地塞米松是一種糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物,廣泛用于炎癥、風(fēng)濕性疾病和自體免疫性疾病的治療。然而,長(zhǎng)期大量使用地塞米松存在潛在的毒副作用,如抑制成骨細(xì)胞增殖,造成細(xì)胞內(nèi)ROS的大量產(chǎn)生,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。綠原酸是杜仲的指標(biāo)成分,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡和神經(jīng)保護(hù)等生物學(xué)效應(yīng)。但是,綠原酸對(duì)地塞米松致細(xì)胞凋亡的保護(hù)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,本文通過(guò)建立地塞米松誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡模型,探討綠原酸對(duì)地塞米松誘導(dǎo)成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡的調(diào)控作用機(jī)制,為綠原酸的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。本研究采用小鼠成骨細(xì)胞系MC3T3-E1作為體外研究對(duì)象,研究地塞米松誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的過(guò)程及PI3K/Akt通路和p21在其中發(fā)揮的調(diào)控作用。結(jié)果顯示,地塞米松通過(guò)激活依賴(lài)caspase的線(xiàn)粒體凋亡信號(hào)通路,誘導(dǎo)細(xì)胞損傷和凋亡;同時(shí),分別加入PI3K/Akt抑制劑LY294002和激活劑IGF-1,雙向驗(yàn)證PI3K/Akt通路在成骨細(xì)胞凋亡中的作用。結(jié)果顯示,地塞米松抑制PI3K/Akt通路的激活,下調(diào)Akt蛋白磷酸化水平,降低細(xì)胞中p21蛋白的表達(dá)和穩(wěn)定性,促進(jìn)p21發(fā)生核轉(zhuǎn)位,調(diào)控Bcl-2蛋白家族Bax和Bc1-2的表達(dá),促使cy... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：135 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－６?ｐ２１?與Ａｋｔ通路的相關(guān)性（Ｋａｒｉｍｉａｎ?Ａ．?ｅ／ｏ／．，?２０１６，４２：６３－７１）??Ｆｉｇ．?１－６?Ｃｏｒｅｌｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐ２１?ａｎｄ?Ａｋｔ?ｐａｔｈｗａｙ??

和１?ｐＭ）地塞米松處理ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞２４?ｈ，以及相間濃度（１?ｐＭ）的地塞米松分別處理??ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞０，?６，?１２，?２４和３６?ｈ，采用ＬＤＨ試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基上清屮ＬＤＨ的釋放量。??結(jié)果顯示，隨著地塞米松濃度升高，ＬＤＨ的釋放量明顯增加（尸＜０．０５或尸＜０．０１）（圖２－２Ａ）。??如圖２－２Ｂ所示，地塞米松作用６?ｈ僅有少量ＬＤＨ釋放，與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞?０．０５），??地塞米松作用１２?ｈ、２４?ｈ和３６?ｈ時(shí)，ＬＤＨ的釋放量極顯著升高（Ｐ?＜?０．０１），說(shuō)明地塞米松可??以引起ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞膜的破裂，且地塞米松的細(xì)胞毒性效應(yīng)隨濃度的升高和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而??增強(qiáng)。＿??Ａｌ?ｉ．２ｉ?以?Ｂ?１?２Ａｈ?＊＊??Ｃ?０．９－?＊＊?Ｃ?１．５－?＊＊??〇．〇Ｊ－＾Ｐ—??０?０．２５?０．５?１?０?６?１２?２４?３６??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｄｅｘ?（ｆｉ?�。郑保�?Ｔｉｍｅ?ｏｆ?Ｄｅｘ?（ｈ）??圖２－２地塞米松對(duì)ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨細(xì)胞中ＬＤＨ釋放的影響??注：數(shù)據(jù)是４個(gè)平行樣本的平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差。與對(duì)照組相比，＊尸＜?０．０５，?０．０１??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ｄｅｘ?ｏｎ?ＬＤＨ?ｒｅｌｅａｓｅ?ｉｎ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?ｃｅｌｌｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｔｈｅ?ｄａｔａ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｔｈｅ?ｍｅａｎ?土?ＳＤ?（ｎ＝４）．?＊Ｐ＜?０．０５

Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｄｅ＼?（ｐＭ）?Ｔｉｍｅ?ｏｆ?Ｄｅｘ?（ｈ）??圖２－１地塞米松對(duì)ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨細(xì)胞活力的影響??注：數(shù)據(jù)是６個(gè)平行樣本的平均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差。與對(duì)照組相比，＊Ｐ＜?０．０５，?＊＊Ｐ＜?０．０１??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ｄｅｘ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｉｎ?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１?ｃｅｌｌｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｔｈｅ?ｄａｔａ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｔｈｅ?ｍｅａｎ?土?ＳＤ?（ｎ＝６）．?＊Ｐ＜?０．０５，?＊＊Ｐ＜?０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ．??２．３．２地塞米松對(duì)ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞ＬＤＨ釋放的影響??為了檢測(cè)地塞米松對(duì)ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨細(xì)胞的毒性，分別用不同濃度（ＯｐＭ、０．２５?ｐＭ、０．５?ｎＭ??和１?ｐＭ）地塞米松處理ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞２４?ｈ，以及相間濃度（１?ｐＭ）的地塞米松分別處理??ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞０，?６，?１２，?２４和３６?ｈ，采用ＬＤＨ試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基上清屮ＬＤＨ的釋放量。??結(jié)果顯示，隨著地塞米松濃度升高，ＬＤＨ的釋放量明顯增加（尸＜０．０５或尸＜０．０１）（圖２－２Ａ）。??如圖２－２Ｂ所示，地塞米松作用６?ｈ僅有少量ＬＤＨ釋放，與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞?０．０５），??地塞米松作用１２?ｈ、２４?ｈ和３６?ｈ時(shí)


本文編號(hào)：3250801