第一部分巨噬細(xì)胞膜包裹載藥PLGA納米粒的制備及表征研究目的:提取巨噬細(xì)胞膜、制備載HCPT-PLGA納米粒及巨噬細(xì)胞膜包裹載HCPT-PLGA納米粒（HCPT-MCNP）,并評價其表征。方法:采用低滲裂解結(jié)合脂質(zhì)體擠出儀的機械破壞法破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),差速離心分離保留有完整膜蛋白序列的細(xì)胞膜,并采用熒光染色驗證提取的是不含細(xì)胞核的純化細(xì)胞膜。乳化法制備載HCPT-PLGA納米粒,提純的巨噬細(xì)胞膜與制備的HCPT-PLGA通過脂質(zhì)體擠出儀共擠得到HCPT-MCNP。體外評價其形態(tài)、粒徑、分布、電位、穩(wěn)定性及藥物包封率、載藥率、藥物釋放率等。用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE）檢測MCNP納米粒上巨噬細(xì)胞膜蛋白的保留情況。結(jié)果:（1）采用低滲緩沖液結(jié)合脂質(zhì)體擠出儀機械破壞法破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)后得到細(xì)胞裂解產(chǎn)物,同時包含了細(xì)胞膜,細(xì)胞核及其他一些細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)。差速離心法離心一次后提取物中同時可見藍(lán)色的細(xì)胞核熒光和橙紅色細(xì)胞膜熒光,重復(fù)離心一次后幾乎只有紅染的細(xì)胞膜而沒有藍(lán)染的細(xì)胞核。（2）乳化法制備載HCPT-PLGA能得到形態(tài)規(guī)則,粒徑較為均一的負(fù)載有HCPT藥物的PLGA納米粒... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

熒光染色后提取細(xì)胞膜同時用BCA法定量提取出的細(xì)胞膜

蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y=8.126×10-4x+0.181，R2=0.9981，根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)曲線計算提取的細(xì)胞膜蛋白定量得到約 1×108細(xì)胞能得到的蛋白量為約 0.3 mg。2.PLGA、MCNP 粒徑、電位及穩(wěn)定性制備好的 PLGA 與 MCNP 納米粒外觀為淡藍(lán)色乳光狀懸液，半透明，室溫下靜置穩(wěn)定，未見明顯分層或是沉降現(xiàn)象。動態(tài)光散射（DLS）粒度分析儀測量載藥 PLGA 與 MCNP 的粒徑分布分別如圖 1-3 所示，粒徑、電位及多分散系數(shù)（PDI）如表 1 所示：

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤內(nèi)科治療模式的研究進展[J]. 張百紅,岳紅云.  癌癥進展. 2018(14)



本文編號：2951287