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PKC/NF-κB-PXR信號通路對P-糖蛋白基因表達(dá)的調(diào)控研究

發(fā)布時間:2021-02-10 12:02
  P-糖蛋白(P-gp)是ABC(ATP binding cassette)轉(zhuǎn)運體家族重要成員,也是藥物在機(jī)體內(nèi)轉(zhuǎn)運的重要載體。本文考察PKC/NF-κB-PXR信號途徑對LS174T細(xì)胞中P-gp基因表達(dá)的調(diào)控作用。運用孕甾烷X受體(PXR)-MDR1雙熒光報告基因?qū)嶒炋骄縋KC激動劑佛波酯(PMA)對LS174T細(xì)胞中MDR1熒光素酶活性的影響;分別采用real-time qPCR和Western blot檢測PMA對LS174T細(xì)胞中P-gp mRNA表達(dá)、蛋白表達(dá)及NF-κB通路相關(guān)蛋白的影響。結(jié)果表明,PKC激動劑PMA能明顯抑制PXR介導(dǎo)的P-gp熒光素酶活性、m RNA和蛋白表達(dá),并能顯著性增加胞內(nèi)Rel A/p65的核轉(zhuǎn)位。此外,si RNA干擾實驗結(jié)果顯示,PKCα siRNA、Rel A siRNA或PXR siRNA干擾均可顯著削弱PMA對P-gp基因表達(dá)的下調(diào)作用。因此,PKC激動劑能顯著抑制PXR介導(dǎo)的P-gp基因表達(dá)并伴隨NF-κB激活,提示PKC/NF-κB-PXR信號通路對P-gp基因表達(dá)具有重要的調(diào)控作用。 

【文章來源】:藥學(xué)學(xué)報. 2017,52(01)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    實驗材料
    實驗試劑
    實驗儀器
    LS174T細(xì)胞的培養(yǎng)
    細(xì)胞轉(zhuǎn)染與報告基因?qū)嶒?br>    實時熒光定量PCR實驗
    Western blot檢測實驗
    si RNA干擾實驗
    數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
    1 PMA對PXR介導(dǎo)的P-gp轉(zhuǎn)錄作用的影響
    2 PMA對LS174T細(xì)胞中P-gp基因表達(dá)及蛋白表達(dá)的影響
    3 PMA對LS174T細(xì)胞中NF-κB通路相關(guān)蛋白的影響
    4 si RNA干擾對PMA調(diào)控P-gp基因表達(dá)的影響
討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]甘草與甘遂的配伍對大鼠腸黏膜P-gp的影響[J]. 孫亞彬,李國鋒,唐中昆,吳炳義.  藥學(xué)學(xué)報. 2010(04)



本文編號:3027326

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