PKC/NF-κB-PXR信號(hào)通路對(duì)P-糖蛋白基因表達(dá)的調(diào)控研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-10 12:02
P-糖蛋白(P-gp)是ABC(ATP binding cassette)轉(zhuǎn)運(yùn)體家族重要成員,也是藥物在機(jī)體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的重要載體。本文考察PKC/NF-κB-PXR信號(hào)途徑對(duì)LS174T細(xì)胞中P-gp基因表達(dá)的調(diào)控作用。運(yùn)用孕甾烷X受體(PXR)-MDR1雙熒光報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)探究PKC激動(dòng)劑佛波酯(PMA)對(duì)LS174T細(xì)胞中MDR1熒光素酶活性的影響;分別采用real-time qPCR和Western blot檢測(cè)PMA對(duì)LS174T細(xì)胞中P-gp mRNA表達(dá)、蛋白表達(dá)及NF-κB通路相關(guān)蛋白的影響。結(jié)果表明,PKC激動(dòng)劑PMA能明顯抑制PXR介導(dǎo)的P-gp熒光素酶活性、m RNA和蛋白表達(dá),并能顯著性增加胞內(nèi)Rel A/p65的核轉(zhuǎn)位。此外,si RNA干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PKCα siRNA、Rel A siRNA或PXR siRNA干擾均可顯著削弱PMA對(duì)P-gp基因表達(dá)的下調(diào)作用。因此,PKC激動(dòng)劑能顯著抑制PXR介導(dǎo)的P-gp基因表達(dá)并伴隨NF-κB激活,提示PKC/NF-κB-PXR信號(hào)通路對(duì)P-gp基因表達(dá)具有重要的調(diào)控作用。
【文章來源】:藥學(xué)學(xué)報(bào). 2017,52(01)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
材料與方法
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)試劑
實(shí)驗(yàn)儀器
LS174T細(xì)胞的培養(yǎng)
細(xì)胞轉(zhuǎn)染與報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
Western blot檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
si RNA干擾實(shí)驗(yàn)
數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
1 PMA對(duì)PXR介導(dǎo)的P-gp轉(zhuǎn)錄作用的影響
2 PMA對(duì)LS174T細(xì)胞中P-gp基因表達(dá)及蛋白表達(dá)的影響
3 PMA對(duì)LS174T細(xì)胞中NF-κB通路相關(guān)蛋白的影響
4 si RNA干擾對(duì)PMA調(diào)控P-gp基因表達(dá)的影響
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]甘草與甘遂的配伍對(duì)大鼠腸黏膜P-gp的影響[J]. 孫亞彬,李國(guó)鋒,唐中昆,吳炳義. 藥學(xué)學(xué)報(bào). 2010(04)
本文編號(hào):3027326
【文章來源】:藥學(xué)學(xué)報(bào). 2017,52(01)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
材料與方法
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)試劑
實(shí)驗(yàn)儀器
LS174T細(xì)胞的培養(yǎng)
細(xì)胞轉(zhuǎn)染與報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
Western blot檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
si RNA干擾實(shí)驗(yàn)
數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
1 PMA對(duì)PXR介導(dǎo)的P-gp轉(zhuǎn)錄作用的影響
2 PMA對(duì)LS174T細(xì)胞中P-gp基因表達(dá)及蛋白表達(dá)的影響
3 PMA對(duì)LS174T細(xì)胞中NF-κB通路相關(guān)蛋白的影響
4 si RNA干擾對(duì)PMA調(diào)控P-gp基因表達(dá)的影響
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]甘草與甘遂的配伍對(duì)大鼠腸黏膜P-gp的影響[J]. 孫亞彬,李國(guó)鋒,唐中昆,吳炳義. 藥學(xué)學(xué)報(bào). 2010(04)
本文編號(hào):3027326
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