目的建立血小板細(xì)胞膜色譜模型,考察不同溫度下抗血小板聚集藥物在該色譜柱上的保留行為,模擬藥物在正常和發(fā)熱病理狀態(tài)下與血小板的相互作用。方法通過物理吸附法,構(gòu)建血小板細(xì)胞膜色譜固定相,濕法裝柱,制成血小板細(xì)胞膜色譜柱,BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白含量,Na⁺、K⁺-ATPase檢測試劑盒測定生物活性,應(yīng)用該色譜模型,考察色譜柱的特異性及在35.0～42.0℃溫度范圍下藥物的保留特性。結(jié)果構(gòu)建的血小板細(xì)胞膜色譜模型其血小板ATP酶活性值為0.214,固定前血小板膜蛋白質(zhì)量濃度為0.340 9 mg·mL^-1,固定后血小板膜蛋白質(zhì)量濃度為0.080 5 mg·mL^-1。3個(gè)抗血小板聚集藥物氯吡格雷、雙嘧達(dá)莫和西洛他唑在血小板細(xì)胞膜色譜柱和空白硅膠柱上保留特征有較大差異,36.0℃時(shí)3個(gè)藥物在血小板細(xì)胞膜色譜柱上的保留時(shí)間均為最大值,然后隨溫度的升高,保留時(shí)間均呈下降的趨勢。結(jié)論成功構(gòu)建了血小板細(xì)胞膜色譜模型,并首次研究了不同溫度下抗血小板聚集藥物在該色譜模型上的保留特性,模擬了正常和發(fā)熱體溫時(shí)抗血小板... 

【文章來源】：中國藥學(xué)雜志. 2020,55(15)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

ATP酶活性標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1 ATP酶活性標(biāo)準(zhǔn)曲線通過對比發(fā)現(xiàn)，3個(gè)抗血小板藥物在空白硅膠柱和血小板CMC上的保留特征各不相同，且相較于不保留成分亞硝酸鈉，其保留特征均有明顯的區(qū)別(空白硅膠柱保留時(shí)間為2.405 min，血小板CMC的保留時(shí)間為2.018 min)。以亞硝酸鈉溶液所測得的保留時(shí)間作為死時(shí)間(t0)，通過公式k=(tR-t0)/t0，計(jì)算容量因子k，結(jié)果見表1。

本實(shí)驗(yàn)以血小板膜蛋白為研究對象，硅膠為固定相載體，構(gòu)建了血小板CMC色譜模型;在35.0～42.0℃，研究了抗血小板聚集藥物氯吡格雷，雙嘧達(dá)莫和西洛他唑在血小板CMC上保留時(shí)間變化。在36.0℃時(shí)，3個(gè)藥物保留時(shí)間都有一個(gè)最大值，然后隨著溫度升高，保留時(shí)間均減小，其中雙嘧達(dá)莫減小最多，氯吡格雷減小最少，表明溫度對雙嘧達(dá)莫與血小板相互作用影響最大，對氯吡格雷影響最小，初步揭示了溫度對藥物與血小板CMC相互作用的影響，為正常體溫和發(fā)熱體溫下藥物與蛋白質(zhì)的相互作用提供借鑒。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]色譜技術(shù)在中藥有效成分辨識(shí)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 李紹平,趙靜,錢正明,李靜.  中國科學(xué):化學(xué). 2010(06)
[2]Effects of Taohong Siwu Decoction Ⅱ in the Chick Chorioallantoic Membrane （CAM） Assay and on B16 Melanoma in Mice and Endothelial Cells ECV304 Proliferation[J]. 徐曉玉,王淑美,陳偉海,陳剛,王友京.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2006(01)
[3]血小板靶向中藥有效成分及單體研究進(jìn)展[J]. 史秀麗,傅佳,李光武.  中國中藥雜志. 2006(05)
[4]生物色譜法在中藥活性成分篩選中的應(yīng)用[J]. 金念祖,陸曉和.  中國生化藥物雜志. 2003(05)



本文編號(hào)：2972433