載自殺基因靶向超聲分子探針制備及其超聲顯像的實驗研究
發(fā)布時間:2020-12-21 14:11
目的制備一種包裹液態(tài)氟碳及載肝癌治療基因質(zhì)粒,并具有葉酸分子靶向性的納米級超聲分子探針,研究其基本特性及超聲顯像能力。方法通過碳乙亞胺法在聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)表面連接葉酸分子,制成靶向膜材料(FA-PLGA)后,采用雙乳化法制備載有全氟戊烷(PFP)的納米級靶向超聲造影劑,將其與多聚賴氨酸孵育后,形成表面帶正電荷的陽離子,利用正負(fù)電荷吸附作用,使納米粒表面載上目標(biāo)質(zhì)粒S-HSV1-TK,得到S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA。使用低強(qiáng)度聚焦超聲(LIFU)輻照的方式處理納米粒,顯微鏡下觀察其相變情況,于超聲造影模式下觀察其體外顯影效果,流式細(xì)胞儀檢測其連靶率;用PLGA代替FA-PLGA,使用相同方法制備無葉酸的非靶向造影劑,將靶向造影劑和非靶向造影劑分別與肝癌細(xì)胞HepG2孵育,觀察其體外尋靶能力。結(jié)果成功制備了載有質(zhì)粒及PFP的納米級靶向超聲造影劑S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA,該納米粒大小均一,分散性好,平均粒徑(200.50±66.34)nm,平均表面電位(37.40±7.08)mV。使用LIFU 5檔輻照5 min后,顯微鏡下可見較多的納米粒...
【文章來源】:臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志. 2020年07期
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
納米粒熒光顯微鏡圖(×600)
納米粒普通光鏡圖(×600)
流式細(xì)胞儀雙熒光檢測顯示同時發(fā)綠色熒光與紅色熒光的納米粒約占95%,即納米粒的連靶率約為95%(圖9)。共聚焦顯微鏡下觀察示,帶紅色熒光的納米粒與帶綠色熒光的FA重合度較高,說明納米粒有較高的連靶率(圖10)。體外細(xì)胞實驗中,共聚焦顯微鏡下觀察示靶向納米粒較非靶向納米粒更多地黏附在HepG2細(xì)胞周邊(圖11),說明其對HepG2細(xì)胞靶向性明顯。圖4 納米粒平均粒徑為(200.50±66.34)nm
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]攜帶cRGD肽的靶向納米粒超聲造影劑的制備以及體外尋靶實驗研究[J]. 宣吉晴,陳瑜莉,敖夢,王志剛,鄭元義,汪朝霞,李奧. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2017(06)
[2]葉酸修飾的聚乙烯亞胺-聚乙二醇共聚物載體在體內(nèi)外轉(zhuǎn)染效率的研究[J]. 梁姬寰,文華穎,馮宇婷,劉國峰,朱莉娜,周毅. 西北藥學(xué)雜志. 2017(01)
[3]靶向EGFRvⅢ包裹液態(tài)氟碳的高分子納米球的制備及其體外靶向能力的評價[J]. 何燕瓊,劉雙,景珅,何雨佳,張娜,劉旭杰,王志剛,彭志平. 中國介入影像與治療學(xué). 2017(01)
[4]葉酸靶向液態(tài)氟碳脂質(zhì)納米粒的制備及其超聲分子顯像卵巢癌實驗[J]. 劉建新,尚婷婷,徐芬芬,王志剛,李攀,蘇琳. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2016(12)
[5]靶向VEGFR-3載阿霉素脂質(zhì)微泡超聲造影劑體外顯影及尋靶能力的實驗研究[J]. 葉鳴,王志剛,周鴻,牛誠誠,陳昶宇,劉瑩. 中國臨床醫(yī)學(xué)影像雜志. 2015(07)
[6]KDR啟動子驅(qū)動的CD/TK雙自殺基因聯(lián)合survivin基因干擾抑制肝癌細(xì)胞生長的體內(nèi)研究[J]. 楊六成,吳凱,黃宗海,徐帥,王健俊,趙海軍. 中國普通外科雜志. 2015(01)
[7]超聲微泡破裂法聯(lián)合陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的實驗研究[J]. 丁璐,陳云超,劉曉玲,劉娜香,張青萍. 中華超聲影像學(xué)雜志. 2013 (08)
[8]超聲介導(dǎo)擊破微泡增強(qiáng)型綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染正常大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織[J]. 景香香,劉潔,楊炳昂,符少清,吳湯娜,王東林. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2011(12)
本文編號:2929961
【文章來源】:臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志. 2020年07期
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
納米粒熒光顯微鏡圖(×600)
納米粒普通光鏡圖(×600)
流式細(xì)胞儀雙熒光檢測顯示同時發(fā)綠色熒光與紅色熒光的納米粒約占95%,即納米粒的連靶率約為95%(圖9)。共聚焦顯微鏡下觀察示,帶紅色熒光的納米粒與帶綠色熒光的FA重合度較高,說明納米粒有較高的連靶率(圖10)。體外細(xì)胞實驗中,共聚焦顯微鏡下觀察示靶向納米粒較非靶向納米粒更多地黏附在HepG2細(xì)胞周邊(圖11),說明其對HepG2細(xì)胞靶向性明顯。圖4 納米粒平均粒徑為(200.50±66.34)nm
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]攜帶cRGD肽的靶向納米粒超聲造影劑的制備以及體外尋靶實驗研究[J]. 宣吉晴,陳瑜莉,敖夢,王志剛,鄭元義,汪朝霞,李奧. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2017(06)
[2]葉酸修飾的聚乙烯亞胺-聚乙二醇共聚物載體在體內(nèi)外轉(zhuǎn)染效率的研究[J]. 梁姬寰,文華穎,馮宇婷,劉國峰,朱莉娜,周毅. 西北藥學(xué)雜志. 2017(01)
[3]靶向EGFRvⅢ包裹液態(tài)氟碳的高分子納米球的制備及其體外靶向能力的評價[J]. 何燕瓊,劉雙,景珅,何雨佳,張娜,劉旭杰,王志剛,彭志平. 中國介入影像與治療學(xué). 2017(01)
[4]葉酸靶向液態(tài)氟碳脂質(zhì)納米粒的制備及其超聲分子顯像卵巢癌實驗[J]. 劉建新,尚婷婷,徐芬芬,王志剛,李攀,蘇琳. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2016(12)
[5]靶向VEGFR-3載阿霉素脂質(zhì)微泡超聲造影劑體外顯影及尋靶能力的實驗研究[J]. 葉鳴,王志剛,周鴻,牛誠誠,陳昶宇,劉瑩. 中國臨床醫(yī)學(xué)影像雜志. 2015(07)
[6]KDR啟動子驅(qū)動的CD/TK雙自殺基因聯(lián)合survivin基因干擾抑制肝癌細(xì)胞生長的體內(nèi)研究[J]. 楊六成,吳凱,黃宗海,徐帥,王健俊,趙海軍. 中國普通外科雜志. 2015(01)
[7]超聲微泡破裂法聯(lián)合陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的實驗研究[J]. 丁璐,陳云超,劉曉玲,劉娜香,張青萍. 中華超聲影像學(xué)雜志. 2013 (08)
[8]超聲介導(dǎo)擊破微泡增強(qiáng)型綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染正常大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織[J]. 景香香,劉潔,楊炳昂,符少清,吳湯娜,王東林. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù). 2011(12)
本文編號:2929961
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