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硫酸化糖納米粒子誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-21 15:41
  人體內(nèi)的多糖,如糖胺聚糖(glycosaminoglycan)家族,能通過(guò)多糖-蛋白質(zhì)相互作用來(lái)影響蛋白質(zhì)的活性,調(diào)節(jié)生命過(guò)程中的多種信號(hào)通路的傳遞、轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控。糖胺聚糖的糖鏈上存在大量硫酸基,其圖案和密度共同調(diào)控多糖生物活性。但是,其圖案和密度的差異到底會(huì)對(duì)蛋白活性產(chǎn)生何種影響,在腫瘤細(xì)胞的生命活動(dòng)中其到底扮演何種角色,以此發(fā)揮抗腫瘤活性,還有待深入解析。近年來(lái),超順磁納米粒子快速發(fā)展,其易于制備,尺寸可控等特點(diǎn)使其在細(xì)胞分離,靶向藥物傳遞,腫瘤熱療和磁共振成像等領(lǐng)域發(fā)揮重要的作用。本研究擬從HS雙糖單元中的N-乙酰氨基葡萄糖出發(fā),合成五種N-乙酰氨基葡萄糖,修飾到Fe3O4@SiO2納米粒子表面,再經(jīng)硫酸化,得到具有不同硫酸基圖案的糖納米粒子,并以胃癌細(xì)胞MGC 80-3為模型,研究這五種硫酸化納米糖粒子對(duì)于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。具體包括以下幾方面內(nèi)容:(1)核殼結(jié)構(gòu)的Fe3O4@SiO2納米粒子制備首先制備出磁性Fe3O... 

【文章來(lái)源】:江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 糖生物學(xué)的研究進(jìn)展及研究?jī)?nèi)容
        1.1.1 糖胺聚糖家族研究進(jìn)展
        1.1.2 肝素多糖及其抑制腫瘤活性的研究進(jìn)展
    1.2 肝素在應(yīng)用中存在的問(wèn)題
    1.3 解決方式
        1.3.1 肝素模擬類(lèi)似物的構(gòu)建
        1.3.2 糖納米粒子的構(gòu)建
    1.4 糖納米粒子的研究進(jìn)展
        1.4.1 糖納米粒子的制備方式
        1.4.2 糖納米粒子的應(yīng)用
    1.5 本文研究思路及意義
第二章 四氧化三鐵二氧化硅納米粒子的制備
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
3O4以及Fe3O4@SiO2納米粒子的制備">        2.3.1 Fe3O4以及Fe3O4@SiO2納米粒子的制備
3O4@SiO2納米粒子表面修飾">        2.3.2 Fe3O4@SiO2納米粒子表面修飾
3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的粒徑及形貌表征">        2.3.3 Fe3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的粒徑及形貌表征
3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的XRD測(cè)定">        2.3.4 Fe3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的XRD測(cè)定
3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的XPS測(cè)定">        2.3.5 Fe3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的XPS測(cè)定
3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的磁學(xué)性能表征">        2.3.6 Fe3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的磁學(xué)性能表征
3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的紅外測(cè)定">        2.3.7 Fe3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的紅外測(cè)定
3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的TGA測(cè)定">        2.3.8 Fe3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的TGA測(cè)定
    2.4 結(jié)果與討論
3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的粒徑和形貌表征">        2.4.1 Fe3O4和Fe3O4@SiO2納米粒子的粒徑和形貌表征
3O4和Fe3O4@SiO2的XRD表征">        2.4.2 Fe3O4和Fe3O4@SiO2的XRD表征
3O4和Fe3O4@SiO2的XPS表征">        2.4.3 Fe3O4和Fe3O4@SiO2的XPS表征
3O4和Fe3O4@SiO2紅外表征">        2.4.4 Fe3O4和Fe3O4@SiO2紅外表征
3O4和Fe3O4@SiO2的磁學(xué)性能表征">        2.4.5 Fe3O4和Fe3O4@SiO2的磁學(xué)性能表征
3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的表征">        2.4.6 Fe3O4,Fe3O4@SiO2和Fe3O4@SiO2炔基的表征
    2.5 本章小結(jié)
第三章 硫酸化糖納米粒子的制備及其活性評(píng)價(jià)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        3.2.2 常用試劑的配置
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 定點(diǎn)保護(hù)的N-乙酰氨基葡萄糖的制備及表征
3O4@SiO2納米粒子的制備">        3.3.2 糖基化Fe3O4@SiO2納米粒子的制備
        3.3.3 硫酸化糖納米粒子的制備
3O4@SiO2納米粒子的TGA分析">        3.3.4 糖基化Fe3O4@SiO2納米粒子的TGA分析
        3.3.5 硫酸鋇比濁法測(cè)定硫酸化糖納米粒子硫酸根含量
        3.3.7 硫酸化糖納米粒子的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        3.3.8 硫酸化糖納米粒子的細(xì)胞凋亡分析
        3.3.9 細(xì)胞凋亡過(guò)程中的FITC和PI染色
        3.3.10 細(xì)胞凋亡過(guò)程中Hoechst33258染色
        3.3.11 JC-1檢測(cè)以及胞內(nèi)活性氧含量檢測(cè)
        3.3.12 WesternBlot測(cè)定
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 單糖1-5核磁以及質(zhì)譜結(jié)果分析
        3.4.2 糖基化納米粒子的TGA分析
        3.4.3 硫酸化糖納米粒子的硫酸根含量確定
        3.4.4 硫酸化糖修飾納米粒子的表征
        3.4.5 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        3.4.6 細(xì)胞凋亡學(xué)評(píng)價(jià)
            3.4.6.1 細(xì)胞凋亡分析
            3.4.6.2 線(xiàn)粒體膜電位分析
            3.4.6.3 活性氧含量評(píng)價(jià)
            3.4.6.4 細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)
        3.4.7 Westernblot分析
    3.5 本章小結(jié)
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]四氧化三鐵納米粒子表面接枝聚L-谷氨酸芐酯多孔微載體的構(gòu)建和性能[J]. 徐盛華,夏鵬飛,張坤璽,高龍,尹靜波.  高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào). 2017(07)
[2]硫酸鋇比濁法測(cè)定皂角多糖修飾物中硫酸基的研究[J]. 張亞男.  泰山學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(03)
[3]褐藻硫酸多糖硫酸基含量測(cè)定—硫酸鋇比濁法研究[J]. 叢建波,王長(zhǎng)振,李妍,吳可.  解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào). 2003(03)



本文編號(hào):2930080

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