膠質(zhì)瘤是最常見和死亡率極高的腦腫瘤。由于膠質(zhì)瘤呈浸潤性生長并多位于重要的腦功能區(qū)使得手術切除極為困難,所以藥物對膠質(zhì)瘤的預防和治療顯得尤其重要。然而,替莫唑胺是目前唯一一個被推薦用于膠質(zhì)瘤治療的一線藥物,因此迫切需要研發(fā)治療膠質(zhì)瘤的新藥物。天然產(chǎn)物特別是海洋天然產(chǎn)物是新型抗腫瘤先導化合物的重要來源。來源于米氏海參（Holothuria moebii）的米氏海參皂苷和來源于海灘的高鹽植物堿菀（Tripolium vulgaare）的堿菀酯A是新近發(fā)現(xiàn)的兩類不同結構類型的抗膠質(zhì)瘤活性物質(zhì)。本論文研究米氏海參皂苷和堿菀酯A的抗膠質(zhì)瘤作用和初步作用機制,主要的研究內(nèi)容包括:（1）用磺酰羅丹明B（SRB）方法測定米氏海參總皂苷SPT和其中的四個單體皂苷SP1-SP4以及堿菀酯A對不同膠質(zhì)瘤細胞增殖的抑制活性;（2）分別通過AnnexinV-FITC/PI雙染和PI染色實驗,用流式細胞儀分析米氏海參總皂苷SPT和它的主要成分SP3以及堿菀酯A誘導膠質(zhì)瘤細胞凋亡和對膠質(zhì)瘤細胞周期的影響;（3）用蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測米氏海參皂苷SPT、SP3和堿菀酯A對膠質(zhì)瘤細胞的凋亡蛋白、周... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?１腫瘤細胞中ＨＩＦ異常對能量代謝的影響［８７】??（２）?ＰＫＭ２表迗與癌細胞有氧糖酵解密切相關??最近研究人員發(fā)現(xiàn)Ｍ２型丙酮酸激酶（ｐｙｒｕｖａｔｅ?ｋｉｎａｓｅ?Ｍ２，?ＰＫＭ２）是糖酵解過??程非常重要的代謝分子

?’??濃度對應的ＯＤ值計算米氏海參皂苷對肢質(zhì)瘤細胞增殖的抑制率，鏺個結果重復??三次，然后用ＳＰＳＳ軟件計算ＩＣ５〇值。實驗結果（表２．１和圖２．３）顯奉：米氏海參??皂苷對肢質(zhì)瘤細胞Ｕ８７ＭＧ、Ｕ２５１、ＳＨＧ４４和Ｃ６細胞增殖有明顯的抑制作用；??單體皂苷ＳＰ１－ＳＰ４的ＩＣ５〇值為１．３０－６．１３ｎＭ，海參總皂苷ＳＰＴ的ＩＣ５〇值為３．１１－??４．２６ｎｇ／ｍＬ。米氏海參皂苷ＳＰ３和ＳＰＴ抑制人正常星型膠質(zhì)細胞ＨＡ增殖的ＩＣ５０??值分別為０．２５?ｐＭ和１．６１?ｎｇ／ｍＬ，說明米氏海參皂苷對人正常星型膠質(zhì)細胞ＨＡ??有一定的細胞毒性。??表２．?１米氏海參皂苷抑制膠質(zhì)瘤細胞增殖的ＩＣ５〇值（ｈＭ，ＳＰＴ單位是Ｍｇ／ｍＬ）??細胞株?ＳＰ１?ＳＰ２?ＳＰ３?ＳＰ４?ＳＰＴ?ＰＯＸ??Ｕ８７ＭＧ?２．１１?士?０．６３?４．６４士?０．１７?５．６６?±?１．７５?３．１６±?０．１９?３＿５３士?０．３３?１．３２?±０．０６??Ｕ２５１?３．８４±０．６８?２．３０?±０．６７?５．３２?士?０．６１?６．１３?±?０．７９?４．２６?±０．２７?９．６１?±０．０８??ＳＨＧ４４?３．０３?±?０．０７?２．７８?±?０．３４?２．４８?±?０．６５?２．８８?±?０．０４?３．１１?±０．４６?０．７２±０．０９１??Ｃ６?１．３０?士?０．１６?３．２９?±０．３６?３．６５?±０，９２?４．８３?±０．０５?４．２６?士?０．０６?０．７０?士?０．０２??ＨＡ?０．２５?±?０．０１?１

在藥物ＳＰ３?（１?ｐＭ）、ＳＰＴ?（２?｜ｘｇ／ｍＬ）和陽性對照藥ＢＴＺ?（５?｜ｉＭ）作用膠質(zhì)瘤細胞Ｕ２５１??２４ｈ后，流式細胞儀檢測細胞周期的變化，得到與Ｕ８７ＭＧ相似的實驗結果如（表??２．３和圖２．５）顯示：在膠質(zhì)瘤細胞Ｕ２５１中Ｇｏ／Ｇ！期細胞數(shù)減少了?２９．１７％和２０．９１％、??Ｇａ／Ｍ?期增加了?１２．４０％和?７．３７％，?Ｓ?期增加了?１６．７７％和?１３．５４％，說明?ＳＰ３?和?ＳＰＴ??主要將細胞周期阻滯在Ｓ期。綜上所述米氏海參皂苷主要將膠質(zhì)瘤細胞Ｕ８７ＭＧ??和Ｕ２５１周期阻滯在Ｓ期。??表２．３米氏海參皂苦５？３和８？丁對肢質(zhì)瘤細胞１１８７１＾０和１１２５１周期的影響??＾?Ｊ?Ｕ８７ＭＧ?Ｕ２５１??Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ??Ｇ〇／Ｇｉ?Ｇ２／Ｍ?Ｓ?Ｇ〇／Ｇｉ?Ｇｚ／Ｍ?Ｓ??ＣＯＮ?５７．８６?±４．２３?２２．５７?±２．４６?１９．５７?±?１．５１?５３．９９?±?４．３６?２５．９９?±?１．６４?２０．０２?±?１．６２??ＳＰ３?３５．６２?±２．１２?３２．１５?±?１．４８?３２．２３?±２．１６?２４．８２?±?２．４６?３８．３９?±３．２５?３６．７９?±４．５４??ＳＰ３－ＣＯＮ?－２２．２４?９．５８?１２．６６?－２９．１７?１２．４０?１６．７７??ＳＰＴ?３６．７０?±３．２１?３０．８０?±２．１６?３２．５０?±２．６６?３３．０８?±?２．３８?３３．３６?±３．８７?３３．５６?±１．８７??ＳＰＴ－ＣＯＮ?－２１．１６?８．２３?１２．９３?－２０．９１?７．３７?１３．５４??ＢＴＺ?２３．５６?±４


本文編號：3075930