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兼具止血和促傷口修復(fù)的纖維蛋白凝膠的制備、表征及生物學(xué)評價

發(fā)布時間:2021-02-24 08:27
  如何快速有效地止血是手術(shù)中的一個重要步驟,在手術(shù)中,對傷口及時止血,不僅能提高手術(shù)的成功率,而且能減少術(shù)后的并發(fā)癥。隨著科技的發(fā)展,可吸收止血材料的應(yīng)用越來越多,但是這些可吸收止血材料只起到止血作用,不能補上缺失的細(xì)胞,傷口容易形成凹陷的疤痕,痊愈時間長,故含有種子細(xì)胞的止血材料是一個新的研究方向。本文主要研究的是一種兼具止血和促傷口修復(fù)的生物材料,將纖維蛋白原和凝血酶制備成纖維蛋白凝膠,通過材料學(xué)表征、止血評價、細(xì)胞相容性和包裹骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)評價篩選出合適的比例;然后將BMSC和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)同時裝載于凝膠內(nèi)部,希望使這種包裹BMSC和VEGF的水凝膠在止血的同時,將BMSC誘導(dǎo)為內(nèi)皮細(xì)胞,從外界引入內(nèi)皮細(xì)胞,加速傷口的愈合及修復(fù)。將纖維蛋白原溶液和凝血酶溶液按一定比例混合,模擬人體凝血反應(yīng)的最后階段,用凝血酶激活纖維蛋白原形成纖維蛋白,纖維蛋白再交聯(lián),最后形成纖維蛋白凝膠,成功制備出1:1、1:3、1:5三種不同比例的纖維蛋白凝膠,測膠呈半透明狀,具有一定韌性;通過溶脹度測定發(fā)現(xiàn),1:3的溶脹度最大;通過HE染色發(fā)現(xiàn),凝膠內(nèi)部為多孔纖維狀網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu);通過掃... 

【文章來源】:西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 止血輔料簡介
        1.1.1 止血輔料的歷史
        1.1.2 可吸收止血材料
        1.1.3 可吸收止血材料的分類
    1.2 水凝膠材料
        1.2.1 水凝膠的定義
        1.2.2 水凝膠的應(yīng)用
    1.3 纖維蛋白凝膠
    1.4 間充質(zhì)干細(xì)胞和血管內(nèi)皮生長因子的介紹
        1.4.1 間充質(zhì)干細(xì)胞
        1.4.2 血管內(nèi)皮生長因子
    1.5 論文的主要研究內(nèi)容、目的與意義及技術(shù)路線圖
        1.5.1 論文的研究目的與意義
        1.5.2 論文的主要研究內(nèi)容
        1.5.3 論文的技術(shù)路線圖
第2章 實驗方法及原理
    2.1 纖維蛋白凝膠的制備原理及方法
        2.1.1 纖維蛋白凝膠的制備原理
        2.1.2 纖維蛋白凝膠的制備方法及流程
    2.2 纖維蛋白凝膠材料學(xué)表征方法及原理
        2.2.1 溶脹度
        2.2.2 HE染色
        2.2.3 掃描電子顯微鏡
    2.3 纖維蛋白凝膠表面生物相容性評價方法及原理
        2.3.1 特異性免疫熒光染色
        2.3.2 細(xì)胞體外靜態(tài)培養(yǎng)
        2.3.3 血小板粘附
        2.3.4 靜態(tài)全血試驗
        2.3.5 凝血時間(APTT)
    2.4 纖維蛋白凝膠包裹骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的評價方法及原理
        2.4.1 包裹骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靜態(tài)培養(yǎng)
        2.4.2 不同VEGF的添加方式對包裹的BMSC的影響
    2.5 乳鼠創(chuàng)傷實驗
第3章 纖維蛋白凝膠的制備及其材料學(xué)表征
    3.1 試劑與儀器
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 試劑配置
        3.1.3 實驗儀器
    3.2 纖維蛋白凝膠的制備
        3.2.1 纖維蛋白原來源的選擇
        3.2.2 成膠判斷
        3.2.3 比例的篩選
        3.2.4 纖維蛋白凝膠的制備
    3.3 纖維蛋白凝膠的材料學(xué)表征
        3.3.1 溶脹度檢測結(jié)果
        3.3.2 HE染色
        3.3.3 掃描電鏡檢測結(jié)果
    3.4 本章小結(jié)
第4章 纖維蛋白凝膠的止血評價
    4.1 試劑與儀器
        4.1.1 實驗試劑
        4.1.2 試劑配置
        4.1.3 實驗儀器
    4.2 纖維蛋白凝膠表面的止血評價
        4.2.1 血小板粘附實驗
        4.2.2 靜態(tài)全血試驗
        4.2.3 活化部分凝血活酶時間檢測結(jié)果
    4.3 乳鼠創(chuàng)傷實驗
    4.4 本章小結(jié)
第5章 纖維蛋白凝膠的細(xì)胞相容性評價
    5.1 試劑與儀器
        5.1.1 實驗試劑
        5.1.2 試劑配置
        5.1.3 實驗儀器
    5.2 纖維蛋白凝膠表面的細(xì)胞相容性評價
        5.2.1 內(nèi)皮細(xì)胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)結(jié)果
        5.2.2 平滑肌細(xì)胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)結(jié)果
    5.3 纖維蛋白凝膠包裹骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的靜態(tài)培養(yǎng)
        5.3.1 凝膠中BMSC的細(xì)胞形態(tài)
        5.3.2 凝膠中BMSC的細(xì)胞活性
    5.4 樣品篩選
    5.5 本章小結(jié)
第6章 纖維蛋白凝膠的功能化初探
    6.1 試劑與儀器
        6.1.1 實驗試劑
        6.1.2 試劑配置
        6.1.3 實驗儀器
    6.2 不同VEGF的添加方式對纖維蛋白凝膠中包裹的BMSC的影響
        6.2.1 凝膠中的BMSC的細(xì)胞形態(tài)
        6.2.2 凝膠中的BMSC的細(xì)胞活性
        6.2.3 凝膠中的BMSC的細(xì)胞分化情況
    6.3 本章小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及科研成果



本文編號:3049096

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