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紫草素減輕低氧-復(fù)氧致大鼠心肌細(xì)胞系H9c2損傷

發(fā)布時(shí)間:2021-02-04 08:46
  目的探索紫草素對(duì)低氧-復(fù)氧(H/R)損害的H9c2心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。方法將心肌細(xì)胞系H9c2分為對(duì)照組、H/R組、紫草素(0. 1、1和10μmol/L)干預(yù)組,每組3個(gè)平行孔; MTT法檢測(cè)紫草素對(duì)H9c2細(xì)胞毒性;流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡和周期; DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞活性氧水平;生化檢測(cè)細(xì)胞中MDA、8-OHdG和GSH含量;qPCR檢測(cè)細(xì)胞γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表達(dá); Western blot檢測(cè)細(xì)胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Keap1和Nrf2蛋白表達(dá);免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞Nrf2蛋白進(jìn)核情況。結(jié)果紫草素呈濃度-時(shí)間依賴性抑制H9c2細(xì)胞增殖(P<0. 05); H/R誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期阻滯及促進(jìn)Bax及cleaved caspase-3蛋白表達(dá),抑制Bcl-2蛋白表達(dá)(P<0. 05),紫草素呈濃度依賴性抑制細(xì)胞凋亡、解除細(xì)胞周期阻滯及cleaved caspase-3和Bax蛋白表達(dá),增加Bcl-2蛋白表達(dá);紫草素可降低H/R所致活性氧水平、MDA及8-OHdG升高,增高H/R所... 

【文章來(lái)源】:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(03)

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞與藥物:
        1.1.2 材料:
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞的分組及處理:
        1.2.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖:
        1.2.3 流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡和周期:
        1.2.4 2',7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽(2',7'-dichlo-rofluorescin diacetate,DCFH-DA)檢測(cè)細(xì)胞中活性氧水平:
        1.2.5 Western blot檢測(cè)細(xì)胞中Bax、Bcl-2、Keap1和Nrf2蛋白表達(dá):
        1.2.6硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法、ELISA和微量酶標(biāo)法分別檢測(cè)細(xì)胞中MDA、8-OHd G、GSH含量:
        1.2.7 qPCR檢測(cè)細(xì)胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-GCS)、HO-1和醌氧化還原酶1[NAD(P)H dehydrogenase1,NQO1]mRNA表達(dá):
        1.2.8 免疫熒光檢測(cè)紫細(xì)胞中Nrf2進(jìn)核:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 紫草素對(duì)H9c2細(xì)胞增殖的影響
    2.2 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞凋亡周期的影響
    2.3 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中活性氧水平的影響
    2.4 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中Bax、Bcl-2、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白含量的影響
    2.5 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中MDA、8-OHdG和GSH含量的影響
    2.6 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表達(dá)影響
    2.7 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中Keap1和Nrf2蛋白含量的影響
    2.8 紫草素對(duì)H/R損傷的H9c2細(xì)胞中Nrf2蛋白進(jìn)核的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紫草素抗腫瘤作用的分子機(jī)制[J]. 瞿成名,徐文娟,許梅梅,孫貝貝.  臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志. 2019(29)
[2]心肌缺血再灌注損傷中西醫(yī)機(jī)制及相關(guān)藥物治療的研究進(jìn)展[J]. 姜彤偉,郝珍珠,王冰梅,郭慧文,樸星虎,程祺.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2019(09)
[3]紫草素對(duì)高糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激的影響[J]. 王喜歡,張金華,胡亞南,張洪.  中國(guó)病理生理雜志. 2018(07)
[4]紫草素清除自由基和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化活性研究[J]. 魏夢(mèng)濤,徐佳,舒青龍,侯吉華,邵文祥,左愛(ài)仁.  食品工業(yè). 2018(03)
[5]辛伐他汀對(duì)老年小鼠心肌缺血再灌注時(shí)氧化應(yīng)激及細(xì)胞凋亡的影響[J]. 廖小龍,王首紅,王中華,郭偉新,溫劍藝,覃鐵和.  中國(guó)藥房. 2016(19)



本文編號(hào):3018054

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