背景:糖尿病性骨質疏松癥（Diabetic osteoporosis,DOP）是由糖尿病并發(fā)骨質疏松導致的骨量減少,是糖尿病累及骨骼出現的嚴重并發(fā)癥,該病嚴重影響著糖尿病患者的生存質量,二者之間的關系目前尚不明晰,如何能夠有效地控制及治療DOP已成為眾多醫(yī)務工作者和科研人員探討的焦點及研究的課題。二甲雙胍（Metformin,MF）是治療2型糖尿病患者的一線用藥,其在腫瘤、抗衰老、甲狀腺疾病、骨質疏松癥等領域的研究應用越來越受到重視。絕經期婦女雌激素缺乏會導致絕經后骨質疏松癥,雌激素通過抑制破骨細胞的分化、成熟,促進成骨細胞的增殖、分化,從而對骨形成發(fā)揮保護作用。近年來研究發(fā)現MF除了發(fā)揮降糖作用以外,還表現出明顯的成骨作用,MF的成骨作用涉及到多種細胞分子機制。一方面骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（Bone morphogenetic protein,BMP-2）和骨橋蛋白（Osteopontin,OPN）是成骨細胞分化、成熟的重要的因子,MF可通過激活磷酸腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK）代謝途徑,增... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠BMD以及骨礦含量（x±s）

二甲雙胍對去卵巢大鼠骨質疏松癥和骨髓間充質干細胞蘭州大學碩士學位論文骨向分化的影響及機制研究18傳代的大鼠BMSCs加入誘導的培養(yǎng)基，經差速貼壁后呈小圓球形懸浮在培養(yǎng)液內在2-3h內開始貼壁(圖2A)，接種3天后細胞呈梭形、紡錘型、多邊形、三角形，并向外伸展出生長突，6-8天長滿單層，部分細胞借突起相互連接，高密度區(qū)細胞逐步向成骨細胞形態(tài)轉化(圖2B)；生長突相互連接融合成片(圖2C)，成骨細胞可呈多層重疊生長，并呈現鈣化趨勢，細胞基質分泌增多并包裹細胞，10-12天后出現較多的散在的致密的團塊，并且逐漸增大，團塊周邊區(qū)域細胞密度程度高，而且細胞輪廓模糊，團塊中心區(qū)逐漸變暗，透光性差，形成明顯的結節(jié)(圖2D)。圖2傳代培養(yǎng)的大鼠BMSCs誘導分化為成骨細胞的形態(tài)（×100）A：細胞培養(yǎng)后1天的大鼠BMSCs；B：細胞接種后3天；C：細胞接種后5天；D：加入礦化誘導液后12天3.2.2大鼠BMSCs在誘導培養(yǎng)基中的生長曲線傳代大鼠BMSCs接種后1-3天內細胞增殖緩慢，此后細胞的增殖活性隨著培養(yǎng)時間的增加而增加，第6天達到高峰，以后增長速度逐漸減慢，細胞數量開始下降(圖3)。ABCD

二甲雙胍對去卵巢大鼠骨質疏松癥和骨髓間充質干細胞蘭州大學碩士學位論文骨向分化的影響及機制研究19圖3大鼠BMSCs分化為成骨細胞的生長曲線（MTT法）3.2.3大鼠BMSCs誘導分化為成骨細胞后礦化結節(jié)的形成在礦化誘導液的培養(yǎng)下，大鼠BMSCs分化為成骨細胞，多層重疊生長逐漸形成大小不一的結節(jié)，隨著膠原沉積和基質礦化，最后形成密度不均勻不透光的礦化結節(jié)（圖4A，B）。圖4大鼠BMSCs分化為成骨細胞的鑒定A：骨細胞鈣化中（誘導后14天）；B：骨細胞鈣化形成（誘導后28天）3.2.4各組大鼠BMSCs分化為成骨細胞后細胞增殖、ALP活性與鈣沉積量的變化為研究MF以及雌二醇是否會對去卵巢大鼠的BMSCs的細胞活性、ALP活性以及鈣化能力產生影響，培養(yǎng)各組大鼠的BMSCs并誘導其向成骨細胞分化(圖5)。與SHAM組比較，OVX組成骨細胞的增殖能力、ALP活性明顯被抑制,鈣沉積量明顯減少（P<0.05）；與OVX組比較，在給予MF和雌二醇干預后顯著增強了去卵巢大鼠成骨細胞的增殖能力以及ALP活性，鈣沉積量顯著增加(均AB


本文編號：3140796