發(fā)布時(shí)間：2021-03-10 18:29

　　研究背景自噬（autophagy）是真核細(xì)胞在自噬相關(guān)基因的調(diào)控下利用溶酶體降解自身受損細(xì)胞器和大分子物質(zhì)的過程,是細(xì)胞維持穩(wěn)態(tài)的重要機(jī)制。根據(jù)自噬靶標(biāo)的不同,自噬可分為:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬、線粒體自噬、核糖體自噬及細(xì)胞核自噬等。細(xì)胞核自噬是選擇性降解細(xì)胞核內(nèi)容物的特殊自噬過程,通過清除受損細(xì)胞核膜及核內(nèi)物質(zhì),細(xì)胞核自噬可以維持細(xì)胞內(nèi)基因組的穩(wěn)定性,但是過度的細(xì)胞核自噬最終也可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。目前大多數(shù)報(bào)道集中于胞漿內(nèi)物質(zhì)的自噬,關(guān)于降解細(xì)胞核內(nèi)容物的報(bào)道較少。研究表明細(xì)胞核自噬在癌癥治療中的生理病理過程具有重要意義。天然藥物通常具有高效、低毒的特點(diǎn),可有效抑制、殺傷腫瘤細(xì)胞。目前關(guān)于天然藥物抗腫瘤的作用機(jī)制尚未完全明確,在一定程度上限制了天然藥物的開發(fā)與應(yīng)用。本文我們通過闡明細(xì)胞核自噬新的分子調(diào)節(jié)機(jī)制,在理論上為天然抗腫瘤藥物的開發(fā)提供了重要依據(jù)。研究方法選擇人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞作為體外研究對(duì)象。采用免疫印跡法（western blot）檢測(cè)細(xì)胞核受損標(biāo)志物p-H2AX的表達(dá),通過激光共聚焦（confocal）觀察細(xì)胞核的溢裂情況及細(xì)胞核自噬現(xiàn)象。采用免疫沉淀（immu... 

【文章來源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

細(xì)胞核自噬過程中LC3與laminB1相互作用示意圖

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文SUMO 蛋白與底物結(jié)合，體內(nèi)的結(jié)合需要 E3 連接酶(SUMO E3 ligating enzymes)特異性地識(shí)別底物，通過與 E2 結(jié)合酶和底物相互作用，促進(jìn) SUMO 蛋白與底物結(jié)合[41-43]。早期研究發(fā)現(xiàn) SUMO 蛋白分子及相關(guān)蛋白酶主要存在于細(xì)胞核中，因此 SUMO 化修飾主要發(fā)生在細(xì)胞核中，在維持細(xì)胞核形態(tài)和功能方面發(fā)揮了重要作用[44-48]。底物蛋白在細(xì)胞核中與 SUMO 分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合，UBC9 在細(xì)胞核中的定位則尤為關(guān)鍵[36

晾干，標(biāo)記，掃描，保存電子版和膠片。計(jì)據(jù)均以 Mean ± SD 表示，利用 SPSS 13.0 軟件對(duì) *P < 0.05，**P < 0.01 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。星導(dǎo)致乳腺癌 MDA-MB-231、MCF-7 細(xì)胞 DNA 損OX)以不同濃度(0 μM、2.5 μM、5 μM、7.5 μMCF-7 細(xì)胞 24 h，或以 10 μM 濃度處理 MDA-MB-2 h、24 h、36 h、48 h)，通過 western blot 檢測(cè)全細(xì)果顯示，細(xì)胞經(jīng) DOX 處理后，DNA 雙鏈斷裂標(biāo)志物效和量效關(guān)系（如圖 2.1）。表明 DOX 可導(dǎo)致乳腺癌


本文編號(hào)：3075081