金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）是一種重要的食源性條件致病菌,嚴重時可導(dǎo)致致命感染。隨著抗生素大量不合理使用,多重耐藥金黃色葡萄球菌不斷出現(xiàn),對食品安全及人畜健康造成嚴重威脅。本研究以分離自養(yǎng)殖場以及臨床上的多重耐藥S.aureus為研究對象,研究S.aureus的抗生素耐藥種類和耐藥程度;利用PCR法研究S.aureus中β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、林可酰胺、大環(huán)內(nèi)酯類和氨基糖苷類抗生素的耐藥基因以及多藥外排泵基因norA的分布情況;并通過體外生長活力測定實驗了解舍曲林及其聯(lián)合抗生素使用對S.aureus體外抑菌及殺菌情況;分別采用結(jié)晶紫染色法和甲醇提取法研究舍曲林對S.aureus生物被膜和葡萄球菌黃素形成能力的影響;最后通過實時熒光定量PCR（RT-qPCR）研究舍曲林對S.aureus相關(guān)耐藥基因和毒力基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。利用統(tǒng)計學(xué)方法對實驗結(jié)果進行相關(guān)性分析,結(jié)果如下:（1）分離自養(yǎng)殖場的5株S.aureus菌株至少對7種抗生素耐藥,包括β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、林可酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類和氨基糖苷類抗生素。且最低抑菌濃度（MIC）均遠超出... 

【文章來源】：華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫表
第一章 緒論
    1.1 金黃色葡萄球菌
        1.1.1 金黃色葡萄球菌的生物特性
        1.1.2 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌
        1.1.3 金黃色葡萄球菌的流行性危害
        1.1.4 金黃色葡萄球菌生物被膜的形成
        1.1.5 金黃色葡萄球菌黃素
        1.1.6 金黃色葡萄球菌毒力因子表達調(diào)控系統(tǒng)
    1.2 抗生素
        1.2.1 抗生素耐藥性
    1.3 非抗生素(non-antibiotics)
        1.3.1 非抗生素抑菌作用機制
        1.3.2 5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs):舍曲林
    1.4 治療細菌耐藥的策略
    1.5 本課題的研究意義及主要內(nèi)容
第二章 金黃色葡萄球菌耐藥性分析
    2.1 前言
    2.2 實驗材料和儀器設(shè)備
        2.2.1 實驗菌株
        2.2.2 實驗儀器和設(shè)備
        2.2.3 實驗試劑耗材
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細菌培養(yǎng)
        2.3.2 K-B紙片擴散法藥敏試驗
        2.3.3 最低抑菌濃度(MIC)測定
        2.3.4 DNA提取及引物合成
        2.3.5 PCR基因擴增
        2.3.6 PCR產(chǎn)物電泳驗證
        2.3.7 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 藥敏紙片結(jié)果
        2.4.2 最低抑菌濃度(MIC)測定結(jié)果
        2.4.3 耐藥基因檢測結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第三章 舍曲林對金黃色葡萄球菌耐藥性的影響
    3.1 前言
    3.2 實驗材料和儀器設(shè)備
        3.2.1 實驗菌株
        3.2.2 實驗儀器和設(shè)備
        3.2.3 實驗試劑耗材
    3.3 實驗方法
        3.3.1 棋盤法聯(lián)合抑菌試驗
        3.3.2 舍曲林對金黃色葡萄球菌生長活力的影響
        3.3.3 時間-殺菌曲線
        3.3.4 RNA提取及c DNA模板制備
        3.3.5 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)
        3.3.6 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 聯(lián)合抑菌試驗結(jié)果
        3.4.2 舍曲林對金黃色葡萄球菌活力的影響
        3.4.3 舍曲林與四環(huán)素聯(lián)用時對金黃色葡萄球菌的殺菌作用
        3.4.4 舍曲林對norA和 mec A耐藥基因表達的影響
    3.5 本章小結(jié)
第四章 舍曲林對金黃色葡萄球菌毒力因子的影響
    4.1 前言
    4.2 實驗材料和儀器設(shè)備
        4.2.1 實驗菌株
        4.2.2 實驗儀器和設(shè)備
        4.2.3 實驗試劑耗材
    4.3 實驗方法
        4.3.1 金黃色葡萄球菌生物被膜測定
        4.3.2 葡萄球菌黃素測定
        4.3.3 β-半乳糖苷酶測定
        4.3.4 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)
        4.3.5 數(shù)據(jù)分析
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 生物被膜測定結(jié)果
        4.4.2 葡萄球菌黃素測定結(jié)果
        4.4.3 β-半乳糖苷酶測定結(jié)果
        4.4.4 舍曲林對毒力基因表達的影響
    4.5 結(jié)果討論
    4.6 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    一、結(jié)論
    二、創(chuàng)新點
    三、展望
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]金黃色葡萄球菌血漿凝固酶抗血清的制備及ELISA檢測[D]. 李寅生.大連理工大學(xué) 2016
[2]食品中金黃色葡萄球菌的快速檢測方法研究[D]. 張超楠.吉林大學(xué) 2012
[3]PCR技術(shù)檢測肉及肉制品中金黃色葡萄球菌研究[D]. 劉景武.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號：3207055