用穩(wěn)態(tài)熒光光譜及時(shí)間分辨熒光技術(shù)研究水溶液中甲啶鉑與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。加入甲啶鉑后,BSA熒光發(fā)射峰從335 nm紅移到337.5 nm,并伴隨著熒光強(qiáng)度的猝滅,表明甲啶鉑與BSA發(fā)生了相互作用;單指數(shù)擬合得到的熒光壽命結(jié)果證實(shí),甲啶鉑對(duì)BSA的猝滅為靜態(tài)猝滅;熒光壽命的雙指數(shù)擬合結(jié)果表明,BSA的內(nèi)在熒光主要是由第212位和第134位的色氨酸殘基貢獻(xiàn)的,BSA中第212位色氨酸殘基和苯丙氨酸殘基可能是甲啶鉑的靶向目標(biāo)。 

【文章來(lái)源】：貴金屬. 2020年01期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

測(cè)量波長(zhǎng)為335 nm的熒光衰減曲線(a)和單指數(shù)擬合曲線(b)

由圖1(c)可知，加入甲啶鉑后的BSA溶液在281 nm左右處有一細(xì)小的發(fā)射峰，可用于測(cè)量時(shí)間分辨熒光。甲啶鉑在283 nm處有最大熒光發(fā)射峰，因此測(cè)量時(shí)要考慮甲啶鉑自身的熒光衰減情況。在281 nm波長(zhǎng)測(cè)定了甲啶鉑溶液(0.005 mmol/L)、BSA溶液(0.16 mg/mL)、甲啶鉑(0.005 mmol/L)-BSA(0.16mg/mL)混合液的時(shí)間分辨熒光，進(jìn)行雙指數(shù)擬合，擬合結(jié)果列于表2，擬合圖如圖3所示。由表2可知，加入甲啶鉑的BSA溶液有2個(gè)熒光壽命，分別為τ1≈0.26 ns，τ2≈4.2 ns。τ1小于儀器激發(fā)光源的激發(fā)脈沖(1 ns)，沒有實(shí)際意義而不需討論；僅需分析加入單一BSA的熒光壽命(τ2≈4.4 ns)，以及加入甲啶鉑的BSA的熒光壽命(τ2≈4.2 ns)。根據(jù)文獻(xiàn)[24]數(shù)據(jù)，Phe的最大熒光發(fā)射峰在281 nm，熒光壽命為4.67 ns，與單一BSA的τ2(≈4.4 ns)十分接近；加入甲啶鉑的BSA的熒光壽命τ2=4.2 ns，小于Phe的4.67 ns，且小于甲啶鉑的壽命τ2。推測(cè)甲啶鉑與BSA中的Phe殘基可能發(fā)生了相互作用。

圖1(b)是在256 nm波長(zhǎng)激發(fā)下，BSA溶液(0.16mg/mL)、甲啶鉑稀釋液系列、甲啶鉑與BSA混合液系列的熒光光譜。由圖1(b)可以看出，在甲啶鉑的熒光發(fā)射峰283 nm處。甲啶鉑稀釋液系列(a～h)濃度變化范圍800，而熒光強(qiáng)度為750～1200，變化范圍約450，熒光強(qiáng)度與甲啶鉑濃度變化無(wú)規(guī)律性關(guān)系。加入甲啶鉑后，BSA的熒光發(fā)生猝滅，熒光強(qiáng)度從大約1700降低到400左右，猝滅程度與甲啶鉑濃度同樣無(wú)規(guī)律性的關(guān)系。混合液系列(a"～h")中甲啶鉑的濃度是甲啶鉑稀釋液系列(a～h)中的1/5，熒光強(qiáng)度波動(dòng)范圍約為100，也約為熒光強(qiáng)度變化范圍的1/5。由此推測(cè)，不同濃度的甲啶鉑與BSA混合液的熒光強(qiáng)度波動(dòng)是甲啶鉑自身造成的。據(jù)此推測(cè)甲啶鉑對(duì)BSA的熒光猝滅為靜態(tài)猝滅。根據(jù)圖1(b)，在256 nm波長(zhǎng)激發(fā)下，甲啶鉑在300～400 nm處的熒光發(fā)射強(qiáng)度很小，因此在后續(xù)測(cè)定中，當(dāng)測(cè)量波長(zhǎng)為335 nm時(shí)，不考慮甲啶鉑自身的熒光衰減情況。在甲啶鉑和BSA的混合液中，當(dāng)甲啶鉑的濃度為0.001 mmol/L時(shí)，BSA熒光發(fā)射峰發(fā)生最大紅移，從335 nm紅移到337.5 nm，紅移了2.5 nm，如圖1(c)所示。推測(cè)甲啶鉑對(duì)BSA的熒光猝滅為靜態(tài)猝滅。2.2 時(shí)間分辨熒光技術(shù)測(cè)定熒光壽命

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：2922085