目前,治療慢性粒細(xì)胞白血病的一線治療藥物Imatinib出現(xiàn)患者不耐受以及耐藥性頻繁發(fā)生等問(wèn)題,使得開(kāi)發(fā)新型的該類小分子靶向治療藥物成為研究熱點(diǎn)。同時(shí),在我國(guó)國(guó)內(nèi)還沒(méi)有自主研發(fā)上市的藥物。因此,本項(xiàng)研究目的是為了開(kāi)發(fā)出更加安全有效且具有較Imatinib更加優(yōu)越的抗CML活性的新型酪氨酸激酶抑制劑。三氟甲基苯甲酰胺類化合物XX03529是通過(guò)合理藥物設(shè)計(jì)的理論思想,運(yùn)用骨架躍遷的藥物設(shè)計(jì)方法對(duì)已上市藥物Imatinib的結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化改造,合成得到的一個(gè)母核結(jié)構(gòu)全新的化合物實(shí)體。本文旨在研究XX03529的抗腫瘤活性及其作用機(jī)制。通過(guò)MTT比色方法分別檢測(cè)了XX03529對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株、人肺癌A549細(xì)胞株、人胃癌MKN45細(xì)胞株及人胃腸道間質(zhì)瘤GIST882細(xì)胞株的增殖抑制作用,試驗(yàn)得到了該化合物對(duì)4種腫瘤細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度IC₅₀值依次為0.019±0.011μmol/L,8.319±5.361μmol/L,7.577±2.943μmol/L,5.353±1.742μmol/L。該結(jié)果證明了XX03529對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞的選擇性較... 

【文章來(lái)源】：遼寧大學(xué)遼寧省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 論文選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
    1.1 研究現(xiàn)狀及研究意義
    1.2 研究目的及研究?jī)?nèi)容
        1.2.1 研究目的
        1.2.2 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
第2章 XX03529對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株的抗腫瘤活性研究
    2.1 前言
    2.2 XX03529的純度分析研究
        2.2.1 材料及試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 XX03529紫外最大吸收波長(zhǎng)的確定
        2.2.4 HPLC色譜流動(dòng)相條件
        2.2.5 試驗(yàn)樣品XX03529的純度測(cè)定
    2.3 XX03529對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制作用的選擇性研究
        2.3.1 材料及試劑
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.3.3 試驗(yàn)試劑的配制及試驗(yàn)用品準(zhǔn)備
        2.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        2.3.5 腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
        2.3.6 MTT比色試驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性
    2.4 四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)XX05329對(duì)K562細(xì)胞的增殖抑制率并繪制時(shí)效曲線及量效曲線
        2.4.1 材料及試劑
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.4.3 試驗(yàn)方法
    2.5 軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)檢測(cè)K562細(xì)胞對(duì)XX03529的敏感性
        2.5.1 材料及試劑
        2.5.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.5.3 試驗(yàn)試劑的配制及試驗(yàn)用品準(zhǔn)備
        2.5.4 軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)方法
    2.6 試驗(yàn)結(jié)果
        2.6.1 XX03529的純度分析研究結(jié)果
        2.6.2 四種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定結(jié)果
        2.6.3 藥物對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制率及其IC50值
        2.6.4 XX03529對(duì)K562細(xì)胞的時(shí)效曲線及量效曲線
        2.6.5 K562細(xì)胞對(duì)XX03529的敏感性試驗(yàn)結(jié)果
    2.7 討論
    2.8 小結(jié)
第3章 XX03529對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株的作用機(jī)制研究
    3.1 前言
    3.2 XX03529對(duì)K562細(xì)胞分化及細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)的影響
        3.2.1 材料及試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 Wright-Giemsa復(fù)合染色檢測(cè)藥物誘導(dǎo)細(xì)胞分化研究
        3.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)研究
    3.3 XX03529對(duì)K562細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)效應(yīng)研究
        3.3.1 材料及試劑
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.3.3 AO-EB雙染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡形態(tài)變化
        3.3.4 DNAladder試驗(yàn)
        3.3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用
    3.4 XX03529對(duì)K562細(xì)胞的基因表達(dá)影響
        3.4.1 材料及試劑
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.4.3 提取細(xì)胞總RNA
        3.4.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄
        3.4.5 RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞基因的表達(dá)量影響
    3.5 XX03529對(duì)K562細(xì)胞中蛋白表達(dá)的影響
        3.5.1 材料及試劑
        3.5.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.5.3 試劑配制
        3.5.4 蛋白樣品的制備
        3.5.5 BCA法檢測(cè)蛋白濃度
        3.5.6 Western-blot試驗(yàn)方法
    3.6 試驗(yàn)結(jié)果
        3.6.1 Wright-Giemsa復(fù)合染色檢測(cè)藥物誘導(dǎo)細(xì)胞分化研究
        3.6.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)研究
        3.6.3 AO-EB雙染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡形態(tài)變化
        3.6.4 DNAladder試驗(yàn)
        3.6.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用
        3.6.6 RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞基因的表達(dá)量影響
        3.6.7 XX03529對(duì)K562細(xì)胞中蛋白表達(dá)的影響
    3.7 討論
    3.8 小結(jié)
第4章 基于計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)軟件的XX03529三維小分子模型的作用機(jī)制研究
    4.1 前言
    4.2 研究方法
        4.2.1 構(gòu)建小分子配體數(shù)據(jù)庫(kù)
        4.2.2 分子對(duì)接
    4.3 研究結(jié)果與討論
    4.4 小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
    5.1 全文總結(jié)
        5.1.1 主要結(jié)論
        5.1.2 主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加科研情況



本文編號(hào)：3050461