重組人促卵泡激素（Recombinant human follicle stimulating hormone,rh FSH）由α,β兩條肽鏈通過非共價(jià)鍵組成,通過基因重組技術(shù),將編碼人FSH的目的基因?qū)氲街袊鴤}鼠卵巢細(xì)胞（CHO）,經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng),分離和純化后而得rh FSH,可用于不孕不育的診斷和治療,可促使卵泡正常生長和雌性激素的產(chǎn)生,在治療不孕不育癥方面具有重要的藥用價(jià)值。國外原研藥重組促卵泡激素（rh FSH）產(chǎn)品主要由默克雪蘭諾公司生產(chǎn)的Gonal-F（果納芬）,以及默沙東公司生產(chǎn)的Puregon（普麗康）,國內(nèi)產(chǎn)品只有長春金賽藥業(yè)生產(chǎn)的金賽恒獲批上市,目前,國內(nèi)已有近10家企業(yè)正在處于臨床或申報(bào)階段。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,原研藥rh FSH的α和β亞基存在N端氨基酸缺失的現(xiàn)象,α亞基N端缺失1³個(gè)氨基酸,N端缺失α亞基比例約為2%,而β亞基N端缺失2個(gè)氨基酸,N端缺失β亞基比例約為50%,目前N端缺失這種現(xiàn)象廣泛存在,這種現(xiàn)象可能是蛋白質(zhì)翻譯后修飾所引起。根據(jù)生物類似藥研發(fā)與技術(shù)評價(jià)指導(dǎo)原則,我國企業(yè)獲批上市的生物類似藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)不低于國外原研藥產(chǎn)品,其分子結(jié)... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

目的肚段pL1的鑒別膚圖

圖 3.22 缺失βL1-2 質(zhì)譜圖譜圖 3.23 完整βL1-2 質(zhì)譜圖譜表 3.3 相對分子質(zhì)量檢測結(jié)果020406080100%Int.500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000Mass/Charge108 mV[sum= 10813 mV] Profiles 1-100 Smooth Gauss 5 -Baseline 15Data: BETA-T1-2-10001.B3 12 Dec 2017 10:38 Cal: 20180111_ref 11 Jan 2018 15:43Kratos PCAxima CFRplus V2.4.0: Mode reflectron_2GHz, Power: 109, Blanked, P.Ext. @ 2464 (bin 141)2182.70 {r5889}2139.66 {r6085}567.21 {r2285}2125.66 {r5818}623.13 {r2614}

Waters 2695 的最大受壓（4000 psi），雖然提高柱箱溫度會降低系統(tǒng)壓力，但是溫度太高（超過 60℃）時(shí)，色譜柱填料會溶解于流動相中，導(dǎo)致色譜柱分離效果下降，使用壽命縮短；UPLC（超高效液相色譜）可以承受更高的壓力，粒徑小于 2 μm 的色譜柱可以在 UPLC 上使用，實(shí)驗(yàn)證明，在 UPLC 上可以使缺失和完整 βL1 有效分離，分離度達(dá)到更大，但是，由于目前 UPLC 還沒有普及，其價(jià)格昂貴，儀器操作要求更高，大多數(shù)企業(yè)的研究方法還是以 HPLC 為主，因此，關(guān)于 UPLC 的實(shí)驗(yàn)方法，本文不再詳細(xì)研究，只對較廣泛的 HPLC 方法進(jìn)行詳細(xì)研究。因此，本文最終選用了 2.7 μm 的色譜柱，不僅可以有效分離缺失和完整 βL1，而且在柱溫 55℃時(shí)，壓力只有 1600 psi，可以使色譜柱達(dá)到最佳使用壽命。3.3 胰蛋白酶酶切條件優(yōu)化3.3.1 增加胰蛋白酶酶量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組人促卵泡激素N末端不均一性分析方法研究[J]. 楊少慧,李晶,梁成罡.  藥物分析雜志. 2017(05)
[2]長效重組人促卵泡激素主要功效的對比研究[J]. 李湛軍,王俊玲,李心欣,吳彥卓,梁成罡.  藥物分析雜志. 2016(03)
[3]重組人促卵泡激素質(zhì)量控制中理化測定代替生物測定簡介[J]. 李湛軍,梁成罡,楊化新.  藥物分析雜志. 2014(09)
[4]低劑量重組人促卵泡刺激素（rFSH）遞增方案誘導(dǎo)排卵的多中心前瞻性研究[J]. 劉金勇,王媁,張松英,鄭潔,劉嘉茵.  生殖與避孕. 2014(01)
[5]重組人促卵泡激素研究進(jìn)展[J]. 劉金釧,彭貴子,盧智俊,左聯(lián).  中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(03)
[6]重組人促卵泡激素在CHO細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 何太平,唐菁燕,徐瓏,宋春雷,譚曉晶,聶艷桃,楊波,雷韜.  中國生物制品學(xué)雜志. 2011(12)
[7]重組人促卵泡激素（rhFSH）肽圖分析方法研究[J]. 梁成罡,沈舒,楊化新.  中國生化藥物雜志. 2010(05)
[8]柱前衍生化反相高效液相色譜法定量測定重組人促卵泡激素中的單糖[J]. 程賓,梁成罡,楊化新.  藥物分析雜志. 2008(09)
[9]RP-HPLC測定重組人促卵泡激素中唾液酸含量[J]. 程賓,楊化新,梁成罡,馮芳.  藥物分析雜志. 2007(09)

碩士論文
[1]重組人促卵泡激素的質(zhì)量研究[D]. 陳寧.吉林大學(xué) 2007
[2]重組人促卵泡激素的純化及鑒定[D]. 劉慧娟.吉林大學(xué) 2007



本文編號：3100794