目的:研究兒茶素（Catechin, Cat）對Caco-2細(xì)胞膽固醇攝取的影響,以及可能的作用機(jī)制。方法:利用膽固醇:甲基β環(huán)糊精復(fù)合物（Chol:MβCD）建立Caco-2細(xì)胞脂質(zhì)蓄積模型。不同濃度的兒茶素(20、40、60μmol·L^-1)處理細(xì)胞24 h,結(jié)合油紅O染色法觀察細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)蓄積,酶法測定細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量及分布,qRT-PCR及Westernblot檢測膽固醇代謝相關(guān)基因NPC1L1和SREBP-2的表達(dá)。結(jié)果:與空白組相比,Chol:MβCD處理組細(xì)胞內(nèi)紅色脂滴顆粒以及膽固醇含量明顯增加。20～60μmol·L^-1兒茶素不僅可以不同程度地減少細(xì)胞內(nèi)紅染脂滴的形成,而且可以顯著降低細(xì)胞內(nèi)總膽固醇和游離膽固醇的含量,以及膽固醇酯在總膽固醇中的比例。此外,兒茶素可以劑量依賴性地降低膽固醇代謝相關(guān)基因NPC1L1及SREBP-2的mRNA和蛋白表達(dá)。其中以60μmol·L^-1 Cat處理組的作用最為顯著（P<0.01）。結(jié)論:兒茶素可能通過下調(diào)膽固醇代謝相關(guān)基因NPC1L1和SREBP-2的表達(dá),進(jìn)而... 

【文章來源】：中國醫(yī)院藥學(xué)雜志. 2020,40(06)北大核心

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【部分圖文】：

Cat對細(xì)胞內(nèi)NPC1L1 mRNA表達(dá)的影響

圖2 Cat對細(xì)胞內(nèi)NPC1L1 mRNA表達(dá)的影響本實(shí)驗(yàn)建立腸道細(xì)胞脂質(zhì)蓄積模型,通過油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,發(fā)現(xiàn)隨著兒茶素濃度的升高可以有效降低細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積。為了確定兒茶素是否能減少腸道細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平,我們進(jìn)一步采用酶法對細(xì)胞內(nèi)總膽固醇、游離膽固醇含量進(jìn)行了測定,結(jié)果顯示不同濃度兒茶素孵育24 h后呈濃度依賴性降低細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇、總膽固醇含量,以及膽固醇酯與總膽固醇的比例,以60 μmol·L-1兒茶素作用最顯著。發(fā)現(xiàn)兒茶素確實(shí)可以減少腸道細(xì)胞吸收膽固醇。

本實(shí)驗(yàn)建立腸道細(xì)胞脂質(zhì)蓄積模型,通過油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,發(fā)現(xiàn)隨著兒茶素濃度的升高可以有效降低細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積。為了確定兒茶素是否能減少腸道細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平,我們進(jìn)一步采用酶法對細(xì)胞內(nèi)總膽固醇、游離膽固醇含量進(jìn)行了測定,結(jié)果顯示不同濃度兒茶素孵育24 h后呈濃度依賴性降低細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇、總膽固醇含量,以及膽固醇酯與總膽固醇的比例,以60 μmol·L-1兒茶素作用最顯著。發(fā)現(xiàn)兒茶素確實(shí)可以減少腸道細(xì)胞吸收膽固醇。圖5 Cat對細(xì)胞內(nèi)SREBP-2蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]茶多酚EGCG通過SREBP2/LDLR通路調(diào)節(jié)HepG2細(xì)胞中的LDL攝取[J]. 郭琳娜,孫靜,崔傳玨,李建軍.  中國分子心臟病學(xué)雜志. 2018(04)



本文編號：3093295