目的探討在小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2中過(guò)表達(dá)Ghrelin對(duì)Aβ誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)及細(xì)胞線粒體功能的影響及相關(guān)機(jī)制。方法應(yīng)用慢病毒介導(dǎo)Ghrelin過(guò)表達(dá)載體感染小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2,免疫熒光觀察感染效率,應(yīng)用RT-PCR及Western blot檢測(cè)慢病毒感染后細(xì)胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表達(dá)水平;Aβ25-35預(yù)處理過(guò)表達(dá)Ghrelin的BV-2后,利用ELISA、CCK-8、AnnexinV FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)及JC-1法和免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)炎癥因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平及細(xì)胞增殖、凋亡、線粒體膜電位及胞質(zhì)中ROS及Cyt-C的表達(dá);電子顯微鏡下觀察過(guò)表達(dá)Ghrelin后,Aβ25-35對(duì)BV-2細(xì)胞中凋亡小體產(chǎn)生的影響;Western blot檢測(cè)上述處理后BV-2細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9的表達(dá)。結(jié)果免疫熒光顯示慢病毒介導(dǎo)Ghrelin過(guò)表達(dá)載體的感染效率可達(dá)85%以上,慢病毒感染的BV-2細(xì)胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表達(dá)顯著升高;ELISA及CCK-8、An... 

【文章來(lái)源】：免疫學(xué)雜志. 2020,36(07)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

慢病毒感染對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞中Ghrelin表達(dá)的影響

流式JC-1檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與Control組BV-2細(xì)胞相比，BV-2+Aβ25-35組、Lv-Ghrelin+Aβ25-35組與LvNC+Aβ25-35組細(xì)胞的線粒體膜電位顯著下降（P<0.05），表明Aβ25-35可明顯破壞BV-2細(xì)胞線粒體膜電位；而與BV-2+Aβ25-35組細(xì)胞相比，Lv-Ghrelin+Aβ25-35組細(xì)胞線粒體膜電位明顯升高（P<0.05),Lv-NC+Aβ25-35組細(xì)胞無(wú)明顯變化（P>0.05），這表明Ghrelin可抑制Aβ25-35對(duì)BV-2細(xì)胞線粒體膜電位的破壞，見(jiàn)圖4。2.5 過(guò)表達(dá)Ghrelin對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞中ROS及Cyt-C表達(dá)的影響

電鏡下觀察過(guò)表達(dá)細(xì)胞中Ghrelin對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞中凋亡小體產(chǎn)生的影響（×7 200)


本文編號(hào)：2988351