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測定HepG2細胞內(nèi) 13 C標記氨基酸及代謝物同位素豐度的方法

發(fā)布時間:2021-04-20 11:05
  目的利用穩(wěn)定同位素和氣相色譜-質譜(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)衍生化法檢測四君子湯(Sijunzi Decoction,SJZD)與絲裂霉素C(mitomycin C,MMC)聯(lián)用對HepG2細胞內(nèi)丙氨酸代謝的影響,探討不同給藥組與空白組HepG2細胞內(nèi)丙氨酸代謝的差異及其意義。方法 HepG2細胞分4組(空白組、SJZD組、MMC組和SJZD與MMC聯(lián)用組),分別給13C標記丙氨酸(13C-labeled alanine,13C-Ala)培養(yǎng)12 h,回收細胞并加入體積分數(shù)為80%的甲醇溶液超聲破碎后,離心取上清液,氮吹儀吹干,用體積分數(shù)為1%三甲基氯硅烷(trimethylchlorosilane,TMCS)的N-甲基-N-(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺(N-methyl-N-(trimethylsilyl) trifluoroacetamide,MSTFA)衍生化,利用GC-MS檢測并分析檢測結果。結果 13C-Ala同位素豐度在10.... 

【文章來源】:沈陽藥科大學學報. 2020,37(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 儀器與材料
2 方法
    2.1 溶液的配制
    2.2 供試品的處理
    2.3 色譜條件
    2.4 質譜條件
3 結果
    3.1 氨基酸對照品的檢測
    3.2 供試品的檢測
4 試驗條件優(yōu)化與討論
    4.1 衍生化條件的優(yōu)化
    4.2 氣相色譜條件的優(yōu)化
    4.3 培養(yǎng)條件的優(yōu)化



本文編號:3149559

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