癌癥是一種危害人類健康的常見疾病,患癌人數(shù)逐年增加,因其高復(fù)發(fā)率和致死率,已經(jīng)成為了世界性醫(yī)療難題。癌癥主要治療方式有手術(shù)切除、化療、放射治療。近年來,越來越多的患者綜合考慮各方面因素后選擇化療,與此同時,研究者們的目光也更多地聚焦在化療領(lǐng)域,致力于高效低毒化療藥物的探索。當(dāng)今抗腫瘤藥物的發(fā)展呈現(xiàn)多樣化,金屬配合物受到了很多科學(xué)家青睞,并且取得了很多突破性成就,如順鉑、奧沙利鉑等,但是這類藥物在應(yīng)用方面還有很多難題急需解決。增強(qiáng)藥物的特異性和靶向性,減少毒副作用和不良反應(yīng),是研究此類藥物的重要方面。本論文合成并純化四個系列共10個金屬銥（III）配合物,并以質(zhì)譜、紅外、紫外、熒光、¹H NMR、¹³C NMR對這些配合物進(jìn)行表征,然后通過體外毒性評價,發(fā)現(xiàn)這些配合物對所選腫瘤細(xì)胞株具有一定毒性,隨后即對其抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行深入研究與討論。本論文從以下幾個方面評價所選配合物的抗腫瘤活性及其機(jī)制:首先采用MTT比色法對配合物體外毒性進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)這些配合物對特定腫瘤細(xì)胞增殖有很好的抑制效果。然后借助AO/EB染色法、亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn),表明配合物能順利地... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 序論
    1.1 引言
    1.2 金屬抗腫瘤藥物的研究進(jìn)展
        1.2.1 鉑類藥物抗腫瘤活性的研究進(jìn)展
        1.2.2 銥金屬配合物抗腫瘤活性的研究進(jìn)展
        1.2.3 其他金屬配合物抗腫瘤活性的研究進(jìn)展
    1.3 腫瘤細(xì)胞的死亡
        1.3.1 細(xì)胞凋亡
        1.3.2 細(xì)胞自噬
        1.3.3 細(xì)胞壞死
    1.4 抗腫瘤活性研究方法
        1.4.1 細(xì)胞毒性
        1.4.2 細(xì)胞凋亡檢測
        1.4.3 細(xì)胞核DNA損傷程度
        1.4.4 細(xì)胞內(nèi)活性氧升降
        1.4.5 細(xì)胞自噬發(fā)生
        1.4.6 細(xì)胞周期分布
        1.4.7 細(xì)胞侵襲能力評估
        1.4.8 細(xì)胞蛋白表達(dá)驗(yàn)證
    1.5 選題意義
第二章 以DPBD為配體的配合物的合成及抗腫瘤活性研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 配體DPBD的合成與表征
        2.3.2 Cis-[Ir(ppy)_2Cl]_2 的合成
        2.3.3 [Ir(ppy)_2(DPBD)]PF_6(Ir-1)的合成
        2.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.5 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        2.3.6 AO/EB染色
        2.3.7 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞周期分布
        2.3.9 高內(nèi)涵檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧含量
        2.3.10 亞細(xì)胞共定位實(shí)驗(yàn)
        2.3.11 AO染色法檢測溶酶體通透性
        2.3.12 線粒體膜電位檢測
        2.3.13 細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平的測定
        2.3.14 免疫染色法評估細(xì)胞色素c的釋放
        2.3.15 配合物誘導(dǎo)細(xì)胞自噬研究
        2.3.16 Transwell實(shí)驗(yàn)探究細(xì)胞遷移能力
        2.3.17 免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 配合物的紫外、熒光光譜測定
        2.4.2 細(xì)胞毒性結(jié)果
        2.4.3 細(xì)胞凋亡形態(tài)觀測
        2.4.4 DNA受損研究結(jié)果
        2.4.5 細(xì)胞周期阻滯結(jié)果
        2.4.6 活性氧含量分析
        2.4.7 溶酶體定位及其通透性研究
        2.4.8 線粒體定位及膜電位檢測
        2.4.9 細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)水平變化
        2.4.10 細(xì)胞色素c釋放檢測
        2.4.11 自噬機(jī)制探究
        2.4.12 Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.13 蛋白表達(dá)結(jié)果
    2.5 小結(jié)
第三章 以DPPZ衍生物為配體的銥(Ⅲ)配合物合成及抗腫瘤活性研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 配體NDPPZ的合成與表征
        3.3.2 Cis-[Ir(bzq)_2Cl]_2 的合成
        3.3.3 Cis-[Ir(piq)_2Cl]_2 的合成
        3.3.4 [Ir(ppy)_2(NDPPZ)]PF_6(Ir-1)的合成與表征
        3.3.5 [Ir(bzq)_2(NDPPZ)]PF_6(Ir-2)的合成與表征
        3.3.6 [Ir(piq)_2(NDPPZ)]PF_6(Ir-3)的合成與表征
        3.3.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
        3.3.8 流式細(xì)胞儀測定活性氧含量
        3.3.9 免疫熒光染色檢測微管形狀變化
        3.3.10 急性毒性試驗(yàn)
        3.3.11 體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.1 細(xì)胞毒性結(jié)果
        3.4.2 線粒體定位及膜電位變化
        3.4.3 活性氧含量的變化
        3.4.4 配合物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
        3.4.5 彗星實(shí)驗(yàn)
        3.4.6 配合物誘導(dǎo)細(xì)胞自噬
        3.4.7 細(xì)胞凋亡與自噬及活性氧關(guān)系
        3.4.8 細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)含量的變化
        3.4.9 細(xì)胞色素c的釋放
        3.4.10 細(xì)胞侵襲能力研究
        3.4.11 細(xì)胞周期的分布
        3.4.12 細(xì)胞微管蛋白形態(tài)的評估
        3.4.13 Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.14 體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)及其組織切片分析
    3.5 小結(jié)
第四章 以菲咯啉為基體銥(Ⅲ)配合物的合成及抗腫瘤活性研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 配體NP,ANP,DAP的合成
        4.3.2 [Ir(ppy)_2(NP)]PF_6(Ir-1)的合成和表征
        4.3.3 [Ir(ppy)_2(ANP)]PF_6(Ir-2)的合成和表征
        4.3.4 [Ir(ppy)_2(DAP)]PF_6(Ir-3)的合成和表征
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.4.1 體外細(xì)胞毒性
        4.4.2 細(xì)胞凋亡分析
        4.4.3彗星電泳實(shí)驗(yàn)
        4.4.4 線粒體膜電位檢測
        4.4.5 Ca~(2+)水平變化的檢測
        4.4.6 活性氧含量測定
        4.4.7 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
        4.4.8 細(xì)胞生長周期的影響
        4.4.9 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.5 小結(jié)
第五章 以DQPC為配體的銥(Ⅲ)配合物合成及抗腫瘤活性研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 配體DQPC的合成
        5.3.2 [Ir(ppy)_2(DQPC)]PF_6(Ir-1)的合成與表征
        5.3.3 [Ir(bzq)_2(DQPC)]PF_6(Ir-2)的合成與表征
        5.3.4 [Ir(piq)_2(DQPC)]PF_6(Ir-3)的合成與表征
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 細(xì)胞毒性結(jié)果
        5.4.2 配合物誘導(dǎo)細(xì)胞自噬
        5.4.3 細(xì)胞凋亡分析
        5.4.4 DNA損傷實(shí)驗(yàn)
        5.4.5 細(xì)胞內(nèi)ROS含量的變化
        5.4.6 線粒體膜電位的變化
        5.4.7 細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)穩(wěn)態(tài)
        5.4.8 細(xì)胞內(nèi)Cyto-C的釋放研究
        5.4.9 侵襲實(shí)驗(yàn)
        5.4.10 細(xì)胞周期阻滯的測定
        5.4.11 Western Bloting
    5.6 小結(jié)
第六章 研究結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Autophagy prevents autophagic cell death in Tetrahymena in response to oxidative stress[J]. Si-Wei ZHANG,Jiang-Nan FENG,Yi CAO,Li-Ping MENG,Shu-Lin WANG.  Zoological Research. 2015(03)
[2]細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死[J]. 何廣蕾.  生物學(xué)教學(xué). 2015(02)
[3]Clinical epidemiology of gastric cancer in Hehuang valley of China:A 10-year epidemiological study of gastric cancer[J]. Su Yan,Bin Li,Zhen-Zhong Bai,Jun-Qi Wu,Da-Wei Xie,Ying-Cai Ma,Xu-Xiang Ma,Jun-Hui Zhao,Xin-Jian Guo.  World Journal of Gastroenterology. 2014(30)
[4]Clinicopathological and prognostic differences between mucinous gastric carcinoma and signet-ring cell carcinoma[J]. Zhaode Bu,Zhixue Zheng,Ziyu Li,Xiaojiang Wu,Lianhai Zhang,Aiwen Wu,Xianglong Zong,Jiafu Ji.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(01)
[5]關(guān)于抗腫瘤藥物分類的共識建議[J]. 孫燕.  循證醫(yī)學(xué). 2004(03)
[6]釕配合物的抗腫瘤活性研究進(jìn)展[J]. 汪中明,計亮年.  化學(xué)進(jìn)展. 2002(04)
[7]MAPK signal pathways in the regulation of cell proliferation in mammalian cells[J]. WEI ZHANG, Hui Tu LIU The Key Laboratory of Cell Proliferation and Regulation Biology of Ministry of Education, College of Life Sciences, Beijing Normal University, Beijing 100875, China.  Cell Research. 2002(01)



本文編號：3222928