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基于DNA納米海綿細胞內(nèi)RNA吸附和清除策略用于增敏抗腫瘤化療研究

發(fā)布時間:2021-04-18 15:12
  DNA納米技術(shù)的發(fā)展為構(gòu)建各類功能性納米顆粒提供了重要的可編程模塊單元。由于DNA納米結(jié)構(gòu)具有合成簡單、生物相容性良好、易于功能化等特點,在生物醫(yī)藥等領域具有巨大的應用潛力。此外,DNA序列可被設計為核酸適配體或DNA剪切酶(DNAzyme)等多種具有生物功能的結(jié)構(gòu),因此可以用于靶向遞送化療藥物、特異性沉默細胞內(nèi)基因和細胞成像分析等許多領域。本課題通過設計具有多重生物功能的DNA納米花結(jié)構(gòu),實現(xiàn)了細胞內(nèi)特定RNA分子的吸附和清除,并用于輔助抗腫瘤化療藥物的研究。1.DNA納米海綿用于吸附細胞內(nèi)miRNA及增敏抗腫瘤藥物治療的研究本課題構(gòu)建了一種多功能的DNA納米海綿遞送系統(tǒng),通過負載大量的反義miRNA達到高效捕獲細胞質(zhì)微環(huán)境中miRNA-21的目的;并通過多位點的MUC1核酸適配體特異性靶向腫瘤細胞;同時DNA結(jié)構(gòu)中的雙鏈部分可以高效負載化療藥物阿霉素(DOX)。體外藥物釋放數(shù)據(jù)顯示,制劑在pH 5.0環(huán)境下48 h時DOX釋放量為83.75%,較pH 7.4環(huán)境中的釋放量提高56.79%。DNA納米載體在溶酶體微環(huán)境中會發(fā)生構(gòu)象轉(zhuǎn)換,這為精確釋放DOX,減少不良反應奠定基礎。我們系... 

【文章來源】:鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于DNA納米海綿細胞內(nèi)RNA吸附和清除策略用于增敏抗腫瘤化療研究


NFs/MUC1/miRNA-21納米海綿制備及作用原理示意圖

SEM圖,納米,反應時間,產(chǎn)物


圖 2.2 不同 RCA反應時間的 DNA 納米花 SEM圖Figure 2.2 SEM images of DNA nanoflowers with different RCA reaction tim用 SEM表征(A)0.5 h RCA 產(chǎn)物 scale:100 nm;(B)1 h RCA 產(chǎn)物 scale:20(C)1 h RCA 產(chǎn)物 scale:100 nm(D)2 h RCA產(chǎn)物 scale:100 nmNFs/MUC1/miRNA-21 形態(tài)表征 凝膠電泳CA 反應是制備 NFs/MUC1/miRNA-21 DNA 納米海綿的基礎。為反應進行成功,我們按照“2.2.1”項下的方法,對 RCA 反應進行,結(jié)果如圖 2.3 所示。RCA 反應產(chǎn)物(泳道 2, Lane 2)在瓊脂糖移動,基本處于加樣處,這源于 RCA 反應得到分子量大的 DNA DNA 模板鏈(Lane 3)和連接產(chǎn)物(DNA template+DNA primer在瓊脂糖凝膠上有較快的移動。分子量最小的 DNA 模板鏈移動

凝膠電泳,成像,平均電位,粒徑


圖 2.3 凝膠電泳成像圖e 2.3 Agarose gel electrophrker Lane 2: RCA Product Lane 4: Ligated(template+pr 以及 NFs/MUC1/miRNAUC1/miRNA-21 的粒徑iRNA-21/DOX 的粒徑iRNA-21 和 NFs/MUC1C1/miRNA-21 的平均 的平均電位約為-36.8±0

【參考文獻】:
期刊論文
[1]DNA納米結(jié)構(gòu)在藥物轉(zhuǎn)運載體和智能載藥中的應用進展[J]. 趙彥,郭琳潔,代江兵,李茜,李迪,王麗華.  分析化學. 2017(07)
[2]Critical protein GAPDH and its regulatory mechanisms in cancer cells[J]. Jin-Ying Zhang,Fan Zhang,Chao-Qun Hong,Armando E.Giuliano,Xiao-Jiang Cui,Guang-Ji Zhou,Guo-Jun Zhang,Yu-Kun Cui.  Cancer Biology & Medicine. 2015(01)
[3]CCK-8法和MTT法檢測人前列腺癌PC3細胞活性的最佳條件比較研究[J]. 李寧,萬文婷,金林紅.  貴州大學學報(自然科學版). 2009(03)



本文編號:3145693

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