目的利用建立的西尼羅假病毒報告系統(tǒng),體外篩選獲得抗西尼羅病毒抗體。方法首先,利用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測由噬菌體展示技術(shù)篩選獲得的13株抗西尼羅病毒候選抗體與靶蛋白-西尼羅病毒E蛋白結(jié)構(gòu)域Ⅲ（DⅢ）的結(jié)合;其次,將收集的含有西尼羅假病毒的細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋102倍,分別與相應(yīng)濃度的候選抗體室溫孵育1 h后,將假病毒上清+抗體混合液感染BHK21或者K562細(xì)胞,48 h后,裂解細(xì)胞測熒光素酶活性（RLU）。結(jié)果 13株候選抗體均能識別并結(jié)合西尼羅病毒E蛋白DⅢ;其中2株抗體（抗體5和7）具有較好的中和活性,低濃度下（5 mg/L）即能有效阻斷病毒入侵靶細(xì)胞;而2株抗體（抗體3和8）具有抗體增強效應(yīng)（ADE）,表現(xiàn)為靶細(xì)胞病毒感染增強。結(jié)論利用建立的西尼羅假病毒報告系統(tǒng),體外篩選獲得2株具有中和活性的抗西尼羅病毒抗體。 

【文章來源】：國際藥學(xué)研究雜志. 2020,47(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
    1.3 流式細(xì)胞儀檢測CD32（FcγRⅡ）表達
    1.4 抗體中和實驗檢測熒光素酶活性
    1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
    2.2 基于BHK21細(xì)胞的抗體中和實驗
    2.3 基于K562細(xì)胞的抗體中和實驗
3 討論



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