氯乙基亞硝基脲（CENUs）是臨床上重要的抗癌烷化劑,然而O⁶-烷基鳥嘌呤-DNA-烷基轉移酶（AGT）介導腫瘤細胞對CENUs產(chǎn)生耐藥性是其臨床應用中的重要問題;設計開發(fā)AGT抑制劑作為輔藥與CENUs聯(lián)合使用能夠有效克服CENUs的耐藥性。因此,合理地評價CENUs及其聯(lián)合用藥策略的耐藥性對于CENUs的臨床應用和新藥開發(fā)具有重要意義。利用微孔纖維素支架培養(yǎng)人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤SF763細胞（AGT高表達）和SF126細胞（AGT低表達）,建立了三維腫瘤細胞模型;并將其應用于對CENUs類藥物尼莫司�。ˋCNU）、卡莫司�。˙CNU）和洛莫司�。–CNU）以及CENUs與AGT抑制劑聯(lián)合用藥的耐藥性研究。結果表明,三維腫瘤細胞對各CENUs均表現(xiàn)出明顯的耐藥性,其IC₅₀值為傳統(tǒng)二維細胞組的1.7～3.5倍;在CENUs與AGT抑制劑聯(lián)合用藥組中,雖然二維細胞組的耐藥性有所下降,但三維細胞組仍然表現(xiàn)出了明顯的耐藥性。由于體外三維腫瘤球比傳統(tǒng)二維細胞更加接近體內(nèi)實體瘤的生長狀態(tài)及腫瘤微環(huán)境,因此,使用三維細胞模型評價藥物的耐藥性有利于得到更加準確... 

【文章來源】：化學試劑. 2020,42(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

CENUs對三維和二維培養(yǎng)下SF763和

將SF763和SF126同時在三維和二維條件下進行培養(yǎng),用Alamar Blue法監(jiān)測細胞的增殖情況。由圖2可知,2種細胞在2種培養(yǎng)方式下增殖活性均表現(xiàn)出先增加后降低的趨勢。二維培養(yǎng)下2種細胞均在第4 d達到最大增殖活性,之后呈下降趨勢,這是由于隨著細胞密度的增加,發(fā)生接觸抑制,導致細胞增殖能力下降[18]。而在三維培養(yǎng)條件下,SF763和SF126細胞分別在第6 d和第5 d達到最大增殖活性,隨著細胞呈球形生長,腫瘤球核心細胞接觸到的氧氣和營養(yǎng)不足,導致內(nèi)部細胞活性下降,僅外層細胞發(fā)揮增殖活性。因此,三維培養(yǎng)條件下細胞的增殖能力整體上略低于二維培養(yǎng)的細胞[19,20]。Chaicharoenaudomrung等[21]用鈣-藻酸鹽支架對人膠質(zhì)母細胞瘤U-251細胞進行三維培養(yǎng)。Wang等[22]用殼聚糖-透明質(zhì)酸支架對多形性膠質(zhì)母細胞瘤GBM6細胞進行三維培養(yǎng),均發(fā)現(xiàn)三維培養(yǎng)的細胞其增殖能力低于二維培養(yǎng)的細胞。以上結果說明二維培養(yǎng)的細胞為單層生長,相對于三維培養(yǎng)的細胞能夠更加充分的接觸氧氣和營養(yǎng),具有更強的增殖活性。2.3 CENUs對三維和二維培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤細胞的抑制作用

2.1 三維細胞的形態(tài)表征分別使用倒置顯微鏡和掃描電鏡對二維和三維培養(yǎng)的腫瘤細胞形態(tài)進行了觀察。如圖1所示,二維培養(yǎng)的2種細胞均呈貼壁狀態(tài)單層生長(見圖1a和1c);而細胞在纖維素支架上進行三維培養(yǎng)后,2種細胞均生長成為腫瘤球,其中SF763細胞腫瘤球的體積較大,平均直徑達到30 μm(見圖1b);SF126細胞腫瘤球體積較小,平均直徑不足10 μm(見圖1d)。這是由于SF763惡性程度比SF126細胞高,因此在纖維素支架中生長較快,進而長成體積較大的細胞球;這與二維培養(yǎng)中觀察到的SF763細胞比SF126細胞增殖快的結果一致。該結果表明,SF763和SF126細胞經(jīng)過纖維素支架三維培養(yǎng)后,可以在支架上生長成為結構完整的三維細胞球體,形成多細胞球體微環(huán)境,從而模擬體內(nèi)膠質(zhì)瘤的形態(tài)和結構[17]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]低氧激活偶氮苯類AGT抑制劑的合成及還原性研究[J]. 余然,張黎黎,孫國輝,崔鑫,任婷,趙麗嬌,鐘儒剛.  化學試劑. 2019(10)
[2]新型多功能抗癌烷化劑研究進展[J]. 葛瑤,任婷,崔鑫,趙麗嬌,鐘儒剛.  化學試劑. 2018(08)



本文編號：3018738