研究背景自噬（autophagy）是真核細胞在自噬相關(guān)基因的調(diào)控下利用溶酶體降解自身受損細胞器和大分子物質(zhì)的過程,是細胞維持穩(wěn)態(tài)的重要機制。根據(jù)自噬靶標的不同,自噬可分為:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬、線粒體自噬、核糖體自噬及細胞核自噬等。細胞核自噬是選擇性降解細胞核內(nèi)容物的特殊自噬過程,通過清除受損細胞核膜及核內(nèi)物質(zhì),細胞核自噬可以維持細胞內(nèi)基因組的穩(wěn)定性,但是過度的細胞核自噬最終也可導致細胞死亡。目前大多數(shù)報道集中于胞漿內(nèi)物質(zhì)的自噬,關(guān)于降解細胞核內(nèi)容物的報道較少。研究表明細胞核自噬在癌癥治療中的生理病理過程具有重要意義。天然藥物通常具有高效、低毒的特點,可有效抑制、殺傷腫瘤細胞。目前關(guān)于天然藥物抗腫瘤的作用機制尚未完全明確,在一定程度上限制了天然藥物的開發(fā)與應用。本文我們通過闡明細胞核自噬新的分子調(diào)節(jié)機制,在理論上為天然抗腫瘤藥物的開發(fā)提供了重要依據(jù)。研究方法選擇人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7細胞作為體外研究對象。采用免疫印跡法（western blot）檢測細胞核受損標志物p-H2AX的表達,通過激光共聚焦（confocal）觀察細胞核的溢裂情況及細胞核自噬現(xiàn)象。采用免疫沉淀（immu... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

細胞核自噬過程中LC3與laminB1相互作用示意圖

陸軍軍醫(yī)大學博士學位論文SUMO 蛋白與底物結(jié)合，體內(nèi)的結(jié)合需要 E3 連接酶(SUMO E3 ligating enzymes)特異性地識別底物，通過與 E2 結(jié)合酶和底物相互作用，促進 SUMO 蛋白與底物結(jié)合[41-43]。早期研究發(fā)現(xiàn) SUMO 蛋白分子及相關(guān)蛋白酶主要存在于細胞核中，因此 SUMO 化修飾主要發(fā)生在細胞核中，在維持細胞核形態(tài)和功能方面發(fā)揮了重要作用[44-48]。底物蛋白在細胞核中與 SUMO 分子發(fā)生共價結(jié)合，UBC9 在細胞核中的定位則尤為關(guān)鍵[36

晾干，標記，掃描，保存電子版和膠片。計據(jù)均以 Mean ± SD 表示，利用 SPSS 13.0 軟件對 *P < 0.05，**P < 0.01 表示差異具有統(tǒng)計學意義。星導致乳腺癌 MDA-MB-231、MCF-7 細胞 DNA 損OX)以不同濃度(0 μM、2.5 μM、5 μM、7.5 μMCF-7 細胞 24 h，或以 10 μM 濃度處理 MDA-MB-2 h、24 h、36 h、48 h)，通過 western blot 檢測全細果顯示，細胞經(jīng) DOX 處理后，DNA 雙鏈斷裂標志物效和量效關(guān)系（如圖 2.1）。表明 DOX 可導致乳腺癌


本文編號：3075081