目的由于缺乏高效的純化和載藥方法,細胞外囊泡（extracellular vesicle,EV）在藥物遞送載體的應用受到明顯限制。本研究在高效提取純化紅細胞膜的基礎上,制備并表征EV類似物人工紅細胞膜泡（artificial red blood cells membrane vesicle,ARBCMV）,評價其作為阿霉素遞送載體的可行性。方法本研究用低滲裂解與物理擠出方法制備ARBCMV,以人乳腺癌MDA-MB-231細胞來源EV為對照,通過透射電子顯微鏡和納米顆粒追蹤分析技術比較兩者形態(tài)、粒徑分布及合成效率,用熒光光譜技術分析載阿霉素ARBCMV的載藥量,在熒光顯微鏡下驗證其與人乳腺癌MDA-MB-231細胞融合的可行性并探索其遞送阿霉素進入細胞的能力。結果 ARBCMV和EV均為具有完整的膜性脂質雙分子層的杯狀結構,粒徑峰值分別為（133.7±5.4）nm和（160.5±4.2）nm,ARBCMV粒徑相對更均一;ARBCMV合成快速且高效,不依賴超高速離心機;載藥實驗證明ARBCMV具有負載阿霉素的能力;且細胞試驗證明ARBCMV可與乳腺癌細胞融合,并可將阿霉素成功遞入乳腺癌細胞... 

【文章來源】：實用醫(yī)學雜志. 2020,36(15)北大核心

【文章頁數】：6 頁

【部分圖文】：

ARBCMV制備過程

見表1。ARBCMV和EV的分離時間和提取量比較可知，提取EV需預先成功培養(yǎng)細胞，并超高速離心4 h，操作繁瑣且耗時達2～3 d，而ARBCMV制備僅需普通冷凍高速離心機和擠出器即可完成實驗，時長大約100 min。等量細胞可提取的MDA-MB-231 EV平均數量為2.04×1010個，ARBCMV平均數量為3.10×1010個，結果差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。因此，在相同的細胞數量情況下，可以提取相近的囊泡數量，但制備ARBCMV無需培養(yǎng)細胞，更加快速且高效，不依賴超高速離心機，對實驗室設備要求較低，因此更易于推廣應用。2.3 ARBCMV與人乳腺癌MDA-MB-231細胞的融合

見圖3。ARBCMV經過PKH-67膜染料染色后與細胞共孵育可使人乳腺癌MDA-MB-231細胞的細胞膜帶熒光，說明ARBCMV與人乳腺癌MDA-MB-231細胞成功融合，具有作為藥物載體并作用于癌細胞的潛力。2.4 載阿霉素ARBCMV的載藥量分析

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3139898