【目的】探討甘露糖（Man）對炎癥反應的調(diào)控及其機制,為甘露糖在炎癥疾病中的應用提供依據(jù)�！痉椒ā坷貌煌瑵舛鹊母事短翘幚鞷AW264.7巨噬細胞24 h或48 h,細胞計數(shù)檢測增殖情況。低濃度（2 mmol/L）和高濃度（20 mmol/L）Man預處理RAW264.7細胞12 h,然后脂多糖（LPS）處理8 h或24 h,收集mRNA、蛋白質(zhì)及培養(yǎng)上清,通過Q-PCR、Western blot和ELISA檢測炎癥相關指標以及甘露糖受體（CD206）的變化。【結果】在5 mmol/L以下,細胞增殖隨Man的濃度增加而增加;在5 mmol/L以上,則相反。和LPS處理相比,LPS+甘露糖2 mmol/L（Man2）能夠增高IL-1β、IL-12和TNF-α的mRNA水平以及蛋白水平（均P<0.05）;LPS+Man20顯著抑制IL-1β、IL-12、TNF-α、IL-6和CCL2的mRNA水平和蛋白水平（均P<0.05）。網(wǎng)絡藥理學預測甘露糖及其代謝產(chǎn)物的潛在作用靶點有包括AKT和STAT3在內(nèi)的20個蛋白。Man2可協(xié)同LPS刺激AKT和STAT3的磷酸化（均P<0... 

【文章來源】：中山大學學報(醫(yī)學科學版). 2020,41(04)北大核心

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【部分圖文】：

不同濃度甘露糖對RAW246.7細胞增殖的影響

和對照組相比，LPS能夠顯著刺激巨噬細胞中IL-1β（P=0.000）、IL-6(P=0.000）、IL-12(P=0.000）、TNF-α（P=0.000）和CCL2(P=0.000）蛋白的分泌（圖3）。和LPS單獨處理相比，2 mmol/L甘露糖能夠協(xié)同LPS對巨噬細胞IL-1β（P=0.000 9）、IL-6(P=0.047）、IL-12(P=0.000 9）、TNF-α（P=0.002）和CCL2(P=0.002 2）蛋白分泌的刺激，而20mmol/L甘露糖則能夠顯著抑制LPS誘導的IL-1β（P=0.002 1）、IL-6(P=0.029）、IL-12(P=0.000 4）、TNF-α（P=0.000 1）和CCL2(P=0.001）蛋白分泌。另外，20 mmol/L的甘露糖單獨處理能夠抑制對巨噬細胞中IL-1β（P=0.045）和TNF-α（P=0.008 3）的分泌。2.4 甘露糖及甘露糖-6-磷酸的作用靶點預測

甘露糖進入細胞后大部分會在己糖激酶的作用下轉(zhuǎn)變成甘露糖-6-磷酸[2]，我們通過網(wǎng)絡藥理學的方法分析了甘露糖及甘露糖-6-磷酸的潛在作用靶點。結果顯示，甘露糖有101個作用靶點，甘露糖-6-磷酸有12個靶點，其中有3個是兩者的共同靶點（圖4）。另外，通過將化合物和炎癥的20個共有靶點導入DAVID數(shù)據(jù)庫進行通路富集顯示，甘露糖及甘露糖-6-磷酸通過和炎癥相關的20個靶點影響9條炎癥信號相關通路，分別是：PI3K-Akt信號通路、HIF-1信號通路、胰島素抵抗通路、Ras信號通路、Rap1信號通路、雌激素信號通路、孕酮介導的卵母細胞成熟通路、調(diào)節(jié)干細胞多能性的信號通路和麻疹相關通路。圖4 化合物-靶點網(wǎng)絡

【參考文獻】：
期刊論文
[1]伊馬替尼抑制脂多糖誘導的巨噬細胞炎癥表型[J]. 王樂旬,吳惠娟,張盛昔,楊瀟,郭姣.  中山大學學報(醫(yī)學版). 2019(05)
[2]網(wǎng)絡藥理學——中藥復方作用機制研究新視角[J]. 陳海彬,周紅光,李文婷,程海波,吳勉華.  中華中醫(yī)藥雜志. 2019(07)



本文編號：2961213