四氯雙酚A（TCBPA）是一種重要的氯代雙酚類結(jié)構(gòu)類似物,因具有優(yōu)異的阻燃性能,故被世界各國作為阻燃添加劑大量應用到各類材料中,TCBPA在環(huán)境中分布廣泛且保有量巨大,目前在水體、土壤、甚至生物體中均有發(fā)現(xiàn)。由于TCBPA為有機質(zhì),因此易吸附在生物體表面而被吸收進入生物體,并通過食物鏈的級聯(lián)作用在高等生物中大量累積,進而對環(huán)境及生物體健康造成嚴重危害。然而,目前對TCBPA的生物毒性及致病機理仍知之甚少,雖然TCBPA在環(huán)境中分布廣泛,但濃度較低,一般維持在微克級別;因此,了解TCBPA在低濃度下對生物的毒性更具現(xiàn)實意義。本實驗選用被廣泛使用的真核模式生物釀酒酵母作為研究材料,對低濃度TCBPA脅迫下的生物毒性進行了評估,并對其毒性誘發(fā)的機制進行了初步探究,使人們更深入了解TCBPA的毒性,以期為后續(xù)將要繼續(xù)進行的TCBPA對人類等高等生物的毒性損傷研究提供理論依據(jù)。首先,將釀酒酵母暴露于低濃度TCBPA（0、5、10和20 μM）脅迫下,利用分光光度計及藍白染色檢測TCBPA對釀酒酵母生長及存活所造成的影響;并利用血球計數(shù)板顯微觀察測定釀酒酵母在對數(shù)期時的細胞溶脹率,以初步評估低濃度... 

【文章來源】：北京化工大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－３不同低劑量下ＴＣＢＰＡ釀酒酵母ＭＤＡ的含量??Ｆｉｇ．３－３?Ｃｏｎｔｅｎｔｓ?ｏｆ?ＭＤＡ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｏｗ?ｄｏｓｅｓ?ｏｆ?ＴＣＢＰＡ??

?２０??ＴＣＢＰＡ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（｜ｉＭ）??圖３－５不同低劑量ＴＣＢＰＡ下釀酒酵母胞內(nèi)８－ｏｘｏｄＧ的含量??Ｆｉｇ．３－５?Ｃｏｎｔｅｎｔｓ?ｏｆ?８－ｏｘｏｄＧ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｏｗ?ｄｏｓｅｓ?ｏｆ?ＴＣＢＰＡ??３．４．５不同低劑量ＴＣＢＰＡ下釀酒酵母損傷與ＲＯＳ之間的相關(guān)性分析??為探究釀酒酵母胞內(nèi)ＲＯＳ積累與這些損傷之間的相關(guān)性，我們使用了?ＰＡＳＷ??Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ軟件對ＲＯＳ與各損傷之間的相關(guān)性進行了雙變量相關(guān)性分析，結(jié)果如??圖３－６所示，ＲＯＳ含量與ＭＤＡ含量和８－ｏｘｏｄＧ含量成顯著正相關(guān)（ｒ＝０．７８４，??Ｐ＜０．０１），與線粒體膜電位水平成顯著負相關(guān)性（ｒ?＝－０．７４３，Ｐ?＜０．０１）。??表明，即使低劑量的ＴＣＢＰＡ仍可促使釀酒酵母胞大量產(chǎn)生ＲＯＳ，并導致細胞出??現(xiàn)一系列的氧化損傷。??３３??

ＴＣＢＰＡ所引發(fā)的生物毒性具有重要意義。??本章主要通過前期文獻檢閱，確認了促使胞內(nèi)ＲＯＳ積累相關(guān)的多條信號通??路，如圖４－１所示，然后通過特異性抑制劑抑制特定信號通路中對應的關(guān)鍵酶，??通過檢測此時細胞活性氧的產(chǎn)生情況來評估該通路在胞內(nèi)ＲＯＳ產(chǎn)生中所起到的??作用，進而初步篩選出與ＴＣＢＰＡ脅迫下釀酒酵母ＲＯＳ積累相關(guān)性較高的途徑，??并通過實時熒光定量ＰＣＲ技術(shù)檢測與ＲＯＳ產(chǎn)生相關(guān)蛋白激酶的表達情況，從基??因表達層面探宄ＴＣＢＰＡ誘發(fā)酵母ＲＯＳ產(chǎn)生的機制，最終對ＴＣＢＰＡ下酵母胞內(nèi)??ＲＯＳ積累做出合理解釋。??［Ｃａ２＋］?個▲??［ｉ?／ＰＴｍｅ?＼??｜?Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ?■?／?＼?／?ＥＴＣ?１??Ｉ?Ｔ－￣＾?＼?／?＾＾＂１??％?ｆ?；?Ｘ?ＭＡＰＫ?？?＼?／?，，：？?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?Ｍ??＼?Ｎｕｃｌｅｉ?（?Ｃｒｚｉ?—？?ｇｅｎｅ?ＰＫＣ?）?Ｍ??ＳＯＤ?Ｉ?｜?ＣＡＴ?｜?＊??圖４－１?ＴＣＢＰＡ脅迫下釀酒酵母活性氧產(chǎn)生機制的分析??Ｆｉｇ．４－１?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＲＯＳ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?Ｓ．?ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?ｕｎｄｅｒ?ＴＣＢＰＡ??３５??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]超臨界流體萃取在環(huán)境污染物分析中的應用[J]. 梁瑋,崔兆杰.  山東師大學報(自然科學版). 1997(04)



本文編號：3032924