1細(xì)胞株
1.1.2藥物與試劑
1.1.3儀器
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.2.2 MTT檢測(cè)A549細(xì)胞活力情況
1.2.3 細(xì)胞集落實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549集落形成情況
1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549細(xì)胞凋亡情況
1.2.5 免疫熒光檢測(cè)A549細(xì)胞DNA損傷情況
1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)ROS情況
1.2.7 Western blot法檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)抑制A549細(xì)胞增殖
2.2 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)抑制A549細(xì)胞集落形成
2.3 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡
2.4 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)誘導(dǎo)A549細(xì)胞的DNA損傷
2.5 順鉑聯(lián)合BBR增強(qiáng)A549細(xì)胞內(nèi)ROS水平
2.6 順鉑聯(lián)合BBR升高ROS促進(jìn)A549細(xì)胞凋亡
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]積雪草酸對(duì)人舌癌TCA-8113細(xì)胞增殖、凋亡的影響[J]. 董易,褚冬青,馬春宇,黃建華,王一. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2019(11)
本文編號(hào):3276067
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