目的分析甾醇類新藥NSC67657誘導(dǎo)HL60細胞單核系分化中,β-catenin/ICAT蛋白的差異表達及相互作用,探討NSC67657誘導(dǎo)細胞分化的作用機制。方法應(yīng)用10μmol·L^-1NSC67657誘導(dǎo)HL60細胞分化,采用細胞化學(xué)染色和流式細胞技術(shù)評估細胞的分化方向和分化程度;通過RT-PCR和Western blot方法驗證藥物作用細胞前后β-catenin和ICAT基因和蛋白的表達差異;采用免疫共沉淀技術(shù)分析β-catenin與ICAT蛋白的相互作用情況;采用激光共聚焦技術(shù)協(xié)同分析目的蛋白的差異表達及細胞內(nèi)定位。結(jié)果NSC67657可誘導(dǎo)HL60細胞向單核系分化。在10μmol·L^-1NSC67657作用5d后,CD14的表達可達到90%以上,細胞化學(xué)染色支持細胞單核系分化結(jié)論。分化后ICAT基因和蛋白表達明顯升高（P<0.01）,而β-catenin基因和蛋白表達明顯下降（P<0.05）。免疫共沉淀結(jié)果顯示,ICAT與β-catenin蛋白在細胞分化前后都存在相互作用,藥物誘導(dǎo)細胞分化后兩者蛋白相互作用條帶吸光度明... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報. 2015年11期 北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]小檗堿抑制HCT116細胞生長與Wnt/β-catenin信號的關(guān)系研究[J]. 楊秋珺,周龍洋,劉映孜,牟鈺欽,吳柯,周岐新,羅進勇,何百成.  中國藥理學(xué)通報. 2012(09)
[2]甲磺酸甾醇類藥物誘導(dǎo)HL60細胞分化及其蛋白質(zhì)組表達差異的研究[J]. 王偉佳,唐薇,毛小琴,邱宗蔭.  中國藥理學(xué)通報. 2008(12)



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