碘（I₃^-）對(duì)羅丹明B（RB）具有熒光猝滅作用,可使RB的熒光信號(hào)強(qiáng)度減弱甚至消失,而β-內(nèi)酰胺酶作用下的青霉素水解產(chǎn)物青霉噻唑酸可將I₃^-還原為I^-,使體系熒光信號(hào)再現(xiàn),據(jù)此建立了以碘-羅丹明B締合物為熒光探針測(cè)定藥劑中青霉素含量的新方法。在激發(fā)波長(zhǎng)360nm,發(fā)射波長(zhǎng)580nm條件下進(jìn)行了β-內(nèi)酰胺酶活性的熒光測(cè)定。結(jié)果表明,在0～2.4U/mL范圍內(nèi),β-內(nèi)酰胺酶活性與其熒光強(qiáng)度變化值呈良好的線性關(guān)系,檢出限為0.002U/mL。方法的加標(biāo)回收率為96.67%～103.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）2.0%～4.5%。該方法簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確可靠、靈敏度高,成功用于自制酶液酶活性測(cè)定。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)抗生素雜志. 2020年10期

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

不同體系的熒光光譜

在RB+I3-體系中，考察了碘液用量對(duì)RB熒光猝滅的影響(圖2)。結(jié)果表明，隨著碘液量的增加，RB的熒光強(qiáng)度逐漸降低，在0～2m L碘液用量范圍內(nèi)，線性度較好。當(dāng)?shù)庖杭尤肓吭黾拥?.00m L時(shí)，RB的熒光強(qiáng)度開(kāi)始呈現(xiàn)平緩趨勢(shì)，當(dāng)?shù)庖涸黾拥?.00m L時(shí)，RB的熒光強(qiáng)度趨于穩(wěn)定。為了得到較為準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇碘液用量為2.00m L。2.4 締合物p H環(huán)境考察

取15U/m Lβ-內(nèi)酰胺酶標(biāo)準(zhǔn)溶液4.00m L，改變酶促反應(yīng)時(shí)間并完成PNC+I3-+RB體系熒光強(qiáng)度測(cè)定(圖4)。結(jié)果表明，隨著酶促反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)，青霉噻唑酸還原碘導(dǎo)致I3-濃度下降，PNC+I3-+RB體系熒光強(qiáng)度遞增，在0～10min內(nèi)，F(xiàn)與時(shí)間有線性關(guān)系，符合酶催化一級(jí)反應(yīng)特征。13min后，F(xiàn)達(dá)到最大并趨于恒定，故酶促反應(yīng)時(shí)間確定為15min。圖4 酶促反應(yīng)時(shí)間曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2937215