目的建立青霉素雜質(zhì)譜HPLC分析方法,并將其轉(zhuǎn)換成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液為樣品;首先分析《中國藥典》（2010年版,ChP2010）方法甲醇-緩沖鹽二元流動相色譜系統(tǒng)的缺陷;再利用實驗設計理念,以響應曲面法（response surface methodology,RSM）的中心組合設計（central composition design,CCD）對色譜系統(tǒng)進行優(yōu)化,滿意度函數(shù)法確定最優(yōu)色譜條件,并優(yōu)化梯度洗脫條件;最后,利用軟件對HPLC方法的流速、進樣體積和梯度時間進行幾何縮放,并通過色譜柱的選擇,將其分別轉(zhuǎn)換為UPLC方法和UHPLC方法。結(jié)果新HPLC方法:色譜柱為Capcell Pak C18 MGII（4.6mm×250mm,5μm）,流速:1.0m L/min,進樣體積:20μL;UPLC方法:色譜柱為Cortecs C18（2.1mm×100mm,1.6μm）,流速:0.35m L/min,進樣體積:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18（4.6mm×150mm,2.76μm）,流速:0.8mL/min,進樣體積:10μL。3種... 

【文章來源】：中國抗生素雜志. 2020,45(03)

【文章頁數(shù)】：12 頁

【部分圖文】：

青霉素的已知雜質(zhì)

采用ChP2010青霉素有關物質(zhì)HPLC方法分析青霉素混合降解溶液(圖2)，可見，雜質(zhì)主要集中在青霉素峰之前，部分雜質(zhì)未能完全分離；青霉烯酸二硫化物峰(54.21min)與梯度基線漂移重合，難以辨認；主峰拖尾較嚴重(峰不對稱因子As為4.39)，分析時間較長(82mim)；提示該方法有必要進行優(yōu)化。結(jié)合強制降解試驗對青霉素混合降解溶液中的雜質(zhì)峰進行歸屬(表5)，其可能結(jié)構(gòu)及特征見表6，與圖1中的雜質(zhì)比較，提示該色譜系統(tǒng)對部分青霉素降解產(chǎn)物可能無法檢出。

進一步通過響應面(response surfaces)揭示因素間的交互作用，曲面的曲率越大，說明兩因素間的交互作用越大。圖4為F1和F2對色譜系統(tǒng)4個因變量的響應面。圖4a顯示，F(xiàn)1和F2增大，Rt曲面升高；圖4b顯示，F(xiàn)1增大，Rs曲面升高，F(xiàn)2對曲面無影響；圖4c顯示，F(xiàn)1和F2增大，As曲面降低；圖4d顯示，F(xiàn)1和F2增大，Nimp曲面先升高后下降，F(xiàn)1和F2交互作用顯著；即流動相中乙腈/甲醇的比例是影響色譜分離的最關鍵因素。圖3 因素-響應關系擾動圖

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3054545