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載自殺基因靶向超聲分子探針制備及其超聲顯像的實驗研究

發(fā)布時間:2020-12-21 14:11
  目的制備一種包裹液態(tài)氟碳及載肝癌治療基因質(zhì)粒,并具有葉酸分子靶向性的納米級超聲分子探針,研究其基本特性及超聲顯像能力。方法通過碳乙亞胺法在聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)表面連接葉酸分子,制成靶向膜材料(FA-PLGA)后,采用雙乳化法制備載有全氟戊烷(PFP)的納米級靶向超聲造影劑,將其與多聚賴氨酸孵育后,形成表面帶正電荷的陽離子,利用正負(fù)電荷吸附作用,使納米粒表面載上目標(biāo)質(zhì)粒S-HSV1-TK,得到S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA。使用低強(qiáng)度聚焦超聲(LIFU)輻照的方式處理納米粒,顯微鏡下觀察其相變情況,于超聲造影模式下觀察其體外顯影效果,流式細(xì)胞儀檢測其連靶率;用PLGA代替FA-PLGA,使用相同方法制備無葉酸的非靶向造影劑,將靶向造影劑和非靶向造影劑分別與肝癌細(xì)胞HepG2孵育,觀察其體外尋靶能力。結(jié)果成功制備了載有質(zhì)粒及PFP的納米級靶向超聲造影劑S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA,該納米粒大小均一,分散性好,平均粒徑(200.50±66.34)nm,平均表面電位(37.40±7.08)mV。使用LIFU 5檔輻照5 min后,顯微鏡下可見較多的納米粒... 

【文章來源】:臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志. 2020年07期

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

載自殺基因靶向超聲分子探針制備及其超聲顯像的實驗研究


納米粒熒光顯微鏡圖(×600)

納米粒,光鏡,顯微鏡,熒光


納米粒普通光鏡圖(×600)

電鏡圖,納米粒,熒光,共聚焦顯微鏡


流式細(xì)胞儀雙熒光檢測顯示同時發(fā)綠色熒光與紅色熒光的納米粒約占95%,即納米粒的連靶率約為95%(圖9)。共聚焦顯微鏡下觀察示,帶紅色熒光的納米粒與帶綠色熒光的FA重合度較高,說明納米粒有較高的連靶率(圖10)。體外細(xì)胞實驗中,共聚焦顯微鏡下觀察示靶向納米粒較非靶向納米粒更多地黏附在HepG2細(xì)胞周邊(圖11),說明其對HepG2細(xì)胞靶向性明顯。圖4 納米粒平均粒徑為(200.50±66.34)nm

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號:2929961

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