目前,治療慢性粒細胞白血病的一線治療藥物Imatinib出現(xiàn)患者不耐受以及耐藥性頻繁發(fā)生等問題,使得開發(fā)新型的該類小分子靶向治療藥物成為研究熱點。同時,在我國國內(nèi)還沒有自主研發(fā)上市的藥物。因此,本項研究目的是為了開發(fā)出更加安全有效且具有較Imatinib更加優(yōu)越的抗CML活性的新型酪氨酸激酶抑制劑。三氟甲基苯甲酰胺類化合物XX03529是通過合理藥物設(shè)計的理論思想,運用骨架躍遷的藥物設(shè)計方法對已上市藥物Imatinib的結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化改造,合成得到的一個母核結(jié)構(gòu)全新的化合物實體。本文旨在研究XX03529的抗腫瘤活性及其作用機制。通過MTT比色方法分別檢測了XX03529對慢性粒細胞白血病K562細胞株、人肺癌A549細胞株、人胃癌MKN45細胞株及人胃腸道間質(zhì)瘤GIST882細胞株的增殖抑制作用,試驗得到了該化合物對4種腫瘤細胞的半數(shù)抑制濃度IC₅₀值依次為0.019±0.011μmol/L,8.319±5.361μmol/L,7.577±2.943μmol/L,5.353±1.742μmol/L。該結(jié)果證明了XX03529對慢性粒細胞白血病K562細胞的選擇性較... 

【文章來源】：遼寧大學(xué)遼寧省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 論文選題依據(jù)及研究內(nèi)容
    1.1 研究現(xiàn)狀及研究意義
    1.2 研究目的及研究內(nèi)容
        1.2.1 研究目的
        1.2.2 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
第2章 XX03529對慢性粒細胞白血病K562細胞株的抗腫瘤活性研究
    2.1 前言
    2.2 XX03529的純度分析研究
        2.2.1 材料及試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 XX03529紫外最大吸收波長的確定
        2.2.4 HPLC色譜流動相條件
        2.2.5 試驗樣品XX03529的純度測定
    2.3 XX03529對腫瘤細胞抑制作用的選擇性研究
        2.3.1 材料及試劑
        2.3.2 實驗儀器
        2.3.3 試驗試劑的配制及試驗用品準備
        2.3.4 細胞培養(yǎng)方法
        2.3.5 腫瘤細胞生長曲線的測定
        2.3.6 MTT比色試驗檢測藥物對腫瘤細胞的選擇性
    2.4 四甲基偶氮唑藍（MTT）比色法檢測XX05329對K562細胞的增殖抑制率并繪制時效曲線及量效曲線
        2.4.1 材料及試劑
        2.4.2 實驗儀器
        2.4.3 試驗方法
    2.5 軟瓊脂克隆形成試驗檢測K562細胞對XX03529的敏感性
        2.5.1 材料及試劑
        2.5.2 實驗儀器
        2.5.3 試驗試劑的配制及試驗用品準備
        2.5.4 軟瓊脂克隆形成試驗方法
    2.6 試驗結(jié)果
        2.6.1 XX03529的純度分析研究結(jié)果
        2.6.2 四種腫瘤細胞生長曲線的測定結(jié)果
        2.6.3 藥物對四種腫瘤細胞的增殖抑制率及其IC50值
        2.6.4 XX03529對K562細胞的時效曲線及量效曲線
        2.6.5 K562細胞對XX03529的敏感性試驗結(jié)果
    2.7 討論
    2.8 小結(jié)
第3章 XX03529對慢性粒細胞白血病K562細胞株的作用機制研究
    3.1 前言
    3.2 XX03529對K562細胞分化及細胞周期動力學(xué)的影響
        3.2.1 材料及試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 Wright-Giemsa復(fù)合染色檢測藥物誘導(dǎo)細胞分化研究
        3.2.4 流式細胞術(shù)檢測藥物對細胞周期動力學(xué)研究
    3.3 XX03529對K562細胞凋亡的誘導(dǎo)效應(yīng)研究
        3.3.1 材料及試劑
        3.3.2 實驗儀器
        3.3.3 AO-EB雙染色檢測細胞凋亡形態(tài)變化
        3.3.4 DNAladder試驗
        3.3.5 流式細胞術(shù)檢測藥物誘導(dǎo)細胞凋亡作用
    3.4 XX03529對K562細胞的基因表達影響
        3.4.1 材料及試劑
        3.4.2 實驗儀器
        3.4.3 提取細胞總RNA
        3.4.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄
        3.4.5 RT-PCR技術(shù)擴增目的基因檢測藥物對細胞基因的表達量影響
    3.5 XX03529對K562細胞中蛋白表達的影響
        3.5.1 材料及試劑
        3.5.2 實驗儀器
        3.5.3 試劑配制
        3.5.4 蛋白樣品的制備
        3.5.5 BCA法檢測蛋白濃度
        3.5.6 Western-blot試驗方法
    3.6 試驗結(jié)果
        3.6.1 Wright-Giemsa復(fù)合染色檢測藥物誘導(dǎo)細胞分化研究
        3.6.2 流式細胞術(shù)檢測藥物對細胞周期動力學(xué)研究
        3.6.3 AO-EB雙染色檢測細胞凋亡形態(tài)變化
        3.6.4 DNAladder試驗
        3.6.5 流式細胞術(shù)檢測藥物誘導(dǎo)細胞凋亡作用
        3.6.6 RT-PCR技術(shù)擴增目的基因檢測藥物對細胞基因的表達量影響
        3.6.7 XX03529對K562細胞中蛋白表達的影響
    3.7 討論
    3.8 小結(jié)
第4章 基于計算機輔助藥物設(shè)計軟件的XX03529三維小分子模型的作用機制研究
    4.1 前言
    4.2 研究方法
        4.2.1 構(gòu)建小分子配體數(shù)據(jù)庫
        4.2.2 分子對接
    4.3 研究結(jié)果與討論
    4.4 小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
    5.1 全文總結(jié)
        5.1.1 主要結(jié)論
        5.1.2 主要創(chuàng)新點
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加科研情況



本文編號：3050461