發(fā)布時間：2021-01-20 18:49

　　糜爛性毒劑（vesicants或blistering agents）是迄今仍具極大軍事威脅的經(jīng)典化學(xué)戰(zhàn)劑之一。烷化劑氮芥（nitrogen mustard,NM）是糜爛性毒劑的典型代表,可引起難愈性皮膚損傷,尚缺乏有效治療措施。研究表明,NM引起皮膚損傷的機制多樣且復(fù)雜。目前認(rèn)為,炎癥反應(yīng)在NM引起的皮膚損傷中起關(guān)鍵作用,貫穿NM誘導(dǎo)皮損發(fā)生、發(fā)展的全過程。然而,NM引起的皮膚炎癥損傷的確切機制,至今仍未闡明,也是限制特效抗毒劑研發(fā)的關(guān)鍵所在。因此,明確NM誘導(dǎo)皮膚炎癥損傷的確切機制,對于研制、開發(fā)特效抗毒藥物有重要的軍用價值,拓展對烷化劑類引起的炎癥反應(yīng)的認(rèn)識。NLRP3（NLR pyrin domain containing 3）炎性小體是一種細(xì)胞內(nèi)蛋白復(fù)合物,可被多種病原、大分子和環(huán)境刺激物激活。激活的NLRP3炎性小體可使Caspase-1活化,剪切IL-1β和IL-18而使其成熟,在維持固有免疫系統(tǒng)功能尤其是炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用;但是,過度激活NLRP3炎性小體可引發(fā)嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),進而造成機體損傷。近年來研究發(fā)現(xiàn),NLRP3炎性小體介導(dǎo)的炎性損傷在理化刺激如紫外光、二硝基... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

陸軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文26圖2.1NM對細(xì)胞形態(tài)的影響（標(biāo)尺=100μm）2.2.1.2NM對細(xì)胞增殖活力的影響如圖2.2所示，CCK-8檢測不同濃度（1、5、10、20、50、100和200μM）NM處理HaCaT細(xì)胞4h后的增殖活力。當(dāng)NM濃度≤50μM時，與對照組相比，細(xì)胞增殖活力無顯著變化（P＞0.05），當(dāng)NM濃度為100μM和200μM時，細(xì)胞增殖活力分為下降10%和40%（P＜0.05）。以上結(jié)果表明，當(dāng)NM濃度為20μM時，對細(xì)胞增殖活力和形態(tài)都無顯著影響，因此后續(xù)研究選用NM濃度為1～20μM的濃度梯度或單獨用20μM。圖2.2NM對細(xì)胞增值活力的影響bP＜0.01，與對照組比較2.2.2NM對HaCaT細(xì)胞分泌IL-1β的影響如圖2.3所示，HaCaT細(xì)胞在1～20μM濃度NM處理4h后，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中IL-1β的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NM處理能夠濃度依賴性上調(diào)細(xì)胞IL-1β釋放水平（P＜0.05）。

陸軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文26圖2.1NM對細(xì)胞形態(tài)的影響（標(biāo)尺=100μm）2.2.1.2NM對細(xì)胞增殖活力的影響如圖2.2所示，CCK-8檢測不同濃度（1、5、10、20、50、100和200μM）NM處理HaCaT細(xì)胞4h后的增殖活力。當(dāng)NM濃度≤50μM時，與對照組相比，細(xì)胞增殖活力無顯著變化（P＞0.05），當(dāng)NM濃度為100μM和200μM時，細(xì)胞增殖活力分為下降10%和40%（P＜0.05）。以上結(jié)果表明，當(dāng)NM濃度為20μM時，對細(xì)胞增殖活力和形態(tài)都無顯著影響，因此后續(xù)研究選用NM濃度為1～20μM的濃度梯度或單獨用20μM。圖2.2NM對細(xì)胞增值活力的影響bP＜0.01，與對照組比較2.2.2NM對HaCaT細(xì)胞分泌IL-1β的影響如圖2.3所示，HaCaT細(xì)胞在1～20μM濃度NM處理4h后，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中IL-1β的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NM處理能夠濃度依賴性上調(diào)細(xì)胞IL-1β釋放水平（P＜0.05）。


本文編號：2989581