目的:研究奈比洛爾抑制高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2）上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的機(jī)制。方法:不同濃度奈比洛爾、DPI（NOX抑制劑）、AMPK抑制劑化合物C、AMPK激動(dòng)劑AICAR預(yù)處理1.5 h后,加入高糖(30 mmol·L^-1)刺激HK-2細(xì)胞48 h,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),熒光探針?lè)z測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖,Western Blot檢測(cè)細(xì)胞蛋白表達(dá)。結(jié)果:高糖降低HK-2細(xì)胞p-AMPK/AMPK,增加NOX4和p22^phox蛋白表達(dá),升高細(xì)胞內(nèi)ROS水平,誘導(dǎo)EMT發(fā)生。奈比洛爾10和20μmol·L^-1抑制高糖誘導(dǎo)EMT,且10μmol·L^-1奈比洛爾對(duì)HK-2細(xì)胞增殖無(wú)影響。奈比洛爾和DPI減少高糖誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞NOX4和p22^phox蛋白表達(dá),降低ROS水平,抑制EMT。奈比洛爾與AICAR增加p-AMPK/AMPK,抑制EMT,此作用可被化合物C拮抗。結(jié)論:奈比洛爾通過(guò)AMPK/NOX/ROS通路改善高糖誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞EMT... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)新藥雜志. 2020,29(17)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

高糖(30 mmol·L-1葡萄糖,48 h)誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞EMT

如圖2所示,奈比洛爾1和5 μmol·L-1預(yù)處理1.5 h對(duì)高糖誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞EMT無(wú)顯著影響,而10和20 μmol·L-1則明顯抑制(P<0.001),但2個(gè)濃度之間無(wú)顯著性差異。結(jié)果提示,奈比洛爾可抑制高糖誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞EMT。3 奈比洛爾對(duì)HK-2細(xì)胞增殖的影響

MTT實(shí)驗(yàn)顯示,奈比洛爾1,5和10 μmol·L-1處理后HK-2細(xì)胞A值與空白組相比無(wú)顯著性差異,提示上述濃度奈比洛爾對(duì)細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響。奈比洛爾20 μmol·L-1有降低HK-2細(xì)胞A值趨勢(shì),但尚未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(見圖3)。結(jié)合不同濃度奈比洛爾對(duì)高糖誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞EMT實(shí)驗(yàn)結(jié)果,課題組選用奈比洛爾10 μmol·L-1進(jìn)一步探討其機(jī)制。


本文編號(hào)：3064130