目的:肺癌是最常診斷的癌癥,也是全球癌癥相關(guān)死亡的主要原因。大約85%的肺癌患者具有非小細(xì)胞型肺癌的組織學(xué)特征,特點是增殖周期短、轉(zhuǎn)移活性強、死亡率高。臨床上,只有一小部分的非小細(xì)胞型肺癌患者能夠在早期診斷,超過60%的肺癌患者在診斷時就出現(xiàn)了局部晚期或轉(zhuǎn)移性疾病,手術(shù)切除已不再是最佳選擇,此時肺癌患者的主要治療方法是常規(guī)化學(xué)療法和放射療法。紫杉醇（Paclitaxel,PTX）是臨床上最常見的抗癌藥物之一,常用作非小細(xì)胞型肺癌臨床化療的一線抗癌藥物。PTX抗腫瘤的機制是通過結(jié)合微管蛋白,穩(wěn)定非功能性的微管束來阻斷正常的有絲分裂和紡錘體發(fā)育,從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長的效果。然而,PTX的使用往往會帶來嚴(yán)重副作用和多藥耐藥性,這些缺點降低了其抗腫瘤的作用。因此探索治療非小細(xì)胞型肺癌的新型療法具有十分重要的意義。蛋氨酸腦啡肽（Methionine enkephalin,MENK）是衍生自腎上腺素原激素腦啡肽的內(nèi)源性阿片樣五肽,是免疫系統(tǒng)和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)之間的重要調(diào)節(jié)因子,它與阿片受體（OGFr）結(jié)合后具有直接的抗腫瘤活性。根據(jù)以往的研究報道,MENK可抑制胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肝... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

單藥組及聯(lián)合用藥組對A549細(xì)胞增殖的抑制作用(n=3)

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10圖2.MENK與PTX聯(lián)合應(yīng)用48h的劑量-效應(yīng)曲線、Fa-CI曲線Fig.2CombinationofMENKandPTXfor48hdose-effectcurve,Fa-CIcurve3.3Hoechst33258染色法觀察各組細(xì)胞凋亡形態(tài)及凋亡率Hoechst33258試劑是一種可以透過細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，染色之后，空白對照組的細(xì)胞形狀為圓形或橢圓形，比較規(guī)則，顏色呈現(xiàn)為均勻的淡藍(lán)色，基本未觀察到細(xì)胞凋亡的發(fā)生。與空白對照組相對比，MENK組和PTX組的部分細(xì)胞呈現(xiàn)亮藍(lán)色，細(xì)胞核固縮、碎裂、著色濃染、形狀不規(guī)則，能觀察到不同程度的細(xì)胞凋亡的發(fā)生。而MENK與PTX聯(lián)合應(yīng)用組則有大量細(xì)胞呈現(xiàn)核固縮，形成若干個形狀不規(guī)則的碎片，著色濃染，觀察到細(xì)胞凋亡的數(shù)量最多。根據(jù)倒置熒光顯微鏡下的計數(shù)結(jié)果，空白對照組的凋亡率為0.8%，MENK組的凋亡率為14%，PTX組的凋亡率為21%，而MENK與PTX聯(lián)合用藥組的凋亡率是34%。Hoechst33258熒光染色實驗結(jié)果初步表明，各實驗組在給藥48h后的細(xì)胞凋亡率均有升高。與單藥組相比，MENK聯(lián)合PTX組的細(xì)胞凋亡數(shù)量最多，凋亡率升高最明顯，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。（見圖3）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖3.熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)及各組細(xì)胞凋亡率Fig.3Themorphologyofapoptoticcellsobservedbyfluorescencemicroscopyandapoptosisrateofeachgroup.Note：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0013.4流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡為了進(jìn)一步確定各實驗組在給藥培養(yǎng)48h后的細(xì)胞凋亡情況，我們通過流式細(xì)胞術(shù)來進(jìn)行檢測。各組細(xì)胞經(jīng)過流式凋亡試劑盒染色后，上機進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示：空白對照組的細(xì)胞凋亡率為1.53%，MENK組、PTX組的細(xì)胞凋亡率分別為6.23%、6.04%，而MENK與PTX聯(lián)合用藥組的細(xì)胞凋亡率是13.22%。與空白對照組相比，各實驗組的細(xì)胞凋亡率均明顯升高，并且MENK與PTX聯(lián)合用藥組的細(xì)胞凋亡率要高于單獨用藥組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。這些數(shù)據(jù)表明，MENK和PTX均能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且兩者聯(lián)合應(yīng)用后誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用更強。（見圖4）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3073602