目的通過3種方法檢測(cè)溶血血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）乙�；D(zhuǎn)移酶（Lyso-PAF acetyl transferase,LPAFAT）的活性并測(cè)定抑制劑對(duì)酶活性的抑制作用,比較這些方法的優(yōu)劣。方法分別采用LC/MS/MS檢測(cè)產(chǎn)物PAF,巰基反應(yīng)探針結(jié)合分光光度法檢測(cè)產(chǎn)物CoA-SH,TLC檢測(cè)熒光標(biāo)記產(chǎn)物法鑒定陽性和假陽性兩種不同化合物對(duì)LPAFAT酶活性的抑制作用。結(jié)果 LC/MS/MS方法通過檢測(cè)天然產(chǎn)物PAF的含量測(cè)定酶活性,抑制劑篩選結(jié)果準(zhǔn)確可靠。巰基反應(yīng)探針結(jié)合分光光度法雖然可以監(jiān)測(cè)產(chǎn)物CoA-SH的含量,但反應(yīng)體系中產(chǎn)生了大量干擾性的CoA-SH,因此并不能真實(shí)反映LPAFAT酶活性,亦不適于抑制劑活性篩選。TLC檢測(cè)熒光標(biāo)記產(chǎn)物法因底物NBD-Lyso PC結(jié)構(gòu)已被修飾,不能代表天然底物的真實(shí)反應(yīng)情況,可能存在錯(cuò)篩和漏篩。結(jié)論 LC/MS/MS檢測(cè)產(chǎn)物PAF測(cè)定LPAFAT活性以及篩選抑制劑,方法靈敏,數(shù)據(jù)結(jié)果可靠,但成本較高。監(jiān)測(cè)產(chǎn)物CoA-SH的含量不適合于測(cè)定LPAFAT酶活性。TLC檢測(cè)熒光標(biāo)記產(chǎn)物,操作簡(jiǎn)便,靈... 

【文章來源】：復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,47(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料和方法
結(jié)果
討論



本文編號(hào)：3149146