目的建立高效液相色譜法拆分并測定酮咯酸氨丁三醇對映異構體（S-KT與R-KT）的含量。方法采用CHIRALPAK AGP色譜柱（0.4 cm×10 cm,5 mm）,以10 mmol·L^-1乙酸銨（pH 5.5）-異丙醇（97∶3）為流動相,檢測波長324 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱溫25℃,進樣量5μL。結果 S-KT與R-KT的分離度為2.8。S-KT與R-KT均在3～60μg·mL^-1與峰面積線性關系良好（r均為0.9999）。S-KT和R-KT的低、中、高3個濃度平均回收率分別為96.9%、99.5%、101.3%和97.1%、100.2%、102.1%,RSD分別為1.0%、0.70%、0.50%和2.1%、0.60%和0.30%。結論所建立的方法經方法學驗證可用于拆分和測定S-KT與R-KT。 

【文章來源】：中南藥學. 2020,18(06)

【文章頁數】：4 頁

【部分圖文】：

KT的化學結構

取“2.1”項下KT消旋體對照品溶液、S-KT對照品溶液、R-KT對照品溶液、供試品溶液與系統適用性試驗溶液，進樣測定，見圖2。結果表明，在選定的色譜條件下，S-KT與R-KT峰能較好地分離，分離度為2.8；理論板數均大于2000。2.3 線性關系考察

流動相的p H值對拆分選擇性的影響顯著。AGP色譜柱應用的p H范圍是4～7,AGP的等電點是2.7，因此在其應用p H值范圍內蛋白分子結構中的氨基酸呈離子型狀態(tài)，該離子結構提供手性作用位點，利用手性藥物對映體與這些作用位點間產生的氫鍵、疏水效應、靜電作用等而達到拆分[7-12]。通過調整流動相中乙酸銨的p H值發(fā)現，隨著流動相p H值降低，S-KT和R-KT分離度增加，保留時間延長，變化趨勢見圖3。推測其原因，可能是流動相的p H值降低，使得帶電基團數目增加，手性藥物與AGP固定相作用增強，其保留值與選擇性也增加。隨著流動相p H值降低，S-KT和R-KT色譜峰也逐漸展寬，理論板數降低。通過比較在不同p H值時S-KT和R-KT的分離度與理論板數，最終選擇p H值為5.5作為流動相的p H值。3.3 流動相比例對分離的影響

【參考文獻】：
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本文編號：3093339