目的:從頭花蓼內(nèi)生真菌中篩選出具有抗尿路感染的次生代謝產(chǎn)物。方法:（1）利用平板劃線法以及頂端和邊緣取樣法對頭花蓼內(nèi)生真菌進(jìn)行分離和純化;（2）采用牛津杯法測定內(nèi)生菌對泌尿系統(tǒng)感染常見臨床耐藥菌的抗菌活性及棋盤式微量稀釋法檢測內(nèi)生真菌聯(lián)合抗生素對臨床耐藥菌的作用;（3）采用r DNA的內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS序列）對活性內(nèi)生菌進(jìn)行分子鑒定;（4）采用活性導(dǎo)向分離技術(shù)對頭花蓼3株內(nèi)生真菌的發(fā)酵物進(jìn)行抗菌活性物質(zhì)分離、純化,并利用現(xiàn)代NMR和MS等波譜技術(shù)鑒定其化合物結(jié)構(gòu);（5）采用96孔板二倍稀釋法測試單體化合物對臨床耐藥菌的抗菌作用以篩選出活性成分,并在單獨(dú)使用無抗菌作用的濃度下評估活性成分對抗生素最低抑菌濃度（MIC）（對耐藥菌株）的影響,了解其逆轉(zhuǎn)耐藥菌對抗生素耐藥性的作用;（6）采用GC-MS技術(shù)對活性菌株Aspergillus terreus代謝物的油脂類組分進(jìn)行分析、鑒定;結(jié)果:從頭花蓼植株中得到56株內(nèi)生真菌,其中對受試菌的MIC在50 mg·m L-1及以下的內(nèi)生菌有16株。本論文從其中3株頭花蓼內(nèi)生真菌（即Gibberella intermedia、Aspergillus... 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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引言
第一章 頭花蓼內(nèi)生菌的分離和純化
    1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 樣本處理
        2.2 內(nèi)生菌的分離
        2.3 內(nèi)生菌的純化
        2.4 內(nèi)生菌的菌種保存
        2.5 植物樣本表面消毒檢驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 表面消毒結(jié)果檢驗(yàn)
        3.2 分離純化得到的內(nèi)生菌
    4 本章小結(jié)
第二章 活性內(nèi)生菌的篩選
    1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 內(nèi)生菌的獲取
            2.1.1 發(fā)酵培養(yǎng)基的配置
            2.1.2 內(nèi)生菌種子的發(fā)酵
            2.1.3 內(nèi)生菌代謝物的萃取
        2.2 菌懸液的配置
        2.3 抗菌活性的測定
            2.3.1 牛津杯法
            2.3.2 試管二倍稀釋法與涂布平板法
        2.4 聯(lián)合抑菌實(shí)驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 具有抗菌活性的內(nèi)生菌的抗菌效果
        3.2 活性內(nèi)生菌抗菌的 MIC 和 MBC
        3.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)
        3.4 聯(lián)合用藥試驗(yàn)結(jié)果
    4 本章小結(jié)
第三章 頭花蓼內(nèi)生真菌THL-038（Aspergillus terreus）的代謝產(chǎn)物研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 內(nèi)生菌的發(fā)酵
        2.2 真菌ITS序列測定
        2.3 油脂類代謝物的獲得
        2.4 油脂類代謝物的鑒定
            2.4.1 甲酯化樣品
            2.4.2 GC-MS條件
            2.4.3 數(shù)據(jù)處理及質(zhì)譜檢索
        2.5 抑菌活性測定
        2.6 活性跟蹤分離
            2.6.1 THL-038 活性跟蹤分離
            2.6.2 THL-038 活性跟蹤分離流程圖
        2.7 抑菌活性測定
        2.8 逆轉(zhuǎn)耐藥性實(shí)驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 內(nèi)生菌的分子鑒定
        3.2 油脂類代謝物及相對含量
        3.3 油脂類代謝物的抑菌活性
        3.4 THL-038 活性化合物的鑒定
        3.5 單體體外抗菌實(shí)驗(yàn)
        3.6 逆轉(zhuǎn)耐藥性實(shí)驗(yàn)
    4 本章小結(jié)
第四章 頭花蓼內(nèi)生真菌THL191（Gibberella intermedia）的代謝產(chǎn)物研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 內(nèi)生菌的發(fā)酵
        2.2 真菌ITS序列測定
        2.3 活性跟蹤分離
            2.3.1 THL191 活性跟蹤分離
            2.3.2 THL191 活性跟蹤分離流程圖
        2.4 體外抗菌實(shí)驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 內(nèi)生菌的分子鑒定
        3.2 THL191 活性化合物的鑒定
        3.3 FA對3株耐藥菌的MIC和MBC
        3.4 逆轉(zhuǎn)耐藥菌耐藥性實(shí)驗(yàn)
    4 本章小結(jié)
第五章 頭花蓼內(nèi)生真菌THL-005（Alternaria tenuissima）的代謝產(chǎn)物研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 內(nèi)生菌的發(fā)酵
        2.2 真菌ITS序列測定
        2.3 活性跟蹤分離
            2.3.1 THL-005 活性跟蹤分離
            2.3.2 THL-005 活性跟蹤分離流程圖
        2.4 體外抗菌實(shí)驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 內(nèi)生菌的分子鑒定
        3.2 THL-005 活性化合物的鑒定
        3.3 體外抗菌實(shí)驗(yàn)
    4 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷
致謝
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：2946204