ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄對(duì)神經(jīng)元氧化損傷、凋亡和miRNA的影響及LSPCs的調(diào)控作用
發(fā)布時(shí)間:2021-06-15 16:33
極低頻電磁場(chǎng)(extremely low frequency electromagnetic field,ELF-EMF)是由電力供應(yīng)(高壓輸電線)和各類家用電器產(chǎn)生的電磁場(chǎng)(0300 Hz)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)ELF-EMF高度敏感,極易產(chǎn)生氧化應(yīng)激,導(dǎo)致活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)大量積蓄,進(jìn)而引起神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生與發(fā)展等。目前研究仍集中在ELF-EMF的危險(xiǎn)評(píng)估和物理防護(hù)上,極少關(guān)注飲食調(diào)整對(duì)ELF-EMF的預(yù)防作用和機(jī)制的研究;诖,本論文在前期研究基礎(chǔ)上,研究ELF-EMF(50 Hz、8 m T下輻照90 min)引發(fā)ROS積蓄在海馬神經(jīng)元氧化應(yīng)激損傷和凋亡過程中的角色、對(duì)microRNA(miRNA)的影響及蓮房原花青素(procyanidins from lotus seedpod,LSPCs)的預(yù)防和調(diào)控作用。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)海馬神經(jīng)元氧化損傷及LSPCs的預(yù)防作用以ROS抑制劑N-乙;-L-半胱氨(N-acetyl-L-cystein,NAC)為對(duì)照,研究...
【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫詞表
第一章 緒論
1.1 極低頻電磁場(chǎng)及其生物學(xué)效應(yīng)
1.1.1 極低頻電磁場(chǎng)簡(jiǎn)述
1.1.2 極低頻電磁場(chǎng)誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)氧化損傷
1.2 miRNA研究概況
1.2.1 miRNA簡(jiǎn)介
1.2.2 miRNA的生物學(xué)作用機(jī)制
1.2.3 miRNA與輻射相關(guān)生物學(xué)效應(yīng)
1.2.4 天然活性物質(zhì)對(duì)miRNA的調(diào)控
1.3 蓮房原花青素
1.3.1 LSPCs簡(jiǎn)介
1.3.2 LSPCs抗輻射生物效應(yīng)
1.4 本論文的研究目的、意義及研究?jī)?nèi)容
1.4.1 本論文的目的和意義
1.4.2 本論文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)海馬神經(jīng)元氧化損傷及LSPCs的預(yù)防作用
引言
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 主要試劑配制
2.2.2 輻照裝置
2.2.3 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
2.2.4 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
2.2.5 海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS種類及各類含量
2.2.6 細(xì)胞內(nèi)ROS的來源定位
2.2.7 細(xì)胞內(nèi)總ROS的含量測(cè)定
2.2.8 海馬神經(jīng)元總抗氧化活力(T-AOC)的測(cè)定
2.2.9 海馬神經(jīng)元中GSH、SOD和SDH含量的測(cè)定
2.2.10 海馬神經(jīng)元內(nèi)MDA含量的測(cè)定
2.2.11 Western blot檢測(cè)海馬神經(jīng)元中抗氧化物酶相關(guān)蛋白表達(dá)
2.2.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS種類及含量的影響
2.3.2 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS分布的影響
2.3.3 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS總量的影響
2.3.4 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)總抗氧化能力的影響
2.3.5 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元中GSH、SOD和SDH活力的影響
2.3.6 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)MDA含量的影響
2.3.7 LSPCs對(duì)SOD-1 和SOD-2 蛋白表達(dá)的影響
2.3.8 LSPCs對(duì)GSH-Px蛋白表達(dá)的影響
2.4 本章小結(jié)
第三章 ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)海馬神經(jīng)元凋亡及LSPCs的預(yù)防作用
引言
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 主要試劑配制
3.2.2 輻照裝置
3.2.3 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
3.2.4 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
3.2.5 細(xì)胞存活率檢測(cè)
3.2.6 海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)觀察
3.2.7 線粒體膜電位的檢測(cè)
3.2.8 細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量測(cè)定
3.2.9 海馬神經(jīng)元的細(xì)胞周期檢測(cè)
3.2.10 海馬神經(jīng)元Cytochrome C蛋白檢測(cè)
3.2.11 Bcl-2 家族蛋白檢測(cè)
3.2.12 caspase家族蛋白檢測(cè)
3.2.13 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元存活率的影響
3.3.2 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的影響
3.3.3 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元線粒體膜電位的影響
3.3.4 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣離子濃度的影響
3.3.5 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞周期的影響
3.3.6 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元Cytochrome C的釋放
3.3.7 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元Bcl-2 家族蛋白表達(dá)的影響
3.3.8 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元caspase家族蛋白表達(dá)的影響
3.4 本章小結(jié)
第四章 ELF-EMF對(duì)海馬神經(jīng)元miRNA表達(dá)的影響及LSPCs的調(diào)控作用
引言
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 輻照裝置
4.2.2 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
4.2.3 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
4.2.4 RNA提。═rizol法)
4.2.5 RNA質(zhì)量檢測(cè)
4.2.6 富集小RNA
4.2.7 芯片實(shí)驗(yàn)及聚類分析
4.2.8 生物信息學(xué)分析
4.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 海馬神經(jīng)元總RNA的質(zhì)量檢驗(yàn)
4.3.2 miRNA芯片雜交信號(hào)掃描圖
4.3.3 各組miRNA表達(dá)譜差異及聚類分析
4.3.4 三組間差異表達(dá)miRNA靶基因GO分析
4.3.5 三組間差異表達(dá)miRNA靶基因KEGG Pathway富集性分析
4.3.6 Mi RNA-Gene-Network分析確定關(guān)鍵的miRNA及靶基因
4.3.7 差異表達(dá)基因綜合途徑分析
4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及其他科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致海馬神經(jīng)元損傷的預(yù)防機(jī)制[J]. 張海暉,段雯怡,武妍,樊蓉,程燕翔,段玉清. 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2016(06)
[2]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致免疫功能損傷的預(yù)防作用[J]. 張海暉,程燕翔,羅孝平,何遠(yuǎn)清,李長(zhǎng)征,曲文娟,段玉清. 現(xiàn)代食品科技. 2016(07)
[3]極低頻電磁場(chǎng)誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究[J]. 楊敏麗,葉招明. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015 (03)
[4]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致海馬神經(jīng)元損傷的預(yù)防作用[J]. 張海暉,武妍,張瑞,張爽,段玉清,孫桂波,孫曉波. 食品科學(xué). 2013(13)
[5]極低頻磁場(chǎng)誘發(fā)氧化應(yīng)激的研究進(jìn)展[J]. 徐春曉,呂琰,張玉霞,宋濤. 中國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志. 2012(05)
[6]細(xì)胞凋亡與活性氧[J]. 劉卉,劉延香. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(10)
[7]靜態(tài)和極低頻電磁場(chǎng)非熱生物效應(yīng)的研究動(dòng)態(tài)[J]. 張萍萍,尹若春,吳麗芳,吳躍進(jìn),余增亮. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2007(06)
[8]極低頻電磁場(chǎng)對(duì)大鼠腦組織抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 金煥榮,謝懷江,趙肅,段曉軍,王任群. 工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病. 2005(04)
[9]電磁輻射誘導(dǎo)的生物氧化應(yīng)激效應(yīng)[J]. 張清俊,吳可. 航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程. 2004(02)
[10]極低頻電磁場(chǎng)生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞和分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 劉贇. 國(guó)外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊(cè)). 2003(04)
博士論文
[1]50Hz極低頻電磁場(chǎng)和1800MHz射頻電磁場(chǎng)表觀遺傳學(xué)效應(yīng)及其機(jī)制的研究[D]. 劉永.重慶大學(xué) 2016
[2]輻射誘導(dǎo)旁觀者效應(yīng)相關(guān)microRNA的研究[D]. 徐帥.中國(guó)科學(xué)院研究生院(近代物理研究所) 2015
碩士論文
[1]蓮房原花青素誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)HepG2細(xì)胞自噬和凋亡的研究[D]. 許慧.江蘇大學(xué) 2016
[2]嗎啡預(yù)處理保護(hù)心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞缺氧再給氧損傷的相關(guān)特異性microRNA的篩選驗(yàn)證及生物信息學(xué)分析[D]. 朱海娟.安徽醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號(hào):3231404
【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫詞表
第一章 緒論
1.1 極低頻電磁場(chǎng)及其生物學(xué)效應(yīng)
1.1.1 極低頻電磁場(chǎng)簡(jiǎn)述
1.1.2 極低頻電磁場(chǎng)誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)氧化損傷
1.2 miRNA研究概況
1.2.1 miRNA簡(jiǎn)介
1.2.2 miRNA的生物學(xué)作用機(jī)制
1.2.3 miRNA與輻射相關(guān)生物學(xué)效應(yīng)
1.2.4 天然活性物質(zhì)對(duì)miRNA的調(diào)控
1.3 蓮房原花青素
1.3.1 LSPCs簡(jiǎn)介
1.3.2 LSPCs抗輻射生物效應(yīng)
1.4 本論文的研究目的、意義及研究?jī)?nèi)容
1.4.1 本論文的目的和意義
1.4.2 本論文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)海馬神經(jīng)元氧化損傷及LSPCs的預(yù)防作用
引言
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 主要試劑配制
2.2.2 輻照裝置
2.2.3 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
2.2.4 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
2.2.5 海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS種類及各類含量
2.2.6 細(xì)胞內(nèi)ROS的來源定位
2.2.7 細(xì)胞內(nèi)總ROS的含量測(cè)定
2.2.8 海馬神經(jīng)元總抗氧化活力(T-AOC)的測(cè)定
2.2.9 海馬神經(jīng)元中GSH、SOD和SDH含量的測(cè)定
2.2.10 海馬神經(jīng)元內(nèi)MDA含量的測(cè)定
2.2.11 Western blot檢測(cè)海馬神經(jīng)元中抗氧化物酶相關(guān)蛋白表達(dá)
2.2.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS種類及含量的影響
2.3.2 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS分布的影響
2.3.3 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)ROS總量的影響
2.3.4 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)總抗氧化能力的影響
2.3.5 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元中GSH、SOD和SDH活力的影響
2.3.6 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)MDA含量的影響
2.3.7 LSPCs對(duì)SOD-1 和SOD-2 蛋白表達(dá)的影響
2.3.8 LSPCs對(duì)GSH-Px蛋白表達(dá)的影響
2.4 本章小結(jié)
第三章 ELF-EMF誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)海馬神經(jīng)元凋亡及LSPCs的預(yù)防作用
引言
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 主要試劑配制
3.2.2 輻照裝置
3.2.3 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
3.2.4 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
3.2.5 細(xì)胞存活率檢測(cè)
3.2.6 海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)觀察
3.2.7 線粒體膜電位的檢測(cè)
3.2.8 細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量測(cè)定
3.2.9 海馬神經(jīng)元的細(xì)胞周期檢測(cè)
3.2.10 海馬神經(jīng)元Cytochrome C蛋白檢測(cè)
3.2.11 Bcl-2 家族蛋白檢測(cè)
3.2.12 caspase家族蛋白檢測(cè)
3.2.13 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元存活率的影響
3.3.2 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的影響
3.3.3 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元線粒體膜電位的影響
3.3.4 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣離子濃度的影響
3.3.5 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞周期的影響
3.3.6 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元Cytochrome C的釋放
3.3.7 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元Bcl-2 家族蛋白表達(dá)的影響
3.3.8 LSPCs對(duì)海馬神經(jīng)元caspase家族蛋白表達(dá)的影響
3.4 本章小結(jié)
第四章 ELF-EMF對(duì)海馬神經(jīng)元miRNA表達(dá)的影響及LSPCs的調(diào)控作用
引言
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 輻照裝置
4.2.2 海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)
4.2.3 原代海馬神經(jīng)元分組與輻照
4.2.4 RNA提。═rizol法)
4.2.5 RNA質(zhì)量檢測(cè)
4.2.6 富集小RNA
4.2.7 芯片實(shí)驗(yàn)及聚類分析
4.2.8 生物信息學(xué)分析
4.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 海馬神經(jīng)元總RNA的質(zhì)量檢驗(yàn)
4.3.2 miRNA芯片雜交信號(hào)掃描圖
4.3.3 各組miRNA表達(dá)譜差異及聚類分析
4.3.4 三組間差異表達(dá)miRNA靶基因GO分析
4.3.5 三組間差異表達(dá)miRNA靶基因KEGG Pathway富集性分析
4.3.6 Mi RNA-Gene-Network分析確定關(guān)鍵的miRNA及靶基因
4.3.7 差異表達(dá)基因綜合途徑分析
4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及其他科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致海馬神經(jīng)元損傷的預(yù)防機(jī)制[J]. 張海暉,段雯怡,武妍,樊蓉,程燕翔,段玉清. 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2016(06)
[2]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致免疫功能損傷的預(yù)防作用[J]. 張海暉,程燕翔,羅孝平,何遠(yuǎn)清,李長(zhǎng)征,曲文娟,段玉清. 現(xiàn)代食品科技. 2016(07)
[3]極低頻電磁場(chǎng)誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究[J]. 楊敏麗,葉招明. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015 (03)
[4]蓮房原花青素對(duì)極低頻電磁場(chǎng)致海馬神經(jīng)元損傷的預(yù)防作用[J]. 張海暉,武妍,張瑞,張爽,段玉清,孫桂波,孫曉波. 食品科學(xué). 2013(13)
[5]極低頻磁場(chǎng)誘發(fā)氧化應(yīng)激的研究進(jìn)展[J]. 徐春曉,呂琰,張玉霞,宋濤. 中國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志. 2012(05)
[6]細(xì)胞凋亡與活性氧[J]. 劉卉,劉延香. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(10)
[7]靜態(tài)和極低頻電磁場(chǎng)非熱生物效應(yīng)的研究動(dòng)態(tài)[J]. 張萍萍,尹若春,吳麗芳,吳躍進(jìn),余增亮. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2007(06)
[8]極低頻電磁場(chǎng)對(duì)大鼠腦組織抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 金煥榮,謝懷江,趙肅,段曉軍,王任群. 工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病. 2005(04)
[9]電磁輻射誘導(dǎo)的生物氧化應(yīng)激效應(yīng)[J]. 張清俊,吳可. 航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程. 2004(02)
[10]極低頻電磁場(chǎng)生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞和分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 劉贇. 國(guó)外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊(cè)). 2003(04)
博士論文
[1]50Hz極低頻電磁場(chǎng)和1800MHz射頻電磁場(chǎng)表觀遺傳學(xué)效應(yīng)及其機(jī)制的研究[D]. 劉永.重慶大學(xué) 2016
[2]輻射誘導(dǎo)旁觀者效應(yīng)相關(guān)microRNA的研究[D]. 徐帥.中國(guó)科學(xué)院研究生院(近代物理研究所) 2015
碩士論文
[1]蓮房原花青素誘導(dǎo)ROS積蓄介導(dǎo)HepG2細(xì)胞自噬和凋亡的研究[D]. 許慧.江蘇大學(xué) 2016
[2]嗎啡預(yù)處理保護(hù)心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞缺氧再給氧損傷的相關(guān)特異性microRNA的篩選驗(yàn)證及生物信息學(xué)分析[D]. 朱海娟.安徽醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號(hào):3231404
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